監(jiān)管部門對HCD的殘留量有明確的規(guī)定,。美國FDA發(fā)布的指導原則中指出生物制品HCD殘余限度為 100pg/劑，對于大劑量生物制品如單克隆抗體,，根據(jù)其殘留DNA來源及給藥途徑,，殘留量可放寬至 10ng/劑。細胞基因藥物終產(chǎn)品的DNA殘留有兩種來源,，分別是宿主細胞DNA（HCD）和轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒,。質(zhì)粒和HCD的存在形式不同，去除效率也差別很大,。其中,，質(zhì)粒是裸露的DNA雙鏈，帶強負電荷,，通過色譜純化主要是離子交換能夠很高效去除,；HCD則是以核小體緊密折疊形成的染色質(zhì)形式存在，幾乎不以裸DNA形式存在，所以很難去除,。SAN HQ高鹽核酸酶有兩個級別,，分別是生物工藝級別SAN HQ和GMP級別SAN HQ GMP。廣東高鹽核酸酶70921-202

Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒,，MV)為例,，評估了四種不同核酸酶（BenzonaseTM,、DeneraseTM,、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶）對于染色質(zhì)DNA去除的效果。Vero細胞通過微載體貼壁培養(yǎng)來生產(chǎn)麻疹病毒MV,，72hr后收獲上清液,，使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份，置于-80℃保存便于后續(xù)使用,。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對應鹽濃度,，并加入50 U/ml核酸酶，37℃孵育2hr進行消化,，消化后留樣,；將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子，收集流穿液,，之后洗雜,、洗脫，并分別留樣,。通過SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn),，相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶，在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段,，甚至將核小體DNA剪切更徹底,。江蘇SAN HQ TF高鹽核酸酶70921-160在生物制品生產(chǎn)，如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中,，宿主細胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一,。

基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如,，在生產(chǎn),、儲存和處理過程中，單克隆抗體也會受到低滴度,、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn),。盡管與重組單克隆抗體相比，單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風險可能更低（取決于雜質(zhì)的類型,、劑量和給藥途徑）,，但這也不能忽視。由于這些相似性，制藥商,、化學品和輔料供應商有機會進行合作,，并開發(fā)創(chuàng)新的解決方案，以實現(xiàn)穩(wěn)健和成本效益高的AAV產(chǎn)品生產(chǎn),。

在抗體藥物及核酸藥物領域,，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑,、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品,、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin,、anti-MMAE等）,、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio,、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品,、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,，品牌有德國Genovis,、德國BASF、中國君研生物,、中國金傳生物,、中國毫厘科技、中國再帆生物等,。這些國產(chǎn)品牌都具有國內(nèi)自研,、自產(chǎn)能力，批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠,、品質(zhì)可控,，為行業(yè)發(fā)展提供更多國產(chǎn)選擇。SAN HQ終產(chǎn)品放行檢測包括微生物,、Fungus及Endotoxin檢測等,；

宿主細胞DNA殘留的擔憂是基于致ai風險理論，特別是生產(chǎn)細胞系所包含的致ai序列,，比如較常見腺病毒基因E1A和E1B（HEK293, PerC.6 和CAP 細胞系）,，人乳tou瘤病毒E6和E7基因（HeLa細胞系)等。當使用致ai細胞系生產(chǎn)AAV時,，下游純化須盡可能減少殘留DNA,。工業(yè)上一般使用核酸酶分解殘留DNA，普遍認為小于200 bp的DNA片段可有效降低致ai風險,。宿主細胞蛋白殘留與免疫原性,、炎癥或過敏性休克有關(guān),。盡管與非人類的生產(chǎn)原料相比（非人類細胞系如BHK21或昆蟲細胞，以及輔助病毒如HSV,、腺病毒,、桿狀病毒），人類細胞免疫原性比較弱,。在AAV生產(chǎn)過程中鹽濃度是純化工藝的重要參數(shù)之一,。遼寧SAN HQ TF高鹽核酸酶70921-150

染色質(zhì)的雙螺旋結(jié)構(gòu)影響DNA的檢測與酶切處理。廣東高鹽核酸酶70921-202

從細胞中釋放AAV載體的基本機械技術(shù)是反復冷凍/解凍,，然后是低速離心步驟然而,，但是這種技術(shù)很難放大生產(chǎn)。機械均質(zhì),，如法式壓濾,，是另一種裂解方法,，在這種方法中,，細胞膜在高壓剪切力作用下發(fā)生破裂。雖然這種方法是可放大的,，但是由于剪切應力引起的聚集和沉淀,，往往會導致產(chǎn)品損失。而化學裂解方式,，例如Triton X-100在病毒載體純化過程有較高的總收率,，而且易于放大。但是也有其局限性,。研究表明,，Triton X-100造成了一些急性口服毒性、眼睛損傷,、皮膚刺激和慢性水生毒性,。因此，該去垢劑在2016年被歐洲化學品管理局（European Chemicals Agency）被列為需要高度關(guān)注的物質(zhì),。廣東高鹽核酸酶70921-202