一些應(yīng)用（如結(jié)合研究）具有高度靈敏度，因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段,。因此,，Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供，可快速輕松地生成均質(zhì) F（ab'）2 和 Fc/2 片段。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR （IdeS）,，用于制備來(lái)自多種 IgG 的 F（ab'）2 和 Fc 片段（對(duì)于兔 IgG,，請(qǐng)咨詢(xún)），而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進(jìn)行處理 ,。 為了生成和純化完整的 F（ab'）2 和 Fc/2 片段,，使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒處理曲妥珠單抗，并通過(guò) SDS-page 進(jìn)行分析,。首先,，在室溫下在FabRICATOR固定化離心柱上消化抗體15分鐘，然后進(jìn)行短離心步驟,。在 CaptureSelect ? 離心柱上純化 F（ab'）2 片段,，并通過(guò)降低 pH 值，然后立即調(diào)整回中性 pH 值,，一步洗脫結(jié)合的 Fc 片段,。使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒從酶切到收集片段的過(guò)程大約需要 1 小時(shí)這正是您使用FabRICATOR（IdeS蛋白酶）可以得到的。上海FabALACTICAIdeS蛋白酶

樣品制備的條件可能會(huì)在樣品中誘發(fā)偽影,，因此需要避免高溫和堿性pH值進(jìn)行質(zhì)譜分析,。如果可能的話，避免多個(gè)步驟并在一鍋反應(yīng)中進(jìn)行消化和還原也可能是有益的,。與IdeS不同,，為了探索Genovis的GingisREX對(duì)離液劑和去液劑的穩(wěn)定性和耐受性，在一系列試劑中測(cè)試了酶活性,，并使用底物測(cè)定進(jìn)行了評(píng)估。數(shù)據(jù)顯示,，GingisREX在6M時(shí)耐受尿素,，吐溫高達(dá)1%，但活性在0.1%時(shí)受到SDC的負(fù)面影響,。該酶在 pH 值范圍為 5.0 至 9.0 時(shí)顯示出活性,，在 pH 值為 6.5-8.0 之間。綜上所述,，GingisREX可用于一鍋反應(yīng),，以同時(shí)消化和變性6M尿素。與Genovis的IdeS不同,，雙特異性 T 細(xì)胞接合器 （BiTE） 分子是一種融合蛋白療法,，其中兩個(gè) scFv 融合，形成一個(gè)雙特異性分子,，其中一個(gè) scFv 靶向細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞,，另一個(gè)靶向Ai癥抗原。該蛋白質(zhì)由四個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域組成，兩個(gè) scFv 均由 VL 和 VH 區(qū)域組成,，總共由三個(gè)柔性 GS 連接子連接,。這種蛋白質(zhì)的大尺寸（54 kDa）可能對(duì)通過(guò)完整質(zhì)譜法進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)構(gòu)成挑戰(zhàn)，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)MS儀器可能無(wú)法提供蛋白質(zhì)的單同位素分辨率,。上海FabALACTICAIdeS蛋白酶工藝開(kāi)發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣品,。

與IdeS不同，Genovis的GingisKHAN（Kgp）是一種半胱氨酸蛋白酶,，可在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)（KSCDK/THTCPPC）消化人IgG1,，產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴(lài)氨酸特異性蛋白酶,。單一的消化位點(diǎn)是人IgG1三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,，使這種賴(lài)氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,，則Fc上暴露的賴(lài)氨酸處可能會(huì)出現(xiàn)額外的消化位點(diǎn),。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性，并且在37°C和pH8下獲得活性,。還原劑（2mM半胱氨酸）與酶一起提供,。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,，研究Fc聚糖分析,、雙特異性抗體、親和力和親和力效應(yīng),，并鑒定翻譯后修飾,。

Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶 可用于 IgG 的所有人類(lèi)亞類(lèi)以及人源化和嵌合 IgG。該酶對(duì)其他物種的 IgG 也有活性,，包括來(lái)自大鼠,、猴子、兔子和綿羊的某些類(lèi)別的 IgG,。因此,，F(xiàn)abRICATOR的高特異性在某些情況下會(huì)使其對(duì)鉸鏈區(qū)域的突變敏感，并損害酶活性,。來(lái)自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,，與 FabRICATOR 相比，F(xiàn)abRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率,。然而,，小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列，并且不被 FabRICATOR Z 消化,。對(duì)于這種抗體種類(lèi),，F(xiàn)abULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段,。Genovis酶的適應(yīng)于克隆篩選，工藝開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證以及穩(wěn)定性研究,，也適用于受控環(huán)境中的批次放行方法,。

經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,，分別滿(mǎn)足體外診斷,、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求,。其中,，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio,、GMP級(jí)MSC/PSC培養(yǎng)基,、GMP級(jí)膠原酶、AAV滴度檢測(cè)產(chǎn)品,、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù),、QED抗體對(duì),、AAV中和抗體、蛋白酶等,；相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies,、德國(guó)BASF、德國(guó)Sartorius,、德國(guó)Nordmark,、瑞典Genovis、美國(guó)QED,、中國(guó)君研生物等,。度拉糖肽的使用GlySERIAS酶切后，HPLC分析后,，還鑒定了GLP-1肽的氧化。云南IdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

LC-MS中級(jí)分析用于快速表征mAb和其他基于IgG的生物制藥,。上海FabALACTICAIdeS蛋白酶

抗體由于其大小和復(fù)雜性,，是一種難以表征的分子。偶聯(lián)藥物有效載荷是對(duì)抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法,，但進(jìn)一步增加了異質(zhì)性的復(fù)雜性和風(fēng)險(xiǎn),。抗體藥物偶聯(lián)物 （ADC） 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進(jìn)行仔細(xì)和詳細(xì)的表征,，并且需要適當(dāng)?shù)姆治龉ぷ髁鞒?。Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶將ADC消化成其亞基,，可以詳細(xì)表征這類(lèi)復(fù)雜的藥物。Genovis的內(nèi)切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC,，但降低復(fù)雜性并提高分辨率,。上海FabALACTICAIdeS蛋白酶