在不同的鹽濃度條件下,，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下,，AAV病毒顆粒表面會(huì)通過(guò)電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上,，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象,。隨著溶液鹽濃度上升,，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞，AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離,。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右）,，AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱，AAV顆粒更穩(wěn)定,。因此,，在高鹽濃度溶液中，AAV顆粒更加穩(wěn)定,，且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會(huì)削弱AAV的侵染能力,。所以，我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度,。常州中鹽核酸酶產(chǎn)品質(zhì)量哪家好呢,，歡迎咨詢上海倍篤生物 。福建ArcticZymes中鹽核酸酶70950

ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?),；立足北極海洋區(qū)，致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶,，用于分子研究,、體外診斷和藥物領(lǐng)域。以其產(chǎn)品的獨(dú)特性質(zhì)及超過(guò)30年的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)積淀，ArcticZymes Technologies得到國(guó)際分子診斷及生物藥物領(lǐng)域客戶的肯定及大力支持,，ArcticZymes產(chǎn)品線已用于診斷產(chǎn)品及生物藥物生產(chǎn)中,。2005年，ArcticZymes在Olso證券交易所上市,，并且持續(xù)得到挪威國(guó)家基金的支持,。青海M-SAN中鹽核酸酶70950-150在已有工藝中，不需做任何調(diào)整,，用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶,，且去除HCD效率更高；

Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒,，MV)為例,，評(píng)估了四種不同核酸酶（BenzonaseTM、DeneraseTM,、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶）對(duì)于染色質(zhì)DNA去除的效果,。Vero細(xì)胞通過(guò)微載體貼壁培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)麻疹病毒MV，72h后收獲上清液,，使用3μm cellulose filter(Sartorius)過(guò)濾后分裝多份,，置于-80℃保存便于后續(xù)使用。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對(duì)應(yīng)鹽濃度,，并加入50 U/ml核酸酶,，37℃孵育2hr進(jìn)行消化，消化后留樣,；將消化后上清液過(guò)Capto Core 700 (Cytiva)柱子,，收集流穿液，之后洗雜,、洗脫,，并分別留樣。通過(guò)SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn),，相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶,，在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段，甚至將核小體DNA剪切更徹底,。

Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ,，中鹽核酸酶)，是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶,，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中,，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2-8.7）,，且在125-250 mM鹽濃度內(nèi)具有適宜活性,。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,，不需調(diào)整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)高核酸酶活性,。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶,，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對(duì)HCD的去除更高效,、更徹底,。因此，M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體（如慢病毒,、逆轉(zhuǎn)錄病毒及溶瘤病毒等）的生產(chǎn),。M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽濃度下具有較高活性，較適合鹽濃度為125-250 mM,。

市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個(gè)規(guī)格,，分別是25kU、500kU及5MU,，分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求,。通過(guò)SDS-PAGE檢測(cè)蛋白純度在99%以上?；贏rcticZymes Technologies的30年的酶學(xué)開(kāi)發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),，M-SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定，產(chǎn)品純度高,，批次一致性好,，無(wú)蛋白酶活性。廠家開(kāi)發(fā)出特異的緩沖液體系,，使M-SAN HQ保存起來(lái)更加穩(wěn)定,，-15℃ - -30℃條件下保存4年沒(méi)有活性下降,。研究數(shù)據(jù)表明,，經(jīng)過(guò)5-6次的反復(fù)凍融，M-SAN HQ中鹽核酸酶活性沒(méi)有明顯變化,。黃山中鹽核酸酶款式哪家好呢,，歡迎咨詢上海倍篤生物 。山西培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶70950-150

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慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過(guò)濾澄清，隨后切向流過(guò)濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮,。此外,，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來(lái)去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來(lái)源的DNA污染,。這兩個(gè)步驟順序可以調(diào)整,，依據(jù)項(xiàng)目工藝而定,。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點(diǎn)：先用核酸酶消化的優(yōu)點(diǎn)是可去除大的DNA片段，且后續(xù)步驟可以去除殘留核酸酶,；但所用的核酸酶的量也非常大,。與此相反，將核酸酶步驟后置的優(yōu)點(diǎn)是大幅降低核酸酶的量(成本降低),；但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力,。此外，后期用核酸酶的缺點(diǎn)是核酸污染可能會(huì)結(jié)合慢病毒顆粒形成沉淀,，進(jìn)而導(dǎo)致慢病毒在純化中流失,，從而影響得率。福建ArcticZymes中鹽核酸酶70950