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Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ,,中鹽核酸酶),是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶,,廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中,,在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。這款核酸酶的適宜pH范圍很廣(pH 7.2-8.7),,且在125-250 mM鹽濃度內(nèi)具有適宜活性,。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,不需調(diào)整任何組分,,直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)高核酸酶活性,。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,,對(duì)HCD的去除更高效,、更徹底。因此,,M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體(如慢病毒,、逆轉(zhuǎn)錄病毒及溶瘤病毒等)的生產(chǎn)。在已有工藝中,,不需做任何調(diào)整,,用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶,,且去除HCD效率更高;重慶M-SAN中鹽核酸酶70950-202
ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,,致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶,。ArcticZymes目標(biāo)明確,推進(jìn)分子研究,、診斷和therapeutics領(lǐng)域的發(fā)展。30多年來(lái),,ArcticZymes只專注于酶學(xué)研究,,匯集一批志同道合的科學(xué)家,在酶學(xué)領(lǐng)域追求zhuoyue,、勇于創(chuàng)新,。ArcticZymes開(kāi)發(fā)創(chuàng)新解決方案,與客戶緊密協(xié)作,,提升產(chǎn)品品質(zhì),,從高質(zhì)量到zhuoyue,達(dá)成他們的目標(biāo),,重新定義生物藥生產(chǎn)的邊界,。在ArcticZymes,我們精心設(shè)計(jì)解決方案,,以從未出現(xiàn)的方式推動(dòng)行業(yè)向前發(fā)展,。甘肅中鹽核酸酶70950-160M-SAN HQ中鹽核酸酶在細(xì)胞培養(yǎng)條件或生理鹽濃度下具有較高活性。
此外,,文章作者對(duì)每個(gè)步驟的樣品進(jìn)行納米顆粒分析(NTA),,結(jié)果發(fā)現(xiàn):澄清環(huán)節(jié)后,M-SAN HQ中鹽核酸酶和Benzonase處理組才出現(xiàn)比較明確的LV病毒顆粒峰,;TFF處理后,,回流液樣品的LV病毒顆粒峰更加尖銳,表明病毒顆粒分散度更好,、穩(wěn)定性更高,。回流液的NTA結(jié)果進(jìn)一步表明,,M-SAN HQ中鹽核酸酶處理組只有一個(gè)病毒顆粒峰,,而B(niǎo)enzonase處理組的回流液中有三個(gè)峰。作者推測(cè)Benzonase處理組的病毒顆粒還有嚴(yán)重的病毒團(tuán)聚現(xiàn)象,,而呈現(xiàn)多峰現(xiàn)象,。
ArcticZymes Technologies提供獨(dú)特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,SANs)系列產(chǎn)品,,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈,、線狀,、環(huán)狀)的DNA和RNA;都來(lái)自于深海microbes,,通過(guò)Pichia pastoris發(fā)酵生產(chǎn)得到,。這兩款酶的區(qū)別在于發(fā)揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM,。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,不需調(diào)整任何組分,,M-SAN HQ中鹽核酸酶即可表現(xiàn)較高核酸酶活性,。
ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,為生物工藝領(lǐng)域提供了革新性,、更高效的方案來(lái)解決大規(guī)模生產(chǎn)中核酸殘留問(wèn)題,。此前,受限于鹽濃度和核酸酶活性的負(fù)調(diào)控效應(yīng),,行業(yè)在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡,,更多的是讓工藝選擇適應(yīng)酶。此后,,行業(yè)可以根據(jù)工藝具體需求而選擇更合適的酶產(chǎn)品,,既能達(dá)到理想的去除效果,又能輕松控制酶用量及綜合成本,,真正實(shí)現(xiàn)讓酶適應(yīng)工藝選擇,。SAN HQ和M-SAN HQ為行業(yè)提供更高效率的解決方案。相比全能核酸酶,,M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD酶切成更小片段,,破壞核小體結(jié)構(gòu)。青海生理鹽條件中鹽核酸酶70950-150
Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ),,中文名稱中鹽核酸酶,。重慶M-SAN中鹽核酸酶70950-202
一般來(lái)說(shuō),生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo))為主,,能高效降解任何形式(雙鏈,、單鏈、線狀,、環(huán)狀)的DNA和RNA,。該酶來(lái)自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過(guò)E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到,。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),,且酶活隨著鹽濃度上升而下降,,在300mM鹽濃度時(shí)酶活幾乎喪失。對(duì)于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,,而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定,。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,,Benzonase活性受到抑制。重慶M-SAN中鹽核酸酶70950-202
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