LAR)Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem(LAR),為靈敏,、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕,。LAR與螢火蟲螢光素酶(luc)報告基因一起,為研究人員開始了解基因表達調(diào)控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)(DLR)DLR是第一種允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑,。通過允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化,在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關(guān)鍵進展,。此外,,pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因,luc+,。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進的例子后來被進一步應(yīng)用到pGL4和luc2報告基因上,,通過生物信息學(xué)和合成方法,實現(xiàn)了更大的改進,。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶(Enliten)基礎(chǔ)上,,改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關(guān)鍵,。此后,,通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學(xué),例如Bright-Glo?,、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測,。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理。D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測,。徐州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽使用說明
就可以用高敏感度的CCD相機對動物體內(nèi)進行***觀察而不會傷害到動物本身,。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,,如螢光探測器或改進后的光學(xué)顯微鏡探測到,。這就使得對包括***在內(nèi)的多種生命活動進程進行觀察成為可能。例如,,螢光素酶已經(jīng)被用于商業(yè)化的次世代焦磷酸定序技術(shù),,借由dNTP接上DNA鏈時水解放出的焦磷酸,透過另外一個硫酸鹽腺甘酸轉(zhuǎn)移酶反應(yīng),,螢光素酶能將產(chǎn)物ATP與螢光素轉(zhuǎn)化為冷光,,機器借此探測光線并定序。螢光素酶也可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂,。法醫(yī)可以用含有螢光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡,。醫(yī)院用螢光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病。螢光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,,例如,,用于在轉(zhuǎn)染過螢光素酶的細胞中檢測特定啟動子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細胞內(nèi)的ATP的水平;這一技術(shù)被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay),。螢光素酶是一個熱敏感蛋白,,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護能力。此外,,螢光素酶水母素的發(fā)光強度與環(huán)境中鈣離子濃度相關(guān),,因此可用于檢測生物體內(nèi)的鈣,。泰州熒光素D-熒光素鉀鹽活題成像做D-熒光素鉀鹽測試真的靠譜嗎?
tetrametrylrhodarnineisothiocyante,,TRITC)是一種紫紅色粉末,,較穩(wěn)定,是羅達明(rhodamine)的衍生物,。更大吸收光譜550urn,,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對比鮮明,,常用于雙標記染色,。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種,。1.直接法用熒光素標記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,,洗去未結(jié)合的抗體,,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物,。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,,所以,此法較直接法靈敏,。3.補體法用特異性的抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應(yīng),,補體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補體的熒光抗體與之相結(jié)合,,就形成了抗原一抗體一補體一抗補體熒光抗體的復(fù)合物,。熒光顯微鏡下所見到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補體法具有敏感性強的優(yōu)勢,,同時適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標記顯示,,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。
請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8)本產(chǎn)品只作科研用途,!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,存在于多種發(fā)光生物體中,。在ATP和熒光素酶的催化作用下,,D-熒光素鉀被氧化,產(chǎn)生藍綠色的光(560nm),,當(dāng)?shù)孜镞^量時,,產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動物細胞的常用報告基因,。由于沒有背景干擾,,因此可以很容易地檢測出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,,如螢火蟲,。在ATP存在下,螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光,。化學(xué)研究中可用于熒光素酶的基板,。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種,?
而是對于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng),。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,,而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中,,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,,如叩頭蟲,,含有多種不同的螢光素酶,能夠催化同一螢光素底物,,而發(fā)出不同顏色的螢光,。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,,因此它們的螢光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。如今研究得**透徹的螢光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis),。[1]螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細胞中,。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠,、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶,。間接體外成像是一種強大的研究手段,,可以對整個動物體中的細胞群落進行分析:將不同類型的細胞(骨髓干細胞、T細胞等)標記上(即表達)螢光素酶。做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司,?泰州熒光素D-熒光素鉀鹽活題成像
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是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,,研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因,,即NanoLuc?螢光素酶。這是一種小分子(19kDa)單體酶,,具有獨特的底物,,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著范圍廣的應(yīng)用前景,,為進一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ),。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標簽的理想特征。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)的供體,。一項針對各種能量受體熒光基團的深入研究發(fā)現(xiàn),,紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn)??蓪⑦@些熒光基團添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合,,或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進行活細胞中蛋白質(zhì):蛋白質(zhì)相互作用的檢測。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生,,Promega的科學(xué)家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng),,即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。該系統(tǒng)由兩部分組成:11個氨基酸的小標簽和一個更大,,更精細的NanoLuc?亞基,,LgBiT。這兩部分結(jié)構(gòu)互補結(jié)合,。徐州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽使用說明
南京翌科生物科技有限公司總部位于仙林街道緯地路9號江蘇生命科技園F7棟301-3室,,是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑,、microRNA 表達文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細胞,、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),,服務(wù)全國各級高校,、研究所,、醫(yī)院、第三方檢測機構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的公司。翌科生物作為翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達文庫,、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù),。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國各級高校,、研究所,、醫(yī)院、第三方檢測機構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的企業(yè)之一,為客戶提供良好的外泌體提取,,非編碼RNA試劑,,檢測試劑,轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物不斷開拓創(chuàng)新,,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),,以產(chǎn)品為平臺,,以應(yīng)用為重點,以服務(wù)為保證,,不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物始終關(guān)注自身,,在風(fēng)云變化的時代,,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信,。