Genovis集團由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成,。該公司在納斯達克上市。如需了解更多信息,，請訪問投資者關系,。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,，以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品,，稱為SmartEnzymes,，被世界各地的科學家使用，創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制,。通過在2020年收購QEDBioscience,，產(chǎn)品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑,。在官網(wǎng)上閱讀有關QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關系,，使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶,、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學術團體的合作同樣有價值,。Genovis提供具有低水平內(nèi)du素的FabRICATOR （IdeS）凍干。湖北FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學

IgA 消化酶的 IgASAP 家族特異性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段,。IgASAP Sub1 特異性消化人 IgA1,，而 IgASAP Sub1+2 同時消化人 IgA1 和 IgA2m1。 Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1,。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段,。為了獲得純和完整的Fab片段，使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit進行人IgG1的消化和抗體片段的后續(xù)純化,。通過與 GingisKHAN 孵育,，然后在 CaptureSelect? 人 CH1 離心柱上親和純化，在曲妥珠單抗上證明了完整的片段生成,。樣品的酶和Fc部分存在于色譜柱的流通中,，F(xiàn)ab很容易通過降低pH洗脫。使用該試劑盒,，可以制備 0.5 mg 至 2 mg 人 IgG1 的 Fab 片段,。Genovis同時提供IdeS酶的純化試劑盒。 上海FabRICATORIdeS蛋白酶Genovis的FabRICATOR MagIC可用于自動分析和監(jiān)測不同的CQA,。

與IdeS不同,，Genovis的GingisKHAN（Kgp）是一種半胱氨酸蛋白酶,，可在鉸鏈上方的單個位點（KSCDK/THTCPPC）消化人IgG1,，產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶,。單一的消化位點是人IgG1三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,，使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,，則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點,。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,，并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑（2mM半胱氨酸）與酶一起提供,。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的,。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物，研究Fc聚糖分析,、雙特異性抗體,、親和力和親和力效應，并鑒定翻譯后修飾,。

與IdeS不同,，融合蛋白是通過將兩種或多種蛋白質(zhì)或肽的功能組合成一個量身定制的分子來創(chuàng)造的，以專門應對挑戰(zhàn),。連接此類蛋白質(zhì)或肽結(jié)構(gòu)域的常見方法是包含柔性連接子,。這些連接子通常富含甘氨酸，例如甘氨酸殘基（G）,，或甘氨酸殘基散布絲氨酸殘基（GS）以形成重復序列,。這為連接子提供了足夠的靈活性，不會干擾連接蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的功能,。然而,，這些新模式帶來了新的分析挑戰(zhàn)，需要新的工具來促進表征和產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測,。中級分析已成為分析單克隆抗體療法的標準方法,，涉及將分子消化成幾個定義的亞基。它們足夠小,，可以獲得高質(zhì)量的質(zhì)譜圖,，并為產(chǎn)品質(zhì)量屬性提供特定領域的信息。由于G和GS連接子對常見蛋白酶的降解具有抗性,，因此很難分離結(jié)構(gòu)域以進行深入分析,。因此，Genovis開發(fā)了GlySERIAS,，不同于IdeS酶,，一種消化柔性富含甘氨酸的連接子的酶。GlySERIAS可以分離不同的功能域,，并實現(xiàn)對融合蛋白,、多特異性抗體和含有富含甘氨酸的連接子的各種mAb片段進行詳細表征的中級方法。反相LC-MS對樣品的分析表明,，使用Genovis的GlySERIAS進行度拉糖肽的連接子消化后,，肽從Fc區(qū)域完全去除。

對于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,，F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性,。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個可觸及的賴氨酸位點消化人IgG1,，在足夠溫和的還原條件下保留鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵，從而產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段,。對于融合蛋白,，消化通常在鉸鏈上方獲得，但融合伴侶的結(jié)構(gòu)和氨基酸序列可能導致其他暴露的消化位點,。如果去除保守的 Fc N-聚糖,，F(xiàn)c 中的第二個切割位點也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時,，并通過 HPLC 進行分析,。使用FabRICATOR（IdeS）的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質(zhì)量控制應用,。湖南GingisKHANIdeS蛋白酶蛋白組學

這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,。湖北FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學

LC-MS中級分析是一種被大眾接受的分析方法，用于快速表征mAb和其他基于IgG的生物制藥,。它有助于理解多種關鍵質(zhì)量屬性 （CQA）,，例如糖基化、氧化和 C 端賴氨酸剪切,。這種關于翻譯后修飾（PTM）的詳細知識是生物制藥開發(fā)和制造所必需的,。Genovis的FabRICATOR HPLC酶色譜柱，可快速進行單克隆抗體的柱上酶切,，并產(chǎn)生一致的亞基,。該色譜柱含有固定化的FabRICATOR（IdeS）酶，可在鉸鏈下方快速且特異性地消化IgG,，產(chǎn)生F（ab'）2和Fc片段,，而不會出現(xiàn)任何過度消化的風險。為了減少樣品處理并為樣品制備提供自動化解決方案,，F(xiàn)abRICATOR被共價固定在樹脂上,，并裝在適用于HPLC的PEEK色譜柱硬件中。使用FabRICATOR HPLC色譜柱,，只需稍作修改,，即可使用標準HPLC-MS裝置自動生成抗體亞基。然后,，F(xiàn)abRICATOR HPLC色譜柱上消解產(chǎn)生的亞基被捕獲在在線連接的反相（RP）色譜柱的柱頭上,。湖北FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學