在食品衛(wèi)生領(lǐng)域由于ATP生物發(fā)光技術(shù)無(wú)需培養(yǎng)過(guò)程,操作簡(jiǎn)便,、靈敏度高,,數(shù)分鐘內(nèi)可得到結(jié)果,具有其它微生物檢測(cè)方法無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì),,是目前檢測(cè)微生物更快的方法,。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一。在螢火蟲(chóng)和幾種其它甲蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲(chóng)熒光酶/熒光素,。通過(guò)中間體dioxetanone介導(dǎo)作用,,熒光素酶氧化ATPji活的熒光素。螢火蟲(chóng)熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產(chǎn)生熒光,。這個(gè)反應(yīng)發(fā)生的幾秒內(nèi)在560nm處的化學(xué)熒光達(dá)到更高峰,,當(dāng)熒光素和ATP都超量存在的條件下,發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關(guān)系,。螢火蟲(chóng)熒光素酶很早以前就用于與抗體結(jié)合形成偶聯(lián)物,,作為免疫分析中用熒光素作為底物進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)簽。與HRP和堿性磷酸酶相比,,熒光素酶不耐化學(xué)修飾,。這個(gè)酶的一個(gè)特殊的優(yōu)點(diǎn)是,除了高靈敏度外,,在哺乳動(dòng)物組織中內(nèi)源性熒光素酶的活性很低,。熒光素酶另一個(gè)重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測(cè)。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測(cè)污染,,因?yàn)楫a(chǎn)生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中,。這種類(lèi)型的ATP生物熒光特性足以保證對(duì)食品表面的檢測(cè),無(wú)論是在加工制作工程中設(shè)備的污染還是產(chǎn)品的污染都能檢出,。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試工作液是先用現(xiàn)配。蘇州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
室溫培育30min后加入細(xì)胞孔板中,,置于培養(yǎng)箱常規(guī)培養(yǎng),。2)單克隆細(xì)胞篩選轉(zhuǎn)染24h后胰酶消化細(xì)胞并按1∶6比例接種到新6孔板中,同時(shí)加入實(shí)驗(yàn)確定的濃度G418,,隨后每2d更換一次培養(yǎng)基并維持G418篩選直至單細(xì)胞抗性克隆的出現(xiàn),。分別挑選單一抗性克隆至96孔板,待其逐漸增殖后轉(zhuǎn)入24孔板中繼續(xù)傳代培養(yǎng),。3)熒光素酶活性鑒定陽(yáng)性克隆單一抗性克隆傳代至第五代時(shí)用LuciferaseAs-sayAystem檢測(cè)熒光素酶活性,。檢測(cè)時(shí),各克隆按1×105個(gè)/孔接種到24孔板,,24h后細(xì)胞裂解液裂解12000rpm,,4℃離心10min,,收集裂解物,取上清10μl加入96孔白板中,,向每孔加入50μl熒光素酶96microplateluminometer連續(xù)讀底物,,停留2s后,,取10s的熒光值(RLU),,每個(gè)克隆設(shè)3個(gè)復(fù)孔,保留RLU值高的細(xì)胞克隆繼續(xù)傳代培養(yǎng),,再過(guò)5代后進(jìn)行熒光素酶活性檢測(cè),。保留RLU值維持較高的克隆直至第30代,熒光素酶活性更高的幾個(gè)克隆MCF-7-luc即為陽(yáng)性克隆.各不同數(shù)量細(xì)胞克隆的熒光值檢測(cè)7-luc陽(yáng)性克隆細(xì)胞按細(xì)胞數(shù)將篩出的MCF-4×104,、2×104,、1×104、5000,、2500,、1250、625,、312和156分別接種到96孔黑板中,,另外一組只有細(xì)胞,一組只有培養(yǎng)基作對(duì)照,,設(shè)置2個(gè)復(fù)孔,,常規(guī)培去上清并用PBS洗兩次。徐州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商D-熒光素鉀鹽的配置是什么,?
可用于需要低檢測(cè)限的測(cè)定具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速,,簡(jiǎn)單且均一的生物發(fā)光測(cè)定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基的使用兼容高斯熒光素酶近年來(lái),其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,,因?yàn)檫@些報(bào)告基因較小,,并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),,可通過(guò)氧氣催化腔腸素氧化,,產(chǎn)生光。來(lái)自于海洋足類(lèi)高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分泌出來(lái),。Amplite?高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒使用專(zhuān)有的發(fā)光配方來(lái)定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性,。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時(shí),產(chǎn)***光產(chǎn)物,,該發(fā)光產(chǎn)物提供強(qiáng)發(fā)光,。Amplite高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒特點(diǎn):提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時(shí)的“輝光型”信號(hào)在大量檢測(cè)板之間提供一致的信號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白,。與螢火蟲(chóng)熒光素酶相比,,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同,。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍(lán)光,。與螢火蟲(chóng)螢光素酶類(lèi)似,。
SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級(jí)純()應(yīng)用:1)體外化學(xué)發(fā)光分析(invitro);2)***成像實(shí)驗(yàn)(invivo),;3)高靈敏度ATP分析,;步驟:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測(cè)1)用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,配制成100mM的儲(chǔ)存液(200×,,濃度30mg/ml),。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存,。2)用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液,,配置工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基,。4)待圖像分析前,,向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析,。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用無(wú)菌的PBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),,。一旦使用,,保持冰冷且避光。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,,尤其是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光(見(jiàn)下圖),。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大、小鼠體內(nèi),,之后注入熒光素,,通過(guò)生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來(lái)檢測(cè)光強(qiáng)度變化。D-熒光素鉀鹽長(zhǎng)期保存條件是-20℃干燥避光,。
而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲(chóng)有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲(chóng),、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng))則有更多,,因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)(Photinuspyralis)。熒光素酶報(bào)告基因(Luc)是指以熒光素(luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng),。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,,在luciferin氧化的過(guò)程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類(lèi)酶,,哺乳細(xì)胞無(wú)內(nèi)源性熒光素酶。更常用的熒光素酶有細(xì)菌熒光素酶,、螢火蟲(chóng)熒光素酶和Renilla熒光素酶,。細(xì)菌熒光素酶對(duì)熱敏感,,因此在哺乳細(xì)胞的應(yīng)用中受到限制,。螢火蟲(chóng)熒光素酶靈敏度高,檢測(cè)線性范圍寬達(dá)7~8個(gè)數(shù)量級(jí),,是更常用于哺乳細(xì)胞的報(bào)道基因,,用熒光比色計(jì)即可檢測(cè)酶活性,因而適用于高通量篩選,。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲(chóng)熒光素酶的應(yīng)用,,無(wú)需裂解細(xì)胞即可檢測(cè)酶活性。Renilla熒光素酶催化腸腔(coelenterazine)氧化,,產(chǎn)物可透過(guò)生物膜,,可能是更適用于活細(xì)胞的報(bào)告分子。將熒光素酶報(bào)告基因載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,。D-熒光素鉀鹽運(yùn)輸條件是4℃冰袋運(yùn)輸,。宿遷螢火蟲(chóng)熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像
D-熒光素鉀鹽使用的注意事項(xiàng)。蘇州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
隨著年輕品質(zhì)用戶(hù)逐漸成為貿(mào)易的主力軍,我國(guó)居民赴遠(yuǎn)赴海外熱情有增無(wú)減,。與以往不同的是,這批年輕旅行者對(duì)貿(mào)易提出了新的要求,所以海外那種,,能為用戶(hù)帶來(lái)一站式到家服務(wù)而大受追捧,成為一種新時(shí)尚,。商務(wù)服務(wù)正在演變,,而我們也要跟上腳步,商務(wù)服務(wù)需要在整個(gè)預(yù)訂過(guò)程中既要保證落實(shí)整個(gè)預(yù)訂過(guò)程的權(quán)利,,又要提供日益?zhèn)€性化的服務(wù),。通過(guò)提供更好的解決方案和更多的選擇,為我們則是選擇那些提高遵從性和照顧責(zé)任的策略,。經(jīng)調(diào)查,,在外泌體提取,非編碼RNA試劑,,檢測(cè)試劑,,轉(zhuǎn)染試劑發(fā)展方面,,有業(yè)不少人嘗到了甜頭,但更多的用戶(hù)群則是成為被拖累的一方,,消耗了許多精力卻沒(méi)有換來(lái)更好收入,。對(duì)此,不少業(yè)內(nèi)企業(yè)表示,,體驗(yàn)度是出問(wèn)題比較多的地方,,因此在雙方訂立條款的時(shí)候權(quán)責(zé)一定要明確,這樣才能確保不出問(wèn)題,。翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái)。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,,包括外泌體提取與檢測(cè)試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑,、microRNA 表達(dá)文庫(kù),、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子、細(xì)胞,、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù),。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校,、研究所,、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶(hù),。作為重資產(chǎn)的項(xiàng)目,很難飛速進(jìn)行復(fù)制擴(kuò)張,。按照當(dāng)前的市場(chǎng)環(huán)境,,要想贏得市場(chǎng),還應(yīng)從多方面發(fā)力,。因?yàn)榫湍壳盃顩r來(lái)說(shuō)由于其規(guī)模受限,,翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái),。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,,包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑,、轉(zhuǎn)染試劑,、microRNA 表達(dá)文庫(kù)、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子、細(xì)胞,、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù),。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校,、研究所,、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶(hù),。的企業(yè)還應(yīng)準(zhǔn)確找到目標(biāo)群體,實(shí)現(xiàn)確認(rèn)精確,、推廣精確,、渠道精確和價(jià)格精確的營(yíng)銷(xiāo)精確。蘇州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求,。公司自創(chuàng)立以來(lái),投身于外泌體提取,,非編碼RNA試劑,,檢測(cè)試劑,,轉(zhuǎn)染試劑,,是商務(wù)服務(wù)的主力軍。翌科生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破,。翌科生物始終關(guān)注自身,,在風(fēng)云變化的時(shí)代,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,,高度的專(zhuān)注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信,。