Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR（IdeS）酶,，是在鉸鏈下方對IgG進(jìn)行柱上消化的固定化酶,。Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點(diǎn)的抗體,，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段,。酶解后，可以使用反相HPLC,、質(zhì)譜或其他分析方法分析片段,?？贵w消化和亞基生成的自動化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測應(yīng)用成為可能，例如,，作為2D-LC-MS設(shè)置的一部分,，將反應(yīng)器直接耦合到MS。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間,、樣品處理時間并提高了通量,。如FabRICATOR Immobilized，可快速輕松地生成均質(zhì) F（ab'）2 和 Fc/2 片段,。云南FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

與IdeS不同,，在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過程中，詳細(xì)分析和識別質(zhì)量屬性非常重要,。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法,，這包括確認(rèn)連接蛋白的質(zhì)量以及蛋白質(zhì)接頭的質(zhì)量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域來幫助這種質(zhì)量控制,。然而,，連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點(diǎn)，導(dǎo)致連接子內(nèi)多個位點(diǎn)同時水解,。消化的產(chǎn)物通常由連接蛋白的幾種變體組成,，并保留不同程度的連接子。雖然觀察到的異質(zhì)性通常不會對蛋白質(zhì)亞基的詳細(xì)表征產(chǎn)生負(fù)面影響,，但有助于直接表征連接子,，但有時需要更均勻的消化產(chǎn)物來詳細(xì)分析單個蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域。云南FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶IdeS蛋白酶普遍適用于常見類型抗體,，由于分析的簡單性,，中級方法非常適合自動化和高通量的工作流程。

與IdeS不同,。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,，可在鉸鏈上方的一個特定位點(diǎn)消化人IgA1，產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段,。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1,。消化在1小時內(nèi)完成，并且由于酶的特異性,，如果孵育時間延長,，則不存在過度消化的風(fēng)險。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,，不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性,。活性是在37°C下,，但也可以在室溫下使用增加孵育時間進(jìn)行消化,。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,，并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,，分子量為148kDa,。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在1000個單位的小瓶中,，用于消化1mgIgA1,。

抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA，因為它會影響療效,、和免疫原性,。因此，需要從早期開發(fā),、工藝開發(fā)到質(zhì)量控制和批量放行的整個過程對Fc聚糖譜進(jìn)行監(jiān)測,。傳統(tǒng)的分析方法基于對游離的聚糖進(jìn)行熒光標(biāo)記，然后通過HILIC-HPLC或CE進(jìn)行分析,，這需要多步驟的樣品制備方案,，這需要大量的時間和資源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,，然后使用LC-MS進(jìn)行中級分析,，為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的替代方法,。如上所示，它很容易實現(xiàn)自動化,，以提高通量并降低處理錯誤的風(fēng)險,。在鉸鏈正上方的一個特定位點(diǎn)消化人 IgG1，產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段,。

如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子,，現(xiàn)在有了Genovis的一些新產(chǎn)品（IgA酶，IgM酶）,，其他的模式和分子形式（IdeS高通量的產(chǎn)品形式）來測定和監(jiān)測許多不同的CQA,，Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現(xiàn)的瓶頸。 生產(chǎn)大量的樣品當(dāng)然很好,，但如果分析團(tuán)隊不能足夠快地處理它們,，那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的,、易于使用的方法,，當(dāng)然這些方法要快速，而且可能易于自動化,。 這正是我們所能提供的,，這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶,。FabRICATOR Magic自動平行抗體酶切和亞基生成,用于處理與克隆選擇。云南FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

IgMBRAZOR酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人 IgM 進(jìn)行中級分析,，從而促進(jìn)疫苗診斷等過程中的IgM表征和質(zhì)量控制,。云南FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

LC-MS中級分析是一種被大眾接受的分析方法，用于快速表征mAb和其他基于IgG的生物制藥,。它有助于理解多種關(guān)鍵質(zhì)量屬性 （CQA）,，例如糖基化、氧化和 C 端賴氨酸剪切,。這種關(guān)于翻譯后修飾（PTM）的詳細(xì)知識是生物制藥開發(fā)和制造所必需的,。Genovis的FabRICATOR HPLC酶色譜柱，可快速進(jìn)行單克隆抗體的柱上酶切,，并產(chǎn)生一致的亞基,。該色譜柱含有固定化的FabRICATOR（IdeS）酶，可在鉸鏈下方快速且特異性地消化IgG,，產(chǎn)生F（ab'）2和Fc片段,，而不會出現(xiàn)任何過度消化的風(fēng)險。為了減少樣品處理并為樣品制備提供自動化解決方案,，F(xiàn)abRICATOR被共價固定在樹脂上,，并裝在適用于HPLC的PEEK色譜柱硬件中。使用FabRICATOR HPLC色譜柱,，只需稍作修改,，即可使用標(biāo)準(zhǔn)HPLC-MS裝置自動生成抗體亞基。然后,，F(xiàn)abRICATOR HPLC色譜柱上消解產(chǎn)生的亞基被捕獲在在線連接的反相（RP）色譜柱的柱頭上,。云南FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶