Genovis提供具有低水平內Du素的FabRICATOR（IdeS）凍干酶,，用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產生均質的F（ab'）2和Fc片段,。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格：2000和5000單位,，分別用于消化2mg或5mgIgG。該產品配方每瓶的內Du素含量較低,，2000單位小瓶的內Du素含量為<0.04EU/瓶,，5000單位小瓶的內Du素含量為<0.10EU/瓶。有效消化,，內DU素水平低,；適用于靈敏的體內或基于細胞的檢測。并通過反相LC-MS進行分析,，消化產生均勻的Fab和Fc片段,。海南IdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

為了讓所有實驗室都能同時快速自動消化多種抗體，Genovis的FabRICATORMagIC的設計具有靈活性,，適用于一系列自動化平臺,。我們在ThermoScientific?KingFisher?純化系統(tǒng)上優(yōu)化了FabRICATORMagIC的工作流程，但它可以轉移到其他自動化平臺,，如果沒有自動化,，在振動臺上也能同樣出色地工作。消解后,，將含有處理樣品的深孔板直接轉移到LC-MS的自動進樣器中進行快速色譜分析,，或轉移到其他分析方法進行分析。FabRICATORMagIC與在消解緩沖液中添加0.05%聚山梨醇酯20兼容,，以極大限度地減少自動化系統(tǒng)中可能發(fā)生的純粹壓力,。使用KingFisher儀器處理樣品時，樣品制備非常簡單,。將樣品,、樹脂和緩沖液移液到指定的孔或板中，然后將板放入儀器中,。設計用于FabRICATORMagIC的BindIt?協(xié)議將控制每個步驟的孵育溫度和時間,。江蘇IgGZEROIdeS蛋白酶IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復雜性并明顯簡化IgA分析表征的寶貴工具。

與IdeS不同,，度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 （GLP-1） 分子組成,，它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區(qū)域。為了分別研究肽和 Fc 區(qū)域,，從而鑒定結構域特異性 PTM,，用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時,。為了降低樣品復雜性，使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,，并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明,，使用GlySERIAS進行連接子消化后,，肽從Fc區(qū)域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點,，這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,，其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外,，還鑒定了GLP-1肽的氧化,。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化，但一式三份的酶解在獲得的不同F(xiàn)c/2變體的相對量中顯示出可重復的結果,。

Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種獨特的酶,，可在鉸鏈區(qū)域下方的特定位點消化IgG，產生均勻的F（ab'）2和Fc/2片段,。除IgG外,，沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內消化,，如果孵育時間延長,，則不存在過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,，因此保留了免疫反應性,。在37°C下獲得良好的活性，但也可以在室溫下使用較長的反應時間進行消解,。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子,、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,，我們建議使用FabRICATORZ,。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的，并在大腸桿菌中表達,。該酶含有His標簽,，分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,，由GenovisAB開發(fā),，用于需要高標準和一致性的生物技術應用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法,。了解有關山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息,。為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物,。

不同于IdeS，Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶,，可在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1,，在兩小時內產生完整的 Fab 和 Fc 片段，無需還原條件,。該酶對具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體（如 LALA 突變）具有活性,，并啟用中級 LC-MS 來表征具有突變鉸鏈的抗體的關鍵質量屬性。FabDELLO 在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1 （...KSCDK / THTCPPCP...）,，生成完整的 Fab 和 Fc 片段,。FabDELLO 是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單個消化位點是人 IgG1 的三維結構的結果,，使這種賴氨酸暴露于酶中,。如果去除N-聚糖，則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點,。FabDELLO在天然條件下具有活性,，需要鈣離子的存在。在37°C和pH 7-8.5下獲得良好活性,。FabDELLO 是從 Bdellovibrio 細菌克隆而來的,，并在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽,，分子量為 32 kDa,。Genovis的IdeS蛋白酶是IgG特異性半胱氨酸蛋白酶。海南IdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

IgASAP Sub1+2 在脯氨酸 （P） 和纈氨酸 （V） 之間消化 IgA1 和 IgA2m1,。海南IdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

與IdeS不同,，Genovis的GingisKHAN（Kgp）是一種半胱氨酸蛋白酶，可在鉸鏈上方的單個位點（KSCDK/THTCPPC）消化人IgG1,，產生完整且均質的Fab和Fc片段,。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點是人IgG1三維結構的結果,，使這種賴氨酸暴露于酶中,。如果去除N-聚糖，則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點,。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,，并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑（2mM半胱氨酸）與酶一起提供,。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的,。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物，研究Fc聚糖分析,、雙特異性抗體,、親和力和親和力效應,，并鑒定翻譯后修飾。海南IdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶