請穿實驗服并戴一次性手套操作。8）本產(chǎn)品只作科研用途,！D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,，存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下,，D-熒光素鉀被氧化,，產(chǎn)生藍綠色的光(560nm)，當(dāng)?shù)孜镞^量時,，產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān),。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動物細胞的常用報告基因,。由于沒有背景干擾,，因此可以很容易地檢測出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,，如螢火蟲,。在ATP存在下，螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光,?；瘜W(xué)研究中可用于熒光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS,。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。鎮(zhèn)江螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽試劑

    螢光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,，其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,，螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期,，這一現(xiàn)象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺,。1991年，Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品,，并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,，通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù)。Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,，Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性,。當(dāng)時的人們認為，螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性,、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,，可能會對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響。幾個月后，***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,，使這項新技術(shù)正式并更***地為全球研究人員服務(wù),。隨后30年里，Promega不斷在螢光素酶實驗工具領(lǐng)域推陳出新,，保持技術(shù)***的地位,。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng),。鹽城熒光素D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽,。

    每孔加入100μl養(yǎng)24h后，Luciferin使其終濃度為150μg/ml,，PBS,，再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測，分析發(fā)光強度與細胞數(shù)之間的相關(guān)性,。4)細胞生長曲線繪制MCF7-luc細胞和作為對照取表達熒光素酶的MCF-7細胞,，接種于24孔板，接種密度為2×104/孔,。細胞接種后1～7d,，每天胰蛋白酶消化其中3孔細胞，用細胞計數(shù)儀測定細胞數(shù),。以細胞生長天數(shù)為橫坐標(biāo),，細胞數(shù)目為縱坐標(biāo)，分別繪制兩種細胞生長曲線,。二．動物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠,，4～5周齡，體重（15±2）g,，雌雄各3只,。取對數(shù)生長期的MCF-7用PBS重懸為2．5×10/ml懸液，每只裸鼠左右背側(cè)近腋部皮下接種100μl,，共接種6只,。接種后第5d采用德國BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測信號強度。以后每5d觀測一連續(xù)觀測30d,。觀測前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉（計量為：35mg/kg體重）,，按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin（invivograde），10min后,，進行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長情況,，定量分析各時間點的熒光值。繪制腫大的瘤皮下生長曲線.MCF-7-luc細胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學(xué)觀察MCF-7-luc細胞裸鼠皮下接種后25d,，脫頸處死小鼠,，取腫大的瘤組織,，制成石蠟切片，切片厚度為3μm,。

    可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達,。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點：①非放射性；②比CAT及其他報告基因速度快,；③比CAT靈敏100倍,；④熒光素酶在哺乳細胞中的半衰期為3小時,，在植物中的半衰期為3．5小時,。由于半衰期短，故啟動子的改變會即時導(dǎo)致熒光素酶活性的改變,，而熒光素酶不會積累,。相反，CAT在哺乳細胞中的半衰期為50小時,。熒光素酶濃度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范圍內(nèi),，熒光信號強度與酶濃度成正比。在理想條件下,，可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶,。檢測步驟：1．用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測啟動子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。2．設(shè)計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段,，將此片段插入到熒光素酶報告基因質(zhì)粒（pGL3-basic）中,。3．篩選陽性克隆，測序,。擴增克隆并提純質(zhì)粒備用,。4．?dāng)U增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒，提純備用,。同時準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對照,，提純備用。5．培養(yǎng)293（或其它目的細胞）,，并接種于24孔板中,，生長10-24小時（80%匯合度）。6．將報告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細胞,。7．提取蛋白并用于熒光素酶檢測,。8．加入底物，測定熒光素酶的活性,。9．計算相對熒光強度,，并與空載對照比較。D-熒光素鉀鹽檢測是個人合作嗎,？

    或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析,。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射,。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期,。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3）如果要進行ATP的檢測,，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,，在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水,。做D-熒光素鉀鹽測試真的靠譜嗎？徐州游離酸D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期

D-熒光素鉀鹽測試怎么樣,？鎮(zhèn)江螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽試劑

創(chuàng)始于2020-11-16,，現(xiàn)在坐落于仙林街道緯地路9號江蘇生命科技園F7棟301-3室，一直致力于商務(wù)服務(wù)行業(yè)產(chǎn)品及服務(wù)研究與提升是一家其他型公司,。是一家主要經(jīng)營外泌體提取,，非編碼RNA試劑，檢測試劑,，轉(zhuǎn)染試劑的企業(yè),。公司連續(xù)多年被評為信譽企業(yè)，通過誠信經(jīng)營,，和多家企業(yè)有親密合作關(guān)系,。經(jīng)多年潛心發(fā)展,，公司全體工作人員始終報以腳踏實地，攻堅克難,，為能幫助更多外泌體提取,，非編碼RNA試劑，檢測試劑,，轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品用戶不懈努力,，公司員工的內(nèi)心時時刻刻心系客戶。我司外泌體提取,，非編碼RNA試劑,，檢測試劑，轉(zhuǎn)染試劑支持線上指導(dǎo)及售后,，擁有完整成熟的服務(wù)體系,。有需求的客戶歡迎通過上訴聯(lián)系方式詳聊,，洽談,，期待合作，祝君諸事順利,，身體健康,。鎮(zhèn)江螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽試劑

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