在生物工藝流程中，需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,，而核酸酶作為外源成份,，也需要在生產(chǎn)流程中去除,。核酸酶去除工藝包括熱滅活法,、酶抑制劑,、離子交換和親合層析法等,。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點(diǎn),，——空衣殼pI在6.3左右，包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒pI大致為5.9,。而來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,，SAN HQ高鹽核酸酶pI 9.6左右。因此,，在同樣的條件下，從AAV溶液中去除SAN HQ高鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易,、更徹底,。ArcticZymes所有產(chǎn)品的開發(fā)、生產(chǎn)及銷售等都符合ISO13485:2016質(zhì)量管理體系標(biāo)準(zhǔn),。四川基因藥物生產(chǎn)用高鹽核酸酶70921-202

AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度,。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測定AAV的含量時(shí),，通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位,，其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度，衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度,?；蚪M滴度一般采用qPCR、ddPCR、染料法,、UV/Vis等方法來測定,；衣殼滴度主要是通過ELISA、HPLC等方法來測定,。AAV基因組滴度檢測的關(guān)鍵在于盡可能徹底去除AAV衣殼外的HCD殘留,，減少污染核酸對qPCR或ddPCR的影響。經(jīng)典方法是加入常規(guī)核酸酶（如Dnase I,、Benzonase等）消化AAV衣殼外的HCD殘留,，然后加入Proteinase K破碎病毒衣殼，進(jìn)行后續(xù)檢測,。經(jīng)過對比發(fā)現(xiàn),，用SAN HQ高鹽核酸酶替代常規(guī)核酸酶處理AAV病毒，能夠更高效去除衣殼外的核酸殘留,，qPCR或ddPCR結(jié)果重復(fù)性更高,、更穩(wěn)定。海南高鹽核酸酶70921-150SAN HQ是生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇,。

上海倍篤生物科技有限公司（簡稱“倍篤生物”）,，由中國科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士，于2018年1月共同創(chuàng)立,。公司代理多個(gè)品牌的儀器,、試劑及耗材，遵守相關(guān)法規(guī)要求,，如cGMP規(guī)范,、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等，致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等,，藥物研發(fā)領(lǐng)域如細(xì)胞基因藥物,、核酸藥物、抗體藥物,、干細(xì)胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī),、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù)，以期與客戶共同協(xié)作,，加快研發(fā)及生產(chǎn)進(jìn)度,，為客戶提供更多價(jià)值。

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì),，其存在潛在的致瘤性,、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明,，基因的大小普遍在200bp以上,，因此大于200bp有可能會有一定的致病性,，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級越高,。因此,，各國監(jiān)管機(jī)構(gòu)對其提出了嚴(yán)格要求。美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）在《關(guān)于人類基因zhiliao新產(chǎn)品生產(chǎn)指導(dǎo)文件》中明確指出HCD的片段要小于200bp,。2022年5月,，國家藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心（CDE）發(fā)布的《體內(nèi)基因藥物產(chǎn)品藥學(xué)研究與評價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》中也明確指出需對DNA殘留量和殘留片段大小進(jìn)行控制，建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下,。鑒于其在高鹽條件下的較高活性,，SAN HQ高鹽核酸酶在不損失載體產(chǎn)量和活性的情況下改善了下游工藝。

SAN HQ高鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣,。例如,，該酶適宜的鹽濃度（NaCl）范圍是400mM-600mM，能耐受高達(dá)1M NaCl濃度,。適宜反應(yīng)溫度為25℃-37℃,，能耐受4℃-38℃。Mg2+濃度大于1mM即可,，在5-20mM范圍即可表現(xiàn)更高活性,。跟全能核酸酶類似，SAN HQ高鹽核酸酶也是一款堿性核酸酶,，其適宜pH為8.0-8.9,，能耐受6.8-9.5。為了達(dá)到更高酶活性,，可以通過調(diào)節(jié)pH實(shí)現(xiàn),。鑒于SAN HQ的耐受性，可以用于很多應(yīng)用,，如大規(guī)模生產(chǎn),、蛋白純化、蛋白組學(xué)等,。致力于從深海微生物中識別新的冷適應(yīng)酶,，用于分子研究、體外診斷和制藥領(lǐng)域,。天津ArcticZymes高鹽核酸酶70921

無需為了保持高酶活而進(jìn)行脫鹽操作，簡化工藝,、節(jié)省時(shí)間,；四川基因藥物生產(chǎn)用高鹽核酸酶70921-202

細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式，其中病毒遞送更為常用,。在病毒遞送路徑中,，腺相關(guān)病毒（AAV）和慢病毒（Lentivirus）是常用的兩種載體,；差別是病毒基因組的存在形式，AAV的基因組一般不整合到染色體中,，以游離形式存在于染色體之外,，且一般會表達(dá)數(shù)年之久；而慢病毒的基因組則會整合到染色體達(dá)到長期持續(xù)表達(dá)的目的,。此外,，其它用于基因藥物的病毒載體有單純皰疹病毒（HSV）、痘苗病毒（Vaccina Virus）,、痘病毒（Poxviruses）,。四川基因藥物生產(chǎn)用高鹽核酸酶70921-202