通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低],。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%,。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源,。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數(shù)的重要性,。輔助生殖技術(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質量與各參數(shù)間的關系的比較成為可能,;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。精子分析儀參數(shù),,平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率,。香港前向運動精子分析DCL
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜偷妮d玻片,,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,,掃描速度每秒60幀,。**的軟件升級。IVOS能提供:精確,、客觀,、具有重復性的結果。高速分析,,在60Hz下半秒掃描30幀,,為實驗室節(jié)省成本。[1]主要功能IVOS自動精子活動,、濃度,、形態(tài)分析系統(tǒng)。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床,、研究實驗室,、動物繁殖基地,、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領域,,成為了精液分析業(yè)的金標準,。可以應用于包括人類,、公牛,、馬、野豬,、狗,、兔子,、老鼠,、綿羊、山羊,、魚以及各種瀕危動物,。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。美國兔子精子分析重復性高精子分析儀因其高效,、J準的特點,,已經(jīng)在眾多醫(yī)療機構中廣泛應用,深受患者信賴,。
精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號,、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格培訓,,了解工作原理,、操作規(guī)程、校正方法等,,使用前必須仔細閱讀說明書,。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟[1]:開機接通電源,打開計算機輔助**分析系統(tǒng),。1.輸入患者信息及**理學檢查結果,。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中,,置顯微鏡操作平臺上,,點擊“活動顯示”菜單,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,,顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像,。3.分析點擊“計算分析”菜單,系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài),,圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析,。4.打印報告分析結束后,,可根據(jù)需要打印出分析結果。
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估,。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學,、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù),、標準差和中位數(shù),,以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。與人工操作相比,,自動化系統(tǒng)更具客觀性,,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],,這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術人員的手工評估,。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6],。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結合的,、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系,。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值,;高于臨界值,,妊娠率也不會進一步增加[7]。精子分析儀節(jié)省時間,,提高實驗室的工作效率,,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實驗分析結果。
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法,。這一部分包括了非常專業(yè)化的,、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為,,氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素,;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗,、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論,。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分,強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求,,增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容,。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析,,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,,手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內(nèi)容,。在男科和輔助生殖技術領域,精子質量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié),。北京前向運動精子分析ALH
CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運動狀態(tài)的參數(shù),,這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。香港前向運動精子分析DCL
**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測方法,。目前我國醫(yī)學實驗室普遍使用人工方法進行分析,,結果缺少準確性、客觀性和可比性,。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標準方法,,但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對精子的活率和活力的分級主要依賴檢驗者的經(jīng)驗和主觀判斷,,不同的技術人員分析的結果有時相差甚遠,,對精子運動能力的判斷缺少嚴格的量化指標,。因此應用一種統(tǒng)一,、標準和快速的檢測方法替代人工方法十分必要。計算機計算機輔助**分析系統(tǒng)在**質量檢測中的應用49中國衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析(Computer-aidedSpermAnalysis,CASA)系統(tǒng)逐步取代了人工操作,,在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術彌補了人工方法進行**分析的不足,。香港前向運動精子分析DCL