而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲有2000多種，而叩甲總科（包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲）則有更多,，因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyralis）,。熒光素酶報告基因（Luc）是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng),。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,，在luciferin氧化的過程中,，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類酶,，哺乳細胞無內(nèi)源性熒光素酶,。更常用的熒光素酶有細菌熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和Renilla熒光素酶,。細菌熒光素酶對熱敏感,，因此在哺乳細胞的應(yīng)用中受到限制。螢火蟲熒光素酶靈敏度高,，檢測線性范圍寬達7～8個數(shù)量級,，是更常用于哺乳細胞的報道基因，用熒光比色計即可檢測酶活性,，因而適用于高通量篩選,。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲熒光素酶的應(yīng)用，無需裂解細胞即可檢測酶活性,。Renilla熒光素酶催化腸腔（coelenterazine）氧化,，產(chǎn)物可透過生物膜，可能是更適用于活細胞的報告分子,。將熒光素酶報告基因載體轉(zhuǎn)染到細胞中,。D-熒光素鉀鹽熒光素酶和ATP水平分析。鎮(zhèn)江游離酸D-熒光素鉀鹽試劑

    包括熒光素酶和ATP水平分析,；報告基因分析,；高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式：D-熒光素（游離酸），D-熒光素鹽（鈉鹽和鉀鹽）,。主要差別在于溶解特性：前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,，除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液?？扇苡诩状己虳MSO,；后者能夠易溶于水或緩沖液中，使用方便,，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),，混勻。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析。2.活題成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）,。淮安D-熒光素鉀鹽公司D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司,。

    故根據(jù)熒光反應(yīng)的情況可以檢測樣品中的微生物含量,。APT熒光檢測儀***用于食品、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測,。1970年,，科學(xué)家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu)；1985年,，科學(xué)家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,，并在大腸桿菌中表達，從而得到了具有活性的熒光素酶,；1986年,，科學(xué)家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列。隨后,，各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,，熒光素酶的研究和應(yīng)用不斷發(fā)展。目前,，熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué),、微生物學(xué)等許多領(lǐng)域,。以醫(yī)學(xué)領(lǐng)域為例，**們將熒光素酶基因嵌入到*細胞中,，再注入熒光素,，使*細胞發(fā)光，通過探測熒光,，就能監(jiān)測*細胞的擴散和轉(zhuǎn)移,。同理,，用這種方法能對致病基因,、***免疫機制等進行研究，對某些疾病進行診斷,，監(jiān)測疫苗,、藥物和治療方法的效力。

    短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),，混勻。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基,。作者：思存鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。高斯熒光素酶近年來,，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加，因為這些報告基因較小,，并且不需要ATP的存在,。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì)，可通過氧氣催化腔腸素氧化,，產(chǎn)生光,。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達后可有效地從哺乳動物細胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒（#AAT-12530）使用專有的發(fā)光配方來定量細胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性,。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,，產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物，該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光,。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點：提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,。D-熒光素鉀鹽檢測公司招代理嗎？

    其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶,。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,，熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化，有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷（ATP）,。沒有熒光素酶的情況下,，螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢，而鈣離子的存在常?？梢赃M一步加速反應(yīng)（與肌肉收縮的情況相似）,。[1]熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步：螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸（luciferyladenylate）+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,，只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光，剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M,。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,，而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱，雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng),。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲，而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇（發(fā)光類臍菇,，Omphalotusolearius）或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中，發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管（abdominaltrachea）的管道中輸入,。一些生物,，如叩頭蟲，含有多種不同的熒光素酶，能夠催化同一熒光素底物,。D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司,？間接免疫熒光試劑盒

D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種？鎮(zhèn)江游離酸D-熒光素鉀鹽試劑

    附錄ⅧB）,，與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液制成的對照液比較,，不得更濃（）。干燥失重取本品,，在105℃干燥至恒重,，減失重量不得過%（附錄ⅧL）。鋅鹽取本品,，加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后,，加稀鹽酸2ml，搖勻,，濾過,，濾液中加亞鐵**鉀試液1ml，不得發(fā)生渾濁,。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,，點于濾紙上，即生成黃色斑點,，趁濕置溴蒸氣中,，1分鐘后再使與氨蒸氣接觸，斑點即變?yōu)樯罘奂t色,。(2)本品的水溶液顯強烈的熒光,，用大量的水稀釋后仍極明顯；但加酸使成酸性后,，熒光即消失,；再加堿使成堿性，熒光又顯出,。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）,。6含量測定編輯取本品約,，精密稱定,，加水20ml溶解后，加稀鹽酸5ml使熒光素析出,，用丁醇－氯仿(1:1)提取4次,，每次20ml，合并提取液,，用水10ml洗滌,，洗液再用異丁醇－氯仿(1:1)5ml振搖提取，合并提取液，置105℃恒重的容器中,，在水浴上通風(fēng)蒸發(fā)至干,，殘渣用乙醇10ml溶解后，再置水浴上蒸干,，并在105℃干燥至恒重,，精密稱定，殘渣重量與相乘,，即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量,。熒光素鈉是一種有機化合物，分子式為C20H10Na2O5,，橙紅色粉末,，無氣味，有吸濕性,；易溶于水,，溶液呈黃紅色，并帶極強的黃綠色熒光,。鎮(zhèn)江游離酸D-熒光素鉀鹽試劑

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