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鹽城游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像

來源: 發(fā)布時間:2022-06-14

    通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學,,例如Bright-Glo?,、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測,。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理,,并實現(xiàn)了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,,現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法,。ATP是細胞健康的重要指標,,這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,,尤其是在高通量應用中,。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測系統(tǒng),。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,,還可以檢測底物(luciferin)濃度的變化,。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應的保護基團偶聯(lián),,能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,,一種改進的luciferin面世,,能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin,。D-熒光素鉀鹽測試適用范圍包括哪些,?鹽城游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像

    熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,,在luciferin氧化的過程中,,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,,常應用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性,。高濃度(體內(nèi))甚至沒有毒性,,可用于原核和真核細胞。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性,。該測定基于螢火蟲熒光素酶,,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,可催化熒光素的兩步氧化,,在560nm處產(chǎn)生光,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點:具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度,。南通專業(yè)做D-熒光素鉀鹽試劑南京D-熒光素鉀鹽測試公司有哪幾家,。

    luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M,。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應,。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中,,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,,如叩頭蟲,,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,,而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali'),。應用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,,并被用于多種不同的實驗。

    在食品衛(wèi)生領域由于ATP生物發(fā)光技術(shù)無需培養(yǎng)過程,,操作簡便,、靈敏度高,數(shù)分鐘內(nèi)可得到結(jié)果,,具有其它微生物檢測方法無法比擬的優(yōu)勢,,是目前檢測微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一,。在螢火蟲和幾種其它甲蟲中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲熒光酶/熒光素,。通過中間體dioxetanone介導作用,熒光素酶氧化ATPji活的熒光素,。螢火蟲熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產(chǎn)生熒光,。這個反應發(fā)生的幾秒內(nèi)在560nm處的化學熒光達到更高峰,當熒光素和ATP都超量存在的條件下,,發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關系,。螢火蟲熒光素酶很早以前就用于與抗體結(jié)合形成偶聯(lián)物,作為免疫分析中用熒光素作為底物進行檢測的標簽,。與HRP和堿性磷酸酶相比,,熒光素酶不耐化學修飾。這個酶的一個特殊的優(yōu)點是,,除了高靈敏度外,,在哺乳動物組織中內(nèi)源性熒光素酶的活性很低。熒光素酶另一個重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測,。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測污染,,因為產(chǎn)生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中。這種類型的ATP生物熒光特性足以保證對食品表面的檢測,無論是在加工制作工程中設備的污染還是產(chǎn)品的污染都能檢出,。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,。D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測。

    從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的***功效等,。也可以利用ATP對此反應體系的影響,,根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征,。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應用:1)活細胞,、組織或生物體內(nèi)luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析,;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)配制成100mM的儲存液(200×,濃度30mg/ml),?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,,配制工作液(終濃度150μg/mL),。3)去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。4)圖像分析前立即向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,,然后進行圖像分析(或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號),。D-熒光素鉀鹽注:螢光素、螢光素酶,、螢火蟲螢光素酶,、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素,、熒光素酶,、螢火蟲熒光素酶、熒光素鉀鹽,、熒光素鈉鹽,。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),,,。一旦使用,保持冰冷且避光,。D-熒光素也常用于身體的外部研究,。螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理

D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。鹽城游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像

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南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎,,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達文庫,、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細胞、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務,。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),,服務全國各級高校、研究所,、醫(yī)院,、第三方檢測機構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的公司,,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務實、誠實可信的企業(yè),。翌科生物深耕行業(yè)多年,,始終以客戶的需求為向?qū)В瑸榭蛻籼峁?**的外泌體提取,,非編碼RNA試劑,,檢測試劑,轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,,影響并帶動團隊取得成功。翌科生物始終關注商務服務市場,以敏銳的市場洞察力,,實現(xiàn)與客戶的成長共贏,。