HE染色常見問題：Q3：細(xì)胞核染色過淺,，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過短，或蘇木素過度氧化失效,，或分化時間太長,。對策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉,、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,，每個3-5min即可,，接著重新染色?？梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來水沖洗5-10min染色,，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,，自來水沖洗10min染色。Q4：細(xì)胞核染色過深,，胞漿著藍(lán)色答：切片在蘇木素染液中停留過長,；或切片太厚；或分化時間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),，要么重新染色，要么重新制片,。南京英瀚斯,，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。HE染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)結(jié)果分析,。青海值得信賴的HE染色

HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法,。切片質(zhì)量的好壞,，可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性。因此,，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,，是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,，固定狀態(tài)良好后,，嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測SOP程序進(jìn)行修剪、脫水,、包埋,、切片、染色,、封片***鏡檢合格的樣片,。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片，在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,，對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血、出血,、水腫,、變性、壞死,、增生,、纖維化、機(jī)化,、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述,，并反映出片子之間的差異,。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識。湖北結(jié)果客觀的HE染色外包骨組織HE染色的操作流程,。

HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,，它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中,，染色液的酸堿度為pH6左右,，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,，這些物質(zhì)稱為嗜堿性,。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,，這些物質(zhì)稱為嗜酸型,。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性,；pH值降低時,，原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴Ｋ哉f染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng),。

HE染色原理1,、細(xì)胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。2,、細(xì)胞漿染色的原理：伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,，在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),，為兩性化合物,，細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)（4.7—5.0）以下時，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,，則細(xì)胞漿帶正電荷,，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色,。常規(guī)HE染色和特殊染色服務(wù),。

HE染色不管怎么操作，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因?yàn)榻M織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸,。補(bǔ)救：防患于未然,，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸,。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定,；對于已經(jīng)制出的片子，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,，然后自來水漂洗5min,，可改善染色,。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中，補(bǔ)充染色媒介,，增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,，單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。HE染色,，南京英瀚斯,，專業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包公司。云南靠譜的HE染色公司

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HE染色常見問題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化,；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液,?；蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液,，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),；或反藍(lán)液體未漂洗干凈,，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久,。對策：檢查伊紅染色液PH,，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟,。青海值得信賴的HE染色