細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式,，其中病毒遞送更為常用,。在病毒遞送路徑中,，腺相關(guān)病毒（AAV）和慢病毒（Lentivirus）是常用的兩種載體,；差別是病毒基因組的存在形式,，AAV的基因組一般不整合到染色體中,，以游離形式存在于染色體之外,，且一般會表達(dá)數(shù)年之久,；而慢病毒的基因組則會整合到染色體達(dá)到長期持續(xù)表達(dá)的目的。此外,，其它用于基因藥物的病毒載體有單純皰疹病毒（HSV）,、痘苗病毒（Vaccina Virus）、痘病毒（Poxviruses）,。SAN HQ高鹽核酸酶具有熱不穩(wěn)定的特性,，在還原劑存在條件下，50℃,、30min孵育即可失活,；河南ArcticZymes高鹽核酸酶70921-160

監(jiān)管部門對HCD的殘留量有明確的規(guī)定。美國FDA發(fā)布的指導(dǎo)原則中指出生物制品HCD殘余限度為 100pg/劑,，對于大劑量生物制品如單克隆抗體,，根據(jù)其殘留DNA來源及給藥途徑，殘留量可放寬至 10ng/劑,。細(xì)胞基因藥物終產(chǎn)品的DNA殘留有兩種來源,，分別是宿主細(xì)胞DNA（HCD）和轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒。質(zhì)粒和HCD的存在形式不同,，去除效率也差別很大,。其中，質(zhì)粒是裸露的DNA雙鏈,，帶強負(fù)電荷,，通過色譜純化主要是離子交換能夠很高效去除；HCD則是以核小體緊密折疊形成的染色質(zhì)形式存在,，幾乎不以裸DNA形式存在,，所以很難去除。河北SAN HQ高鹽核酸酶70921-160US FDA指南要求：重組生物制品終產(chǎn)品中,，核酸雜質(zhì)含量低于10ng/dose,。

已有文獻(xiàn)表明，高鹽濃度能夠破壞染色質(zhì)結(jié)構(gòu),，讓核小體解聚,。在能耐受高鹽條件的病毒載體（如AdV/AAV等）生產(chǎn)中,，高鹽濃度使宿主細(xì)胞DNA（HCD）解聚，讓核酸片段暴露,，提高了核酸片段的可及性,。而ArcticZymes的SAN HQ高鹽核酸酶能夠在高鹽條件下更好發(fā)揮酶切活性，作為高鹽條件下去除HCD的更好選擇,。SAN HQ高鹽核酸酶的出現(xiàn),，讓一些通過常規(guī)方法很難解決的工藝問題得到高效解決，不僅提高了生產(chǎn)效率,，降低了藥物生產(chǎn)成本,，更拓寬了生物工藝生產(chǎn)的邊界。

綜合腺相關(guān)病毒AAV制備的三個工藝階段介紹,，可以看出下游處理可以占病毒生產(chǎn)總成本的很大一部分,，而且難度也是非常大，尤其是純化過程,。原因之一是由于有超過100種不同血清型的變體AAV衣殼,，不同血清型的AAV蛋白存在差異。因此,，各種血清型的表面特性增加AAV純化難度,。原因之二是：針對工藝和產(chǎn)品相關(guān)的雜質(zhì)（包括宿主細(xì)胞物質(zhì)，DNA和空衣殼）,，缺乏一個有效和可重復(fù)的平臺方法,，尤其是來從空衣殼中分離出完整的衣殼。為了解決以上問題,，國內(nèi)外大的藥企公司都致力于純化新產(chǎn)品的開發(fā),，以期達(dá)到：（1）實現(xiàn)病毒顆粒的分離（2）減少產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)（3）保持效力和產(chǎn)量的目標(biāo)。鑒于其在高鹽條件下的較高活性,，SAN HQ高鹽核酸酶在不損失載體產(chǎn)量和活性的情況下改善了下游工藝,。

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同,。低鹽濃度條件下,，AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象,。隨著溶液鹽濃度上升,，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞，AAV病毒顆粒會逐漸解離,。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右）,，AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱，AAV顆粒更穩(wěn)定,。因此,，在高鹽濃度溶液中，AAV顆粒更加穩(wěn)定,，且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力,。所以，我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度,。相比之下,，常規(guī)的酶類需要更高溫度才能滅活。因此,，SAN HQ高鹽核酸酶更適于自動化流程,；吉林高鹽條件高鹽核酸酶

ArcticZymes Technologies旨在是研究和開發(fā)具有獨特特性的酶。河南ArcticZymes高鹽核酸酶70921-160

有研究發(fā)現(xiàn),，桿狀病毒表達(dá)載體體系BEV生產(chǎn)的rAAV發(fā)生了與293生產(chǎn)體系不同的衣殼蛋白翻譯后修飾（post-translationalmodifications,PTMs）,。這一差異是否會影響載體趨向性和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率還需要進(jìn)一步驗證。除此之外,，桿狀病毒多重infection會導(dǎo)致載體蛋白VP1,、VP2和VP3比例不一致。盡管如此,，BEV/Sf9系統(tǒng)仍然是一種頗有吸引力的大規(guī)模臨床級載體生產(chǎn)策略,。隨著以后對基因藥物需求的增加，AAV載體的需求量也會與日俱增,，而BEV系統(tǒng)能夠降低AAV的成本,，未來還是很有發(fā)展?jié)摿Φ摹：幽螦rcticZymes高鹽核酸酶70921-160