可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用,，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體,，同時在實驗細(xì)胞***轉(zhuǎn)過表達該轉(zhuǎn)錄因子，可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達是否提高熒光素酶活性,。d.可以分析信號通路是否***,，將該信號通路的下游響應(yīng)原件序列構(gòu)建入報告基因載體，在不同上游信號條件下,，熒光素酶活性**了通路的下游響應(yīng),。例如在GPCR研究中，將cAMPresponseelement（CRE）載入報告基因載體,，構(gòu)建穩(wěn)定表達細(xì)胞株后,，可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如,，將HIF1α的響應(yīng)原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,，可以用于低氧相關(guān)通路的研究。e.驗證microRNA的靶序列,，將待測的3’UTR序列插入報告基因載體,，再共轉(zhuǎn)入該microRNA，如果熒光素酶活性下降,，則提示為其靶序列,。Q：在[信諾金達]做熒光素酶報告基因檢測，需要提供什么,？實驗結(jié)果包括哪些,？您需要提供：1.基因序列或模板，需提供詳細(xì)的轉(zhuǎn)錄因子,、目的基因或microRNA信息,；2.實驗細(xì)胞，[信諾金達]默認(rèn)為使用293T細(xì)胞,，實驗結(jié)束后,，[信諾金達]會為您提供實驗流程及完整報告一份，包括實驗原始數(shù)據(jù),、圖片,、分析結(jié)果等。南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣,？泰州體外研究D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長

    并實現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報告基因檢測,。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo),，這使得CellTiter-Glo?能有效測定細(xì)胞活力,，尤其是在高通量應(yīng)用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測系統(tǒng),。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應(yīng)測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外，還可以檢測底物（luciferin）濃度的變化,。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護基團偶聯(lián)，能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶,。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團隊的建立，一種改進的luciferin面世,，能更好地用于典型的報告基因檢測應(yīng)用,。這種新的底物——fluoroluciferin，是新型底物開發(fā)的一個早期實例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶,。雙熒光素酶 試劑盒D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司,？

    luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：，在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進口，產(chǎn)品價格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果。所以,，需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn),，一方面可以降低成本，一方面可以增強使用效果,。作者：科遠(yuǎn)迪鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。D-luciferin,，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個氨基酸構(gòu)成,，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達熒光素酶,，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達熒光素酶的細(xì)胞株,，當(dāng)細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)移,、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達,。基因,、細(xì)胞和活題動物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實驗動物體內(nèi)后，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin,，potassiumsalt,，以下均簡稱熒光素)，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。所發(fā)的光波長在540-600nm,。這種酶在ATP，氧存在的條件下,，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光,。

    就可以用高敏感度的CCD相機對動物體內(nèi)進行***觀察而不會傷害到動物本身。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光,，而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,，如螢光探測器或改進后的光學(xué)顯微鏡探測到。這就使得對包括***在內(nèi)的多種生命活動進程進行觀察成為可能,。例如,，螢光素酶已經(jīng)被用于商業(yè)化的次世代焦磷酸定序技術(shù)，借由dNTP接上DNA鏈時水解放出的焦磷酸,，透過另外一個硫酸鹽腺甘酸轉(zhuǎn)移酶反應(yīng),，螢光素酶能將產(chǎn)物ATP與螢光素轉(zhuǎn)化為冷光，機器借此探測光線并定序,。螢光素酶也可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂,。法醫(yī)可以用含有螢光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡。醫(yī)院用螢光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病,。螢光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,，例如，用于在轉(zhuǎn)染過螢光素酶的細(xì)胞中檢測特定啟動子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平,；這一技術(shù)被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法（LuciferaseAssay）,。螢光素酶是一個熱敏感蛋白，因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護能力,。此外,，螢光素酶水母素的發(fā)光強度與環(huán)境中鈣離子濃度相關(guān)，因此可用于檢測生物體內(nèi)的鈣。做D-熒光素鉀鹽測試品牌有哪些,？

    從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的***功效等,。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征,。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級純（）應(yīng)用：1）活細(xì)胞,、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析；2）***用于報告基因分析,，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析,；Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）配制成100mM的儲存液（200×，濃度30mg/ml）,?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,，配制工作液(終濃度150μg/mL)。3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留,。4）圖像分析前立即向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,，然后進行圖像分析（或者細(xì)胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號）。D-熒光素鉀鹽注：螢光素,、螢光素酶,、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽,、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素,、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶,、熒光素鉀鹽,、熒光素鈉鹽。Protocol2：Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1）用無菌的DPBS（w/oMg2+,、Ca2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),，。一旦使用,，保持冰冷且避光,。D-熒光素鉀鹽測試比較好的公司有哪幾個？常州游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像

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    熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,，其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,，同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶（Gaussluciferase）,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),，可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,，常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性,。高濃度（體內(nèi)）甚至沒有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒（12518）使用無DTT**配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性,。該測定基于螢火蟲熒光素酶，螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,，可催化熒光素的兩步氧化,，在560nm處產(chǎn)生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點：具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,，可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度,。泰州體外研究D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長

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