在生物工藝中，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細胞DNA（HCD）,，并將其分解成足夠小的片段,，以便在下游純化過程中去除。雖然大多數核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,，比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈,，但實際生產中的核酸污染情況更加復雜。HCD通常以染色質形式存在,，與細胞裂解碎片,、病毒顆粒等結合在一起，影響核酸酶的識別及剪切,。因此,，HCD去除的關鍵在于——核酸酶如何在復雜的生產體系中識別并剪切HCD。瓊脂糖膠結果顯示,，M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD消化成小于8nt的片段,。上海M-SAN中鹽核酸酶70950-160

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同,。低鹽濃度條件下,，AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結合到HCD上，從而產生病毒顆粒團聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升,，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞,，AAV病毒顆粒會逐漸解離。當鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右）,，AAV病毒顆粒與HCD的結合更弱,，AAV顆粒更穩(wěn)定。因此,，在高鹽濃度溶液中,，AAV顆粒更加穩(wěn)定，且有數據表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力,。所以,，我們推薦提高AAV病毒生產中的鹽濃度。陜西ArcticZymes中鹽核酸酶70950在已有工藝中,，不需做任何調整,，用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶，且去除HCD效率更高,；

在傳統(tǒng)生物技術行業(yè)（如抗體,、疫苗領域）使用的下游純化工藝步驟，已經用于慢病毒的大規(guī)模下游處理,。主要是基于膜(過濾/澄清,，利用切向流過濾TFF進行濃縮/滲濾，基于膜的色譜)和色譜(離子交換色譜IEC,，親和色譜AC,，體積排阻色譜SEC)的技術。這些不同的過程步驟的組合是可變的,，在某些情況下,，不同的純化方法可以用于相同的目的。此外,，采用benzonase/M-SAN HQ中鹽核酸酶降解污染的DNA或者用于下游的一個步驟,，或者用于病毒生產階段。

文章作者對酶法去除dsDNA進行了優(yōu)化研究,，兩種酶濃度梯度為25U/ml,、50U/ml及100U/ml，Mg2+濃度為5mM,，通過PicoGreen檢測dsDNA含量,。結果發(fā)現(xiàn)，25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml的Benzonase,。此外,，在酶切反應速度方面，M-SAN HQ有更明顯的優(yōu)勢,，——在低濃度底物dsDNA（如20ng/ml）條件下,，50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內將dsDNA降解到2ng/ml左右；而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,，dsDNA濃度依然是12ng/ml左右,。M-SAN HQ中鹽核酸酶兼容常見細胞培養(yǎng)基，在多種培養(yǎng)基條件下去除核酸污染效率更高,；

經典的慢病毒載體（LV）的生產工藝如下,，——三質粒系統(tǒng)瞬時轉染HEK293細胞系，轉染24小時后LV由轉染陽性細胞生產并排出到培養(yǎng)上清液中,；收獲上清培養(yǎng)液后,，加入核酸酶去除HCD污染，通過澄清步驟去除大的細胞碎片等雜質,；下游純化步驟分離LV載體,，純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心,；純化后的LV病毒顆粒經過無菌過濾,，更換到優(yōu)化后的配方中，灌裝并冷凍保存,。每批Car-T生產時取對應量的LV病毒,，切忌反復凍融，否則LV病毒會失活,。Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ）,，中文名稱中鹽核酸酶。四川M-SAN HQ中鹽核酸酶70950-160

致力于從深海microbe中識別新的冷適應酶,，用于分子研究,、IVD和biopharma領域。上海M-SAN中鹽核酸酶70950-160

在抗體藥物及核酸藥物領域,，倍篤生物產品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,，主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產品,、ADC的payload抗體（如anti-DXD,、anti-Eribulin、anti-MMAE等）,、動物造模用陽性及陰性抗體,、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品,、抗體結構域分析蛋白酶,、蛋白聚糖分析水解酶等，品牌有德國Genovis、德國BASF,、中國君研生物,、中國金傳生物、中國毫厘科技,、中國再帆生物等,。這些國產品牌都具有國內自研、自產能力,，批次生產穩(wěn)定可靠,、品質可控，為行業(yè)發(fā)展提供更多國產選擇,。上海M-SAN中鹽核酸酶70950-160