免疫組化的DAB顯色時間如何把握,？

1、DAB顯色時間不是固定的,，主要由顯微鏡下控制顯色時間,，到出現(xiàn)淺棕色本底時即可沖洗,；

2、DAB顯色時間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色,，這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時間過長,，需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時間；

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3、此外,，若很短時間就出現(xiàn)背景很深,，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全，需要延長封閉時間,；

4,、DAB顯色時間很長（如超過十幾分鐘）才出現(xiàn)陽性染色，一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時間過短（比較好一抗4度過夜）,；另一方面就是封閉時間過長,。 病理報告中的免疫組化到底有什么作用?江西大鼠免疫組化怎么選擇

免疫組化的發(fā)展路程？在臨床病理診斷中,，免疫組織化學(IHC)是一種很重要的技術和手段,，從20世紀70年代開始，免疫組化技術就應用于病理診斷,，對于診斷cancer,、cancer分類、判斷預后產(chǎn)生了巨大的影響,，同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認識,，提高了病理診斷與研究水平。但是,，隨著免疫組化的廣泛應用,，發(fā)現(xiàn)免疫組化技術存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術,，必須熟悉各種抗體真陽性反應部位,，實現(xiàn)實驗室間免疫組化標準化，使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用,。如果您有免疫組化相關的實驗,，可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。山西小鼠免疫組化英瀚斯生物,，專業(yè)承接免疫組化等各類病理染色檢測,！

實驗失敗常見問題分析有哪些：

為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性？

答：這種現(xiàn)象主要是由操作不當導致，可能的原因有：1.染色操作不當,，致使染色失?。?.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性,；3.緩沖液中有疊氮化鈉,，抑制了酶的活性；4.復染或脫水劑使用不當?shù)?。建議逐一排查，找到原因后重新進行實驗,。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性,，這是為什么？答：與上一個問題類似,，出現(xiàn)的原因也是試驗操作存在問題,，可能的原因有：1.切片在染色過程中抗體過濃，或者干片了,；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應時間過長,；3.抗體溫育的時間過長等。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深,，這是為什么,？答：以下幾方面會導致切片的背景過深：1.蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血，造成抗體的非特異性反應,；2.內(nèi)源性過氧化酶沒有完全阻斷,，顯色過程中過氧化酶與酶底物反應，造成背景,；3.底物呈色反應時間過長或呈色反應后漂洗不徹底,。

免疫組化結果中的假陰性是指所有抗體標記的切片均呈陰性，無陽性信號,，假陰性結果不是真實的反應,。導致假陰性結果的原因有:(1)抗原修復方法選擇不當，根據(jù)不同的抗原特點采用不同的修復方法,，大多數(shù)抗體要求熱修復,，熱修復又包括高壓修復、微波修復及煮沸熱修復;而對某些細胞內(nèi)抗原和細胞間質(zhì)抗原需要用酶消化,，如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化,，而Vimentin則不用修復;(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結果的假陰性會導致錯診或漏診,，進而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療,。解決這一問題的可通過設立陽性對照，比較兩者染色結果。若陽性對照有表達,，表明試劑和染色體系及實驗步驟均無問題;若陽性對照無表達,，則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題，應逐一查找原因,。免疫組化的樣本保存要求是什么,？

免疫組化臨床應用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類,，初步區(qū)分組織學類型用非特異性抗體，在其基礎上再選用特異性抗體做進一步鑒定,。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,，有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,，這同時也強調(diào)了在cancer診斷中應使用一組抗體而不是單個抗體,。如果您有實驗外包的需求，可以與我們南京英瀚斯生物進行聯(lián)系,，我們也有做免疫組化的服務,！免疫組化相關知識匯總。山西小鼠免疫組化

常見的免疫組化方法有哪些,？江西大鼠免疫組化怎么選擇

臨床應用中,，藥物靶點免疫組化，英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務,，一站式醫(yī)學科研平臺,。免疫組化及分子病理學方法在疾病診斷中只只起輔助醫(yī)療的作用，而藥物病理學是用病理學的方法確定藥物醫(yī)療的靶點,、評價藥物醫(yī)療的療效,、預測藥物醫(yī)療的反應，因此藥物靶點免疫組化屬“單獨的診斷”,。因此對于對照的設置,、質(zhì)量的控制均需要更高的要求，如對試劑的要求,，不同于一般的診斷試劑,，應按對藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫(yī)生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫(yī)療的依據(jù),。江西大鼠免疫組化怎么選擇

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