?通過(guò)三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體,，會(huì)引入宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）,、蛋白殘留（HCP）、工藝雜質(zhì)（如antibiotics、核酸酶等外源物質(zhì)）等污染,，存在潛在的致瘤性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn),。藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA。此外,，根據(jù)雜質(zhì)來(lái)源,、工藝以及產(chǎn)品類型不同，也會(huì)對(duì)HCD限度做不同要求,。為了達(dá)到這個(gè)要求,，一般通過(guò)核酸酶處理和色譜聯(lián)用的方法。一般在細(xì)胞培養(yǎng)液裂解/收獲,、澄清收獲及超濾濃縮等環(huán)節(jié)加入核酸酶處理,，需要工藝摸索來(lái)確認(rèn)處理方式。M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽濃度下具有較高活性,，較適合鹽濃度為125-250 mM,。黑龍江上海倍篤生物中鹽核酸酶

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細(xì)胞基因組，并穩(wěn)定持久地表達(dá),，已經(jīng)在批準(zhǔn)的CAR-T產(chǎn)品和許多臨床產(chǎn)品中得到應(yīng)用,。Shou個(gè)成功的基因藥物臨床試驗(yàn)是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV，gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒)作為基因轉(zhuǎn)移載體醫(yī)治兒童的X性染色體連鎖嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SCID-X1）,。目前上市的6個(gè)細(xì)胞藥物產(chǎn)品全部采用逆轉(zhuǎn)錄病毒（3個(gè)為gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,，3個(gè)慢病毒載體）作為基因轉(zhuǎn)移載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體目前常用的主要有兩個(gè)：gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(Retroviral vector,RV)和慢病毒載體(Lentivirus vector,LV),。兩種病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,，在自身攜帶的逆轉(zhuǎn)錄酶催化下將其正鏈RNA均逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。病毒顆粒比較大,，約為100nm（70-100nm,，有的至200nm）,外層為表面突起的脂蛋白套膜，套膜內(nèi)為20面體的衣殼（capsid）,核衣殼內(nèi)由一螺旋結(jié)構(gòu)的核酸,。廣東等滲條件中鹽核酸酶70950-202M-SAN HQ中鹽核酸酶終產(chǎn)品放行檢測(cè)包括microbe,、Fungus及內(nèi)毒檢測(cè)等；

細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域的進(jìn)展使得對(duì)高質(zhì)量基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的需求急劇增加,，包括高質(zhì)量慢病毒載體(LV)的大規(guī)模生產(chǎn)。宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）是一類主要的工藝相關(guān)雜質(zhì),，對(duì)下游純化帶來(lái)很大挑戰(zhàn),。根據(jù)相關(guān)法規(guī)要求，需要去除HCD才能達(dá)到臨床級(jí)LV,。HCD去除是通過(guò)核酸酶處理聯(lián)合下游工藝（DSP）共同實(shí)現(xiàn)的,。文章作者研究了兩款核酸酶M-SAN HQ中鹽核酸酶(ArcticZymes Technologies)和Benzonase(Merck)對(duì)HCD去除效率的差別，其下游工藝包含過(guò)濾澄清及TFF超濾。

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶,，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit,。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量,，特異性的anti-M-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在孔板上,，辣根過(guò)氧化酶HRP標(biāo)記anti-M-SAN作為檢測(cè)抗體，TMB是檢測(cè)反應(yīng)底物,。該試劑盒特異識(shí)別M-SAN HQ中鹽核酸酶,，對(duì)其它核酸酶沒(méi)有特異性結(jié)合。它的定量范圍是0.12-7.5ng/ml,；12*8strips的設(shè)計(jì)規(guī)格,，使用靈活，更能降低使用成本,。在已有工藝中,，不需做任何調(diào)整，用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶,，且去除HCD效率更高,；

倫敦大學(xué)學(xué)院（UCL）的工藝開(kāi)發(fā)團(tuán)隊(duì)，在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒（Lentivirus,，LV）生產(chǎn)過(guò)程中,，比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時(shí)間,、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn),，發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高、酶切時(shí)間更短,，同時(shí)用納米顆粒分析（NTA）技術(shù)確認(rèn)M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少,、穩(wěn)定性更高。他們會(huì)繼續(xù)探究HCD是否影響LV的穩(wěn)定性,，及對(duì)LV侵染效率和生命周期是否有影響,。通過(guò)更多研究，我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產(chǎn)的關(guān)鍵機(jī)制,。ArcticZymes Technologies旨在是研究和開(kāi)發(fā)具有獨(dú)特特性的酶,。甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950-160

M-SAN HQ中鹽核酸酶的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，都符合USP-EP要求,。黑龍江上海倍篤生物中鹽核酸酶

基因藥物是指將外源基因引入靶細(xì)胞,，糾正或補(bǔ)償基因缺陷或異常引起的疾病的。這種策略對(duì)許多疾病的康復(fù)有很大的潛力,，包括ai癥,、神經(jīng)退行性疾病和心血管疾病,。目前已經(jīng)進(jìn)行了2000多項(xiàng)基因藥物臨床試驗(yàn)，大多數(shù)載體已被證明是有效和安全的,。目前的研究表明,，大約64%的基因藥物臨床試驗(yàn)是為了醫(yī)治ai癥疾病，而最常見(jiàn)的策略是傳遞抑制cancer生長(zhǎng)或殺死cancer的基因,?；蛩幬锏年P(guān)鍵是使用安全有效的基因傳遞載體，如病毒載體和非病毒載體,。病毒載體是常用的基因?qū)氲姆绞街?。而腺病毒的載體由于轉(zhuǎn)基因效率高，不受靶細(xì)胞是否分裂的限制,，容易制備高滴度的病毒載體,，在基因藥物和免疫領(lǐng)域有更多的應(yīng)用。黑龍江上海倍篤生物中鹽核酸酶