通過(guò)開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)改變螢火蟲螢光素酶檢測(cè)的信號(hào)動(dòng)力學(xué),，例如Bright-Glo?,、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進(jìn)行檢測(cè)。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡(jiǎn)化了樣品處理,，并實(shí)現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報(bào)告基因檢測(cè),。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,，現(xiàn)在已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測(cè)方法。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo)，這使得CellTiter-Glo?能有效測(cè)定細(xì)胞活力,，尤其是在高通量應(yīng)用中,。該檢測(cè)原理還促進(jìn)了其它ATP檢測(cè)平臺(tái)的誕生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測(cè)系統(tǒng),。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測(cè)除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應(yīng)測(cè)定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,，還可以檢測(cè)底物（luciferin）濃度的變化。通過(guò)將luciferin與可被不同酶類識(shí)別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)偶聯(lián),，能對(duì)這些酶進(jìn)行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測(cè),，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)隨著對(duì)螢火蟲螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團(tuán)隊(duì)的建立,，一種改進(jìn)的luciferin面世,，能更好地用于典型的報(bào)告基因檢測(cè)應(yīng)用。這種新的底物——fluoroluciferin,。D-熒光素鉀鹽的合作平臺(tái)有哪些,？南京熒光素酶D-熒光素鉀鹽

    經(jīng)HE染色后觀察細(xì)胞的病理形態(tài)學(xué)?；铑}動(dòng)物成像技術(shù)是近期發(fā)展起來(lái)的一種新型穩(wěn)定可靠,是檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)分子及細(xì)胞事件的影像檢測(cè)技術(shù),，強(qiáng)有力手段。利用生物發(fā)光成像（BLI）可以對(duì)活題病灶的大小進(jìn)行無(wú)損傷直觀準(zhǔn)確檢測(cè),。我們有自己的獨(dú)自有機(jī)合成實(shí)驗(yàn)室,，可以生產(chǎn)合成各種化學(xué)發(fā)光試劑，我們可以提供化學(xué)發(fā)光試劑,、化學(xué)發(fā)光底物,、發(fā)光標(biāo)記物、發(fā)光增強(qiáng)劑,、染料探針類,、微生物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。相關(guān)列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(環(huán)已胺)鹽PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來(lái)酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學(xué)發(fā)光分析試劑及標(biāo)記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE,。鎮(zhèn)江游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像原理D-熒光素鉀鹽測(cè)試比較好的公司有哪幾個(gè),？

    熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠,、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,，可以對(duì)整個(gè)動(dòng)物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析：將不同類型的細(xì)胞（骨髓干細(xì)胞,、T細(xì)胞等）標(biāo)記上（即表達(dá)）熒光素酶，就可以用高敏感度的CCD相機(jī)進(jìn)行對(duì)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行活ti觀察而不會(huì)傷害到動(dòng)物本身,。在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光,，而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,，如熒光探測(cè)器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測(cè)到。這就使得對(duì)包括影響在內(nèi)的多種生命活動(dòng)進(jìn)程進(jìn)行觀察成為可能,。例如，熒光素酶可以被用于檢測(cè)血庫(kù)中所存血液中的紅血球是否開(kāi)始破裂,。法醫(yī)可以用含有熒光素酶的溶液來(lái)檢測(cè)犯罪現(xiàn)場(chǎng)中殘留的血跡,。醫(yī)院用熒光素酶的發(fā)光來(lái)發(fā)現(xiàn)特定的疾病。熒光素酶還可以作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,，例如,，用于在轉(zhuǎn)染過(guò)熒光素酶的細(xì)胞中檢測(cè)特定啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平；這一技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測(cè)法或熒光素酶檢測(cè)法（LuciferaseAssay）,。熒光素酶是一個(gè)熱敏感蛋白,，因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過(guò)程中熱休克蛋白的保護(hù)能力。

    4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min，然后進(jìn)行圖像分析,。2.活ti成像分析1）用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液，混勻,。2）用μm濾膜過(guò)濾除菌,。立即使用，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,，以小鼠為例,，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期）后進(jìn)行成像分析,。注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，從而確定更高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期,。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）,、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn),。2）注射方式,、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測(cè)時(shí)間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測(cè),，盡量避免外源ATP的污染，如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無(wú)菌水,。4）為避免反復(fù)凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化,，如有條件，可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊４?。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽測(cè)試價(jià)格,。

    而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,，而叩甲總科（包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲）則有更多，因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyralis）,。熒光素酶報(bào)告基因（Luc）是指以熒光素(luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,，在luciferin氧化的過(guò)程中,，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類酶,，哺乳細(xì)胞無(wú)內(nèi)源性熒光素酶,。更常用的熒光素酶有細(xì)菌熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和Renilla熒光素酶,。細(xì)菌熒光素酶對(duì)熱敏感,，因此在哺乳細(xì)胞的應(yīng)用中受到限制。螢火蟲熒光素酶靈敏度高,，檢測(cè)線性范圍寬達(dá)7～8個(gè)數(shù)量級(jí),，是更常用于哺乳細(xì)胞的報(bào)道基因，用熒光比色計(jì)即可檢測(cè)酶活性,，因而適用于高通量篩選,。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲熒光素酶的應(yīng)用，無(wú)需裂解細(xì)胞即可檢測(cè)酶活性,。Renilla熒光素酶催化腸腔（coelenterazine）氧化,，產(chǎn)物可透過(guò)生物膜，可能是更適用于活細(xì)胞的報(bào)告分子,。將熒光素酶報(bào)告基因載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試工作液是先用現(xiàn)配。蘇州ATPD-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽,。南京熒光素酶D-熒光素鉀鹽

    LAR）Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測(cè)試劑LuciferaseAssaySystem（LAR）,，為靈敏,、非放射性的報(bào)告基因檢測(cè)拉開(kāi)了序幕。LAR與螢火蟲螢光素酶（luc）報(bào)告基因一起,，為研究人員開(kāi)始了解基因表達(dá)調(diào)控因子提供了首要的工具,。[1]1995Dual-Luciferase?報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)（DLR）DLR是第一種允許在單個(gè)樣本中依次檢測(cè)兩個(gè)報(bào)告基因的試劑。通過(guò)允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化,，在提高報(bào)告基因檢測(cè)的可靠性方面取得了關(guān)鍵進(jìn)展,。此外，pGL3報(bào)告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因,，luc+。這個(gè)改造一種報(bào)告基因以實(shí)現(xiàn)性能改進(jìn)的例子后來(lái)被進(jìn)一步應(yīng)用到pGL4和luc2報(bào)告基因上,，通過(guò)生物信息學(xué)和合成方法,，實(shí)現(xiàn)了更大的改進(jìn)。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶（Enliten）基礎(chǔ)上,，改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶,。UltraGlo?的開(kāi)發(fā)是在各種檢測(cè)和儲(chǔ)藏條件下進(jìn)行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測(cè)的關(guān)鍵。此后,，通過(guò)開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)改變螢火蟲螢光素酶檢測(cè)的信號(hào)動(dòng)力學(xué),，例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進(jìn)行檢測(cè),。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡(jiǎn)化了樣品處理,。南京熒光素酶D-熒光素鉀鹽