是新型底物開發(fā)的一個早期實例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶,。這是一種小分子（19kDa）單體酶,，具有獨特的底物,，其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍,。這種新型的報告基因有著范圍廣的應(yīng)用前景，為進(jìn)一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ),。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽的理想特征,。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）的供體。一項針對各種能量受體熒光基團(tuán)的深入研究發(fā)現(xiàn),，紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn),。可將這些熒光基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合,，或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進(jìn)行活細(xì)胞中蛋白質(zhì)：蛋白質(zhì)相互作用的檢測,。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生，Promega的科學(xué)家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng),，即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?,。該系統(tǒng)由兩部分組成：11個氨基酸的小標(biāo)簽和一個更大，更精細(xì)的NanoLuc?亞基,，LgBiT,。這兩部分結(jié)構(gòu)互補結(jié)合。南京靠譜的D-熒光素鉀鹽測試公司,。南通熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

    SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級純（）應(yīng)用：1）體外化學(xué)發(fā)光分析（invitro）,；2）***成像實驗（invivo）；3）高靈敏度ATP分析,；步驟：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,，配制成100mM的儲存液（200×，濃度30mg/ml）,?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2）用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,，配置工作液(終濃度150μg/mL),。3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,，然后進(jìn)行圖像分析。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用無菌的PBS（w/oMg2+,、Ca2+）配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),，。一旦使用,，保持冰冷且避光,。D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,，尤其是體內(nèi)***成像技術(shù),。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光（見下圖）。當(dāng)熒光素過量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,，導(dǎo)入研究動物如大,、小鼠體內(nèi)，之后注入熒光素,，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強度變化,。南京體外研究D-熒光素鉀鹽哪家好熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。

    短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),，混勻。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。作者：思存鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。高斯熒光素酶近年來，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加,，因為這些報告基因較小,，并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),，可通過氧氣催化腔腸素氧化,，產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動物細(xì)胞中分泌出來,。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒（#AAT-12530）使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性,。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時，產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物,，該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光,。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點：提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度。

    可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑（Renillareniformis）分離的36kDa蛋白,。與螢火蟲熒光素酶相比,，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,，產(chǎn)生480nm的藍(lán)光,。與螢火蟲螢光素酶類似,，海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒（#AAT-12535）提供了一種快速,，靈敏的方法,，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性，與海腎螢光素酶相互作用后,，該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物,。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點：該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物，輔因子和物理特性：近幾十年來,，腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術(shù)得到了很大的發(fā)展,，已經(jīng)在細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和生物量計數(shù)等方面廣泛應(yīng)用,。D-熒光素鉀鹽測試比較好的公司有哪幾個,？

    可用于需要低檢測限的測定具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速，簡單且均一的生物發(fā)光測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基的使用兼容高斯熒光素酶近年來,，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加,，因為這些報告基因較小，并且不需要ATP的存在,。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),，可通過氧氣催化腔腸素氧化，產(chǎn)生光,。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動物細(xì)胞中分泌出來,。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,，產(chǎn)***光產(chǎn)物,，該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點：提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,，可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑（Renillareniformis）分離的36kDa蛋白,。與螢火蟲熒光素酶相比，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同,。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,，產(chǎn)生480nm的藍(lán)光。與螢火蟲螢光素酶類似,。D-熒光素鉀鹽長期保存是有效期一年,。徐州ATPD-熒光素鉀鹽保質(zhì)期

D-熒光素鉀鹽測試怎么樣？南通熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

    因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,，并且發(fā)光光強度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān),。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin),，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的，約一分鐘就可以擴散到小鼠全身,。熒光素的半衰期約三個小時,，只有活細(xì)胞才能夠持續(xù)表達(dá)熒光素酶。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能,。(2)熒光素是280道爾頓的小分子,，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障,。(3)熒光素在體內(nèi)擴散速度快，可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入動物體內(nèi),。腹腔注射擴散較慢,，持續(xù)發(fā)光長。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞開始發(fā)光,，10min后強度達(dá)到穩(wěn)定的更高點,，在更高點持續(xù)約20~30min后開始衰減，約3h后熒光素排除,，發(fā)光全部消失,，更佳檢測時間是在注射后15~35min之間；若進(jìn)行熒光素靜脈注射,，擴散快,，但發(fā)光持續(xù)時間很短?？蒲腥藛T根據(jù)大量的實驗總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg,，即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制,，只要觀察的條件控制一致就可以,。雖然底物在動物體內(nèi)有一定的代謝過程。南通熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存