并實(shí)現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報(bào)告基因檢測(cè),。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測(cè)方法,。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo),，這使得CellTiter-Glo?能有效測(cè)定細(xì)胞活力，尤其是在高通量應(yīng)用中,。該檢測(cè)原理還促進(jìn)了其它ATP檢測(cè)平臺(tái)的誕生,，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測(cè)系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測(cè)除了可以利用螢火蟲(chóng)螢光素酶反應(yīng)測(cè)定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,，還可以檢測(cè)底物（luciferin）濃度的變化,。通過(guò)將luciferin與可被不同酶類識(shí)別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)偶聯(lián)，能對(duì)這些酶進(jìn)行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測(cè)，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶,。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)隨著對(duì)螢火蟲(chóng)螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團(tuán)隊(duì)的建立,，一種改進(jìn)的luciferin面世，能更好地用于典型的報(bào)告基因檢測(cè)應(yīng)用,。這種新的底物——fluoroluciferin,，是新型底物開(kāi)發(fā)的一個(gè)早期實(shí)例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開(kāi)發(fā)方面的經(jīng)驗(yàn),，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計(jì)出一種新型螢光素酶報(bào)告基因,，即NanoLuc?螢光素酶。D-熒光素鉀鹽的使用說(shuō)明,。鎮(zhèn)江熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

    可用熒光素酶檢測(cè)系統(tǒng)靈敏方便地測(cè)定熒光素酶基因的表達(dá),。熒光素酶報(bào)告基因有許多優(yōu)點(diǎn)：①非放射性；②比CAT及其他報(bào)告基因速度快,；③比CAT靈敏100倍,；④熒光素酶在哺乳細(xì)胞中的半衰期為3小時(shí)，在植物中的半衰期為3．5小時(shí),。由于半衰期短,，故啟動(dòng)子的改變會(huì)即時(shí)導(dǎo)致熒光素酶活性的改變，而熒光素酶不會(huì)積累,。相反,，CAT在哺乳細(xì)胞中的半衰期為50小時(shí)。熒光素酶濃度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范圍內(nèi),，熒光信號(hào)強(qiáng)度與酶濃度成正比,。在理想條件下，可檢測(cè)到l0-20mol/L的熒光素酶,。檢測(cè)步驟：1．用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測(cè)啟動(dòng)子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn),。2．設(shè)計(jì)引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動(dòng)子片段，將此片段插入到熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒（pGL3-basic）中,。3．篩選陽(yáng)性克隆,，測(cè)序。擴(kuò)增克隆并提純質(zhì)粒備用,。4．?dāng)U增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒，提純備用,。同時(shí)準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對(duì)照,，提純備用。5．培養(yǎng)293（或其它目的細(xì)胞）,，并接種于24孔板中,，生長(zhǎng)10-24小時(shí)（80%匯合度）。6．將報(bào)告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。7．提取蛋白并用于熒光素酶檢測(cè),。8．加入底物,，測(cè)定熒光素酶的活性。9．計(jì)算相對(duì)熒光強(qiáng)度,，并與空載對(duì)照比較,。淮安熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽公司熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽,。

    可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時(shí)的“輝光型”信號(hào)在大量檢測(cè)板之間提供一致的信號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑（Renillareniformis）分離的36kDa蛋白,。與螢火蟲(chóng)熒光素酶相比，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同,。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,，產(chǎn)生480nm的藍(lán)光。與螢火蟲(chóng)螢光素酶類似,，海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報(bào)告檢測(cè),。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定Amplite?Renilla螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒（#AAT-12535）提供了一種快速，靈敏的方法,，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測(cè)中檢海腎螢光素酶的活性,，與海腎螢光素酶相互作用后，該試劑產(chǎn)生具有強(qiáng)光的產(chǎn)物,。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)：該測(cè)定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測(cè)量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)每個(gè)試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測(cè)所必不可少的組分各類螢光素酶底物,，輔因子和物理特性：近幾十年來(lái)，腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術(shù)得到了很大的發(fā)展,，已經(jīng)在細(xì)胞增殖,、細(xì)胞毒性和生物量計(jì)數(shù)等方面廣泛應(yīng)用。

    而是對(duì)于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對(duì)應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,，雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來(lái)催化不同的發(fā)光反應(yīng)。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲(chóng),，而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇（發(fā)光類臍菇,，Omphalotusolearius）或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲(chóng)中,，發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管（abdominaltrachea）的管道中輸入,。一些生物，如叩頭蟲(chóng),，含有多種不同的螢光素酶,，能夠催化同一螢光素底物，而發(fā)出不同顏色的螢光,。螢火蟲(chóng)有2000多種,，而叩甲總科（包括螢火蟲(chóng),、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng)）則有更多，因此它們的螢光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。如今研究得**透徹的螢光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)（Photinuspyralis）,。[1]螢光素酶可以在實(shí)驗(yàn)室中用基因工程的方法生成，并被用于多種不同的實(shí)驗(yàn),。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶,。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段，可以對(duì)整個(gè)動(dòng)物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析：將不同類型的細(xì)胞（骨髓干細(xì)胞,、T細(xì)胞等）標(biāo)記上（即表達(dá)）螢光素酶,。D-熒光素鉀鹽運(yùn)輸條件是4℃冰袋運(yùn)輸。

    熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,，其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來(lái)自螢火蟲(chóng)體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase，同時(shí)近年來(lái)研究得較多的來(lái)源于高斯氏菌的高斯熒光素酶（Gaussluciferase）,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,，在luciferin氧化的過(guò)程中，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),，可通過(guò)熒光測(cè)定儀設(shè)備測(cè)定luciferin氧化過(guò)程中釋放的生物熒光,，常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。螢火蟲(chóng)螢光素酶**通用和**常見(jiàn)的報(bào)告基因是北美螢火蟲(chóng)photinuspyralis的熒光素酶,，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性,。高濃度（體內(nèi)）甚至沒(méi)有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞,。Amplite?螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒（12518）使用無(wú)DTT**配方來(lái)定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性,。該測(cè)定基于螢火蟲(chóng)熒光素酶，螢火蟲(chóng)熒光素酶是一種單體的61kD酶,，可催化熒光素的兩步氧化,，在560nm處產(chǎn)生光。Amplite?螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)：具有優(yōu)化的“混合讀取”測(cè)定規(guī)程,，可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度,。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試哪個(gè)公司好？鹽城游離酸D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

做D-熒光素鉀鹽測(cè)試品牌有哪些,？鎮(zhèn)江熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

    后者能夠易溶于水或緩沖液中,，使用方便，溶劑無(wú)毒性,，特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn),。配成溶液后的這三種產(chǎn)品，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒(méi)有實(shí)質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運(yùn)輸和保存運(yùn)輸條件：4℃冰袋運(yùn)輸,；短期保存：4℃干燥避光長(zhǎng)期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長(zhǎng)期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測(cè)1）用無(wú)菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽，配制成30mg/mL的儲(chǔ)存液(100-200×),，混勻,。立即使用，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min,，然后進(jìn)行圖像分析。2.***成像分析1）用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,，混勻,。2）用μm濾膜過(guò)濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，從而確定更高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期,。 鎮(zhèn)江熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ)，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái),。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,，包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑,、轉(zhuǎn)染試劑,、microRNA 表達(dá)文庫(kù)、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子,、細(xì)胞,、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù),。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā)，服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校,、研究所,、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的公司，是一家集研發(fā),、設(shè)計(jì),、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。翌科生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富,、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取，非編碼RNA試劑,，檢測(cè)試劑,，轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念,，影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功,。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求,，提高產(chǎn)品價(jià)值,，是我們前行的力量。