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大鼠創(chuàng)傷性腦損傷_艾菱菲生物專業(yè)科研服務(wù)團(tuán)隊(duì)
創(chuàng)傷性腦損傷（Traumatic Brain Injury,，TBI）作為全球范圍內(nèi)影響人類健康的重要問(wèn)題，一直是醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的重點(diǎn),。頭部受到外力作用導(dǎo)致的腦組織損傷,，可引發(fā)一系列復(fù)雜癥狀，如意識(shí)障礙,、***,、嘔吐、言語(yǔ)及肢體運(yùn)動(dòng)障礙等,，嚴(yán)重者甚至危及生命,。車(chē)禍、摔倒、撞擊等都是常見(jiàn)的致傷原因,，其損傷程度與外力大小,、作用部位和速度等因素密切相關(guān) 。
在對(duì) TBI 的研究中,，構(gòu)建可靠的動(dòng)物模型是深入探究其發(fā)病機(jī)制,、***方法的關(guān)鍵環(huán)節(jié)?？刂破記_擊（Rodent Controlled Cortical Impact Injury,，CCI）模型是目前廣泛應(yīng)用的誘導(dǎo) TBI 的方法。
以 8 周齡雄性 SD 大鼠為例,，具體建模過(guò)程嚴(yán)謹(jǐn)且細(xì)致,。首先，將大鼠稱重并進(jìn)行麻醉處理,，麻醉后以俯臥位固定在手術(shù)墊上,，用剃須刀片仔細(xì)剃除大鼠頭頂部毛發(fā)，充分暴露頭皮,，接著用手術(shù)刀作頭頂皮膚正中切口,，使顱骨、表面筋膜和軟組織清晰可見(jiàn),。使用 40% 雙氧水緩慢輕柔地溶解掉顱骨表面軟組織后,，用直徑 0.4cm 鉆頭在顱左側(cè)以中線旁 2.5mm，前囟后 1.5mm 為中心磨開(kāi)直徑 5mm 的骨窗,，同時(shí)要小心保留硬腦膜,。隨后，將大鼠固定在 TBI 建模裝置上,，精細(xì)設(shè)置參數(shù)：沖擊深度 3.5mm,，速度 5m/s，接觸時(shí)間 500ms ,。撞擊完成后,，迅速將大鼠從裝置中取出，用棉簽短暫壓迫止血,，清理手術(shù)野,，再間斷縫合切口。而 Sham 組大鼠*開(kāi)放顱窗,，不進(jìn)行 TBI 操作,。整個(gè)操作過(guò)程中，需格外注意避免出血和對(duì)周?chē)M織的刺激,，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,。所有大鼠處理完畢后,，放置于加熱墊上，等待其自然蘇醒,。建模完成后,，評(píng)估大鼠的神經(jīng)系統(tǒng)功能缺損情況至關(guān)重要。
改良神經(jīng)功能評(píng)分（Mahmood’s method Neurological Severity Score,，mNSS）是一種常用的綜合評(píng)分系統(tǒng),。它從運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)和反射三個(gè)方面***考量動(dòng)物的神經(jīng)功能表現(xiàn),，在腦損傷,、神經(jīng)退行性疾病以及神經(jīng)保護(hù)藥物篩選等實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用***。
運(yùn)動(dòng)功能：正常運(yùn)動(dòng)的大鼠得 0 分,，它們能夠自由,、協(xié)調(diào)地行走、奔跑,，四肢動(dòng)作流暢,；若出現(xiàn)輕微步態(tài)異常，但仍能自主行走并保持平衡,，評(píng)分為 1 分,；行走困難、步態(tài)不穩(wěn),、肢體協(xié)調(diào)性差,，偶爾跌倒，在輔助下能行走的大鼠為 2 分,；幾乎不能自主行走,，肢體活動(dòng)嚴(yán)重受限，只有在強(qiáng)烈刺激下才有微弱活動(dòng)的,，得 3 分,；完全喪失肢體運(yùn)動(dòng)能力，對(duì)任何刺激無(wú)反應(yīng)的則為 4 分,。
感覺(jué)功能：對(duì)觸覺(jué),、痛覺(jué)和本體感覺(jué)刺激反應(yīng)正常的大鼠得 0 分；反應(yīng)稍遲鈍,，如棉棒輕觸反應(yīng)延遲、針刺痛覺(jué)減弱,、傾斜平面平衡能力稍差,，但仍有反應(yīng)的為 1 分；感覺(jué)刺激反應(yīng)明顯遲鈍,，需較強(qiáng)刺激才有反應(yīng),，痛覺(jué)明顯減弱，傾斜平面難維持平衡，本體感覺(jué)受損的是 2 分,；幾乎對(duì)刺激無(wú)反應(yīng),，*在極強(qiáng)刺激下可能有微弱反應(yīng)或無(wú)反應(yīng)的為 3 分。
反射功能：角膜反射,、耳反射,、翻正反射等生理反射正常的得 0 分；部分反射減弱,，如角膜反射或耳反射稍有延遲,、翻正反射稍慢，但仍能完成反射動(dòng)作的為 1 分,；反射明顯減弱,，需較強(qiáng)刺激才能引出，且反射動(dòng)作不完整或延遲明顯的是 2 分,；大部分反射消失,，強(qiáng)烈刺激也難引出反射動(dòng)作的為 3 分。mNSS 總分為 0 - 10 分,，分?jǐn)?shù)越高表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重,。0 - 3 分表明神經(jīng)功能基本正常或*有輕微缺損,，動(dòng)物日常生活活動(dòng)基本不受影響,；4 - 6 分提示中度神經(jīng)功能缺損，動(dòng)物可能出現(xiàn)明顯的運(yùn)動(dòng),、感覺(jué)或反射異常,，正常生活活動(dòng)受到一定影響；7 - 10 分則表示重度神經(jīng)功能缺損,，動(dòng)物生存質(zhì)量嚴(yán)重下降,，可能需要特殊護(hù)理。
此外,，抓力測(cè)試,、新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)和 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)等也常用于評(píng)估大鼠的相關(guān)能力。抓力測(cè)試能檢測(cè)大鼠的肌肉力量,；新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)基于大鼠對(duì)新奇事物的探索天性,，評(píng)估其情景記憶能力；Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)則主要用于評(píng)估大鼠的空間學(xué)習(xí)和工作記憶能力,。
對(duì) TBI 的研究,，從模型構(gòu)建到功能評(píng)估，每一個(gè)環(huán)節(jié)都凝聚著科研人員的心血,。通過(guò)對(duì)動(dòng)物模型的深入研究,，我們能夠更深入地了解 TBI 的發(fā)病機(jī)制,，為開(kāi)發(fā)更有效的***方法和干預(yù)措施提供理論依據(jù)，從而為 TBI 患者帶來(lái)康復(fù)的希望 ,。未來(lái),，隨著研究的不斷深入，相信在 TBI 的***和預(yù)防領(lǐng)域?qū)?huì)取得更多突破性的進(jìn)展,。
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