luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：,，在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin),，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,，并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口,，產(chǎn)品價(jià)格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解、受潮影響使用效果,。所以,，需要國(guó)產(chǎn)化的方式生產(chǎn),，一方面可以降低成本，一方面可以增強(qiáng)使用效果,。作者：科遠(yuǎn)迪鏈接：zhuanlan./p/來(lái)源：知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處,。D-luciferin,，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)發(fā)光原理哺乳動(dòng)物生物發(fā)光,，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個(gè)氨基酸構(gòu)成,，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,，當(dāng)細(xì)胞分裂,、轉(zhuǎn)移、分化時(shí),熒光素酶也會(huì)得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),?；颉⒓?xì)胞和活題動(dòng)物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后,，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin，potassiumsalt,，以下均簡(jiǎn)稱熒光素),，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象。所發(fā)的光波長(zhǎng)在540-600nm,。這種酶在ATP,，氧存在的條件下，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光,。D-熒光素鉀鹽使用濃度怎么樣,？鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期

    luciferyladenylate）+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對(duì)比的是人類使用的白熾燈,，只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光，剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi),。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,，而是對(duì)于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對(duì)應(yīng)的酶的統(tǒng)稱，雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來(lái)催化不同的發(fā)光反應(yīng),。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲(chóng)，而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇（發(fā)光類臍菇,，Omphalotusoleariu'）或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲(chóng)中,，發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管（abdominaltrachea）的管道中輸入。一些生物,，如叩頭蟲(chóng),，含有多種不同的熒光素酶，能夠催化同一熒光素底物,，而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲(chóng)有2000多種，而叩甲總科（包括螢火蟲(chóng),、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng)）則有更多,，因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)（Photinuspyrali'）,。應(yīng)用熒光素酶可以在實(shí)驗(yàn)室中用基因工程的方法生成,，并被用于多種不同的實(shí)驗(yàn)。南京游離酸D-熒光素鉀鹽試劑D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光,。

    酸化后消失,，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇,；比較大吸收波長(zhǎng)（水）,。中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉；熒光橙紅鈉,；熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級(jí)：BS物性數(shù)據(jù)編輯播報(bào)1.性狀：未確定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相對(duì)蒸汽密度（g/cm3,空氣=1）：未確定4.熔點(diǎn)（oC）：3205.沸點(diǎn)（oC,常壓）：未確定6.沸點(diǎn)（oC,8kPa）：未確定7.折射率：未確定8.閃點(diǎn)（oC）：未確定9.比旋光度（o）：未確定10.自燃點(diǎn)或引燃溫度（oC）：未確定11.蒸氣壓（kPa,25oC）：未確定12.飽和蒸氣壓（kPa,60oC）：未確定13.燃燒熱（KJ/mol）：未確定14.臨界溫度（oC）：未確定15.臨界壓力（KPa）：未確定16.油水（辛醇/水）分配系數(shù)的對(duì)數(shù)值：未確定17.上限（%,V/V）：未確定18.下限（%,V/V）：未確定19.溶解性：溶于水及乙醇,，帶有強(qiáng)的綠色熒光，水溶性好,。

注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲(chóng)熒光素（beetleluciferin）,、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn),。2）注射方式,、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測(cè)時(shí)間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測(cè)，盡量避免外源ATP的污染,，如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無(wú)菌水。4）為避免反復(fù)凍融,，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化，如有條件,，可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊４妗?）對(duì)于檢測(cè)靈敏度要求特別高的實(shí)驗(yàn),，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品,。6）在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時(shí)，應(yīng)使用無(wú)鈣鎂離子的DPBS,，因鈣鎂離子可能會(huì)抑制熒光素酶的活性,，此外鎂離子可能會(huì)對(duì)熒光素的氧化造成影響，從而影響檢測(cè),。7）為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。8）本產(chǎn)品只作科研用途,！D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光,。

    每孔加入100μl養(yǎng)24h后，Luciferin使其終濃度為150μg/ml,，PBS,，再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測(cè)，分析發(fā)光強(qiáng)度與細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性,。4)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線繪制MCF7-luc細(xì)胞和作為對(duì)照取表達(dá)熒光素酶的MCF-7細(xì)胞，接種于24孔板,，接種密度為2×104/孔,。細(xì)胞接種后1～7d，每天胰蛋白酶消化其中3孔細(xì)胞,，用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定細(xì)胞數(shù),。以細(xì)胞生長(zhǎng)天數(shù)為橫坐標(biāo)，細(xì)胞數(shù)目為縱坐標(biāo),，分別繪制兩種細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,。二．動(dòng)物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠，4～5周齡,，體重（15±2）g,，雌雄各3只。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7用PBS重懸為2．5×10/ml懸液,，每只裸鼠左右背側(cè)近腋部皮下接種100μl,，共接種6只。接種后第5d采用德國(guó)BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度,。以后每5d觀測(cè)一連續(xù)觀測(cè)30d,。觀測(cè)前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉（計(jì)量為：35mg/kg體重），按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin（invivograde）,，10min后,，進(jìn)行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長(zhǎng)情況，定量分析各時(shí)間點(diǎn)的熒光值,。繪制腫大的瘤皮下生長(zhǎng)曲線.MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學(xué)觀察MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下接種后25d,，脫頸處死小鼠,，取腫大的瘤組織，制成石蠟切片,，切片厚度為3μm,。D-熒光素鉀鹽檢測(cè)的安全性如何保障？淮安熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽生物公司

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    海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報(bào)告檢測(cè),。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定Amplite?Renilla螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒提供了一種快速，靈敏的方法,，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測(cè)中檢海腎螢光素酶的活性,，與海腎螢光素酶相互作用后，該試劑產(chǎn)生具有強(qiáng)光的產(chǎn)物,。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)：該測(cè)定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測(cè)量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)每個(gè)試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測(cè)所必不可少的組分,。熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素等物質(zhì)氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中,，不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,，除了螢火蟲(chóng)熒光素酶（FireflyLuciferase）之外，還有發(fā)光細(xì)菌體內(nèi)的細(xì)菌熒光素酶,、發(fā)光海星的海星熒光素酶等,。目前，人們對(duì)螢火蟲(chóng)熒光素酶的研究**多,、應(yīng)用***,。一則關(guān)于手機(jī)上的細(xì)菌的新聞里，**在用ATP熒光檢測(cè)儀檢測(cè)手機(jī)表面的細(xì)菌,。ATP是一種在動(dòng)物,、植物和細(xì)菌等活細(xì)胞中都存在的能量物質(zhì)，由前述的反應(yīng)式可知,，ATP與熒光素,、熒光素酶反應(yīng)發(fā)出熒光。檢測(cè)樣品中的微生物越多,，ATP就越多,，熒光反應(yīng)的光亮就越大。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期

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