5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品,。6)在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,,應使用無鈣鎂離子的DPBS,,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測,。7)為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途,!熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中更有代表性的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase),。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),,可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。螢火蟲螢光素酶更通用和更常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,,該蛋白質不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內)甚至沒有毒性,,可用于原核和真核細胞,。運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸。D-熒光素鉀鹽運輸條件是4℃冰袋運輸,。體外研究D-熒光素鉀鹽生物公司
每孔加入100μl養(yǎng)24h后,,Luciferin使其終濃度為150μg/ml,PBS,,再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測,,分析發(fā)光強度與細胞數(shù)之間的相關性。4)細胞生長曲線繪制MCF7-luc細胞和作為對照取表達熒光素酶的MCF-7細胞,,接種于24孔板,,接種密度為2×104/孔。細胞接種后1~7d,,每天胰蛋白酶消化其中3孔細胞,,用細胞計數(shù)儀測定細胞數(shù),。以細胞生長天數(shù)為橫坐標,細胞數(shù)目為縱坐標,,分別繪制兩種細胞生長曲線,。二.動物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠,4~5周齡,,體重(15±2)g,,雌雄各3只。取對數(shù)生長期的MCF-7用PBS重懸為2.5×10/ml懸液,,每只裸鼠左右背側近腋部皮下接種100μl,,共接種6只。接種后第5d采用德國BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測信號強度,。以后每5d觀測一連續(xù)觀測30d,。觀測前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉(計量為:35mg/kg體重),按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin(invivograde),,10min后,,進行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長情況,定量分析各時間點的熒光值,。繪制腫大的瘤皮下生長曲線.MCF-7-luc細胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學觀察MCF-7-luc細胞裸鼠皮下接種后25d,,脫頸處死小鼠,取腫大的瘤組織,,制成石蠟切片,,切片厚度為3μm?;窗睞TPD-熒光素鉀鹽熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽,。
附錄ⅧB),與標準硫酸鉀溶液制成的對照液比較,,不得更濃(),。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,,減失重量不得過%(附錄ⅧL),。鋅鹽取本品,加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后,,加稀鹽酸2ml,,搖勻,濾過,,濾液中加亞鐵**鉀試液1ml,,不得發(fā)生渾濁。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,,點于濾紙上,,即生成黃色斑點,,趁濕置溴蒸氣中,1分鐘后再使與氨蒸氣接觸,,斑點即變?yōu)樯罘奂t色,。(2)本品的水溶液顯強烈的熒光,用大量的水稀釋后仍極明顯,;但加酸使成酸性后,,熒光即消失;再加堿使成堿性,,熒光又顯出,。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(附錄Ⅲ)。6含量測定編輯取本品約,,精密稱定,,加水20ml溶解后,加稀鹽酸5ml使熒光素析出,,用丁醇-氯仿(1:1)提取4次,每次20ml,,合并提取液,,用水10ml洗滌,洗液再用異丁醇-氯仿(1:1)5ml振搖提取,,合并提取液,,置105℃恒重的容器中,在水浴上通風蒸發(fā)至干,,殘渣用乙醇10ml溶解后,,再置水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,,精密稱定,,殘渣重量與相乘,即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量,。熒光素鈉是一種有機化合物,,分子式為C20H10Na2O5,橙紅色粉末,,無氣味,,有吸濕性;易溶于水,,溶液呈黃紅色,,并帶極強的黃綠色熒光。
luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M,。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應,。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入,。一些生物,,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,,能夠催化同一熒光素底物,,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,,而叩甲總科(包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali'),。應用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗,。D-熒光素鉀鹽測試適用范圍包括哪些,?
熒光素鈉[1],橙紅色粉末,,無氣味,,有吸濕性;易溶于水,,溶液呈黃紅色,,并帶極強的黃綠色熒光,酸化后消失,,中和或堿化后又出現(xiàn),,微溶于乙醇;比較大吸收波長(水),?;拘畔⑺幤访Q熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來源(分子式)與標準本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計算,,含C20H10Na2O5不得少于,。類別診斷用藥,。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學性質編輯中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱:FluoresceindisodiumsaltCAS號:518-47-8[2]熒光素鈉分子式:C20H10Na2O5分子量:等級:BSMDL號:MFCD00167039Beilstein號:3833041EC號:208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末,;無臭,,幾乎無味;有引濕性,。本品在水中易溶,,在乙醇中略溶。橙紅色粉末,,無氣味,,有吸濕性;易溶于水,,溶液呈黃紅色,,并帶極強的黃綠色熒光,酸化后消失,,中和或堿化后又出現(xiàn),,微溶于乙醇;比較大吸收波長(水),。4檢查資料編輯氯化物取本品,,分取溶液10ml,依法檢查(附錄ⅧA),,與標準氯化鈉溶液制成的對照液比較,不得更濃(),。硫酸鹽取上述氯化物項下剩余的溶液25ml,,依法檢查。做D-熒光素鉀鹽的哪家便宜,。熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽生物公司
D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光,。體外研究D-熒光素鉀鹽生物公司
包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析,;高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽),。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO,;后者能夠易溶于水或緩沖液中,使用方便,,溶劑無毒性,,特別適合體內實驗,。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應用上都沒有實質性的差別,。產(chǎn)品性質運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸,;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),,混勻,。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,,避免反復凍融,。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基,。4)待圖像分析前,,向細胞內添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,,然后進行圖像分析,。2.活題成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,,混勻,。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,,或分裝于-20℃避光保存,,避免反復凍融。3)腹腔注射(.),。體外研究D-熒光素鉀鹽生物公司
南京翌科生物科技有限公司總部位于仙林街道緯地路9號江蘇生命科技園F7棟301-3室,,是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉染試劑,、microRNA 表達文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細胞,、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),,服務全國各級高校,、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構,、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的公司。翌科生物作為翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎,,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉染試劑、microRNA 表達文庫,、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細胞、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務,。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),,服務全國各級高校、研究所,、醫(yī)院,、第三方檢測機構、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的企業(yè)之一,,為客戶提供良好的外泌體提取,非編碼RNA試劑,,檢測試劑,,轉染試劑。翌科生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,,影響并帶動團隊取得成功,。翌科生物始終關注自身,在風云變化的時代,,對自身的建設毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信,。