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核酸酶活性受到很多因素影響,如鹽濃度,、pH,、底物,、溫度等。因此,,不同客戶,、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件都不一。目前,,生物制藥行業(yè)對(duì)Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,,如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等,。對(duì)于大部分使用Benzonase的項(xiàng)目,,使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,而且溫度,、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整,,同樣酶量的M-SAN HQ對(duì)宿主細(xì)胞DNA(HCD)的去除效果更好、病毒載體得率更高,。經(jīng)過(guò)工藝優(yōu)化后,,可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來(lái)的1/3-1/2,且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高,。M-SAN HQ中鹽核酸酶兼容常見細(xì)胞培養(yǎng)基,,在多種培養(yǎng)基條件下去除核酸污染效率更高;黑龍江M-SAN HQ中鹽核酸酶70950-202
在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域,,倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,,主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑,、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品,、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin,、anti-MMAE等),、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio,、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,,品牌有德國(guó)Genovis,、德國(guó)BASF、中國(guó)君研生物,、中國(guó)金傳生物,、中國(guó)毫厘科技、中國(guó)再帆生物等,。這些國(guó)產(chǎn)品牌都具有國(guó)內(nèi)自研,、自產(chǎn)能力,,批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控,,為行業(yè)發(fā)展提供更多國(guó)產(chǎn)選擇,。江蘇M-SAN中鹽核酸酶70950-160在150mM NaCl條件下,M-SAN HQ中鹽核酸酶的酶切活性達(dá)到常規(guī)核酸酶的5倍左右,。
在生物工藝流程中,,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,,也需要在生產(chǎn)流程中去除,。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑,、離子交換和親合層析法等,。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右,包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9,,來(lái)自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,,M-SAN HQ中鹽核酸酶pI 8.7左右。因此,,在同樣的條件下,,從LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底,。
在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域,, 某些疾病靠單純的細(xì)胞替代并不能取得滿意效果。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒將外源目的基因整合到干細(xì)胞基因組,,對(duì)基因功能缺失的遺傳病具有良好療效,,但也存在一定致瘤風(fēng)險(xiǎn)。相比之下,,CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠精確實(shí)現(xiàn)基因敲入,、敲除及堿基修復(fù)。因此,, 采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對(duì)干細(xì)胞進(jìn)行基因改造,,不僅能夠增加干細(xì)胞醫(yī)治的疾病范圍,也能更大程度地保證療效的安全性,。目前,,CRISPR/Cas9在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,同時(shí)更多由CRISPR/Cas9編輯的干細(xì)胞藥物正在開發(fā)中,。中鹽核酸酶更適合細(xì)胞培養(yǎng)體系,,相比全能核酸酶,酶用量減少到1/3-1/2,,HCD去除效率更高,。
M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下的優(yōu)勢(shì),,讓其成為生物生產(chǎn)工藝中去除核酸污染的更好選擇。經(jīng)過(guò)多年的市場(chǎng)宣傳,,M-SAN HQ中鹽核酸酶品質(zhì)已得到多個(gè)全球TOP CDMOs認(rèn)可,,納入其工藝開發(fā)篩選平臺(tái)。此外,,目前全球有10+臨床項(xiàng)目涉及的病毒載體生產(chǎn)用到M-SAN HQ中鹽核酸酶,。對(duì)于同一個(gè)項(xiàng)目,用M-SAN HQ替代Benzonase全能核酸酶,,酶量減少,、HCD去除效果更優(yōu)、病毒載體產(chǎn)量也有一定程度的提高,,酶相關(guān)成本降為原有的1/5以內(nèi),,極大降低了病毒載體生產(chǎn)成本。生理鹽濃度下,,M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優(yōu)于常用核酸酶,。江蘇M-SAN中鹽核酸酶70950-160
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在生物工藝中,,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,,以便在下游純化過(guò)程中去除,。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈,,但實(shí)際生產(chǎn)中的核酸污染情況更加復(fù)雜,。HCD通常以染色質(zhì)形式存在,與細(xì)胞裂解碎片,、病毒顆粒等結(jié)合在一起,,影響核酸酶的識(shí)別及剪切,。因此,,HCD去除的關(guān)鍵在于——核酸酶如何在復(fù)雜的生產(chǎn)體系中識(shí)別并剪切HCD。黑龍江M-SAN HQ中鹽核酸酶70950-202