鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,,包括以下步驟:(1)將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用,;(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目,;(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,,期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,得到膠原溶脹液,;(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,,鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50:I?100:1,在4°C,,48?74小時(shí)酶解,,期間間歇性攪拌。將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡,。廈門鼠尾膠原直銷廠家鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I,、無菌10...
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Wes...
詳細(xì)步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開,、去掉皮毛,,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵,;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,,0.1%消過毒的醋酸中,4℃放置,,并不時(shí)振蕩,;4.48h后取上清,4000轉(zhuǎn)離心30min后,,取上清,;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存。有時(shí)可繼續(xù)向4,。中沉淀中加入10-20ml醋酸,,重復(fù)以上步驟,以制備更多的鼠尾膠,。在使用時(shí),,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿:1)用吸管吸取膠原液,,在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液,。2)若包被的是培養(yǎng)瓶,可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻,。讓...
生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌,、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu),。使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。濟(jì)南鼠尾膠原廠家推薦鼠尾膠原膠凝程序:膠原蛋白I按以下步驟使其...
膠原蛋白的功效與作用:可以預(yù)防心血管病。研究表明,,膠原蛋白可以降低血甘油三酯和膽固醇,,并可增高體內(nèi)某些缺乏的必需微量元素,從而使其維持在一個(gè)相對正常的范圍之內(nèi),,是一種理想的降血脂食品,。此外,膠原蛋白在協(xié)助機(jī)體排出鋁質(zhì),,減少鋁質(zhì)在體內(nèi)聚集方面也有獨(dú)特之處,。鋁對人體有害,研究表明,,日前逐漸增多的老年癡呆癥與鋁的攝入量有關(guān),,同時(shí)膠原蛋白有加速血紅蛋白和紅細(xì)胞生成的功效,它具有改善循環(huán),、對,、缺血性腦病有利。制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作),。杭州鼠尾膠原單價(jià)鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,其特征在于,包括以下步驟:(1)將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,,真空冷凍干燥備...
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,,另一條帶的相對分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中,。礦化2、6d后,,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察,。堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉,、碳酸鈉等...
三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,,pH7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中...
膠原蛋白的提取方法:酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料,,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹,、溶解,。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸,、磷酸,、硫酸、醋酸,、檸檬酸和甲酸等,。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu),。此法處理快速,,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,,但產(chǎn)品得率低,,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,污染重,。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,,得到高純度的膠原蛋白溶液。制備鼠尾膠原:搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置一星期。杭州鼠尾膠原生產(chǎn)廠家生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法...
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Wes...
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),,應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開,;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動頻率是相同的,;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的...
膠原蛋白的功效與作用:1,、可以作為一種補(bǔ)鈣食品。膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的運(yùn)載工具,,骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的黏合劑,,它與羥摹磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。因此,,只要攝入足夠的膠原蛋白,,就能保證正常機(jī)體鈣質(zhì)的攝入量,膠原蛋白可成制成補(bǔ)鈣的保健食品,。2,、可以為特殊人群使用。婦科疾病的根源來自于內(nèi)分泌失調(diào),,膠原蛋白能夠改善婦科疾病的困擾,,而更年期的婦女更需要膠原蛋白供給身體所需,使得更年期婦女能夠更輕松面對各種不適,。前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,,易于封接和長時(shí)間(約8h)的觀察和記錄。無錫濟(jì)南鼠尾膠原鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1.主要材料,、試劑和儀器鼠尾,、鹽酸、等滲氯化...
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。天津鼠尾膠原生產(chǎn)廠家鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液...
鼠尾膠原簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2,、無菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性。3,、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,,貼壁及生長正常。4,、本品濃度1mg/mL,,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠...
鼠尾膠原:1實(shí)驗(yàn)制備:實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀、鑷子,、止血鉗,、彎頭吸管、平皿,、三角燒瓶,、燒杯、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1、制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作),。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。實(shí)驗(yàn)步驟:制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2,、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱,;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡,;4,、重復(fù)步驟2、3,,直至尾腱量夠用,;5、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克),。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。南京正規(guī)鼠尾...
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:將尾巴從動物身體切除后,,會冷凍起來,,并提取尾巴里的筋腱。然后,,將筋腱切成小塊,,并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法,,能將膠原蛋白從動物材料中分離出來,。在食品加工領(lǐng)域,鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。它還可以當(dāng)作酸奶,,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,,它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地,。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好,。此外,,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康,。鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。南京鼠尾膠原價(jià)格鼠尾膠原簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenf...
服用膠原蛋白的注意事項(xiàng):1、大分子膠原蛋白進(jìn)入人體后需要降解為小分子肽,、氨基酸才能被人體吸收,,真正有效吸收的成分并不多。2,、這些食物多半脂肪含量較高,,不適合經(jīng)常食用。高熱量,、高脂肪,,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,加速老化,。如果能少吃這一類食物,,就等于減少了身體被自由基傷害的機(jī)會及皮膚出現(xiàn)黑斑、皺紋等的風(fēng)險(xiǎn),。3,、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,,容易引起第二特征過早的發(fā)育和成熟,不利于出生后的嬰兒成長和發(fā)育,。制備鼠尾膠原:將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡。北京正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)...
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,為鼠尾膠原蛋白、聚乙烯醇,、殼聚糖,、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?-10%0.2-5%0.2-2%,,余量為水,。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?%2%1%,,余量的水。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。南昌鼠尾膠原哪里買鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌,、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))...
鼠尾膠原:1實(shí)驗(yàn)制備:實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作),。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。實(shí)驗(yàn)步驟:制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2,、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱,;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡,;4,、重復(fù)步驟2、3,,直至尾腱量夠用,;5、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克),。鼠尾型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料...
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率,。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的,。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體...
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,,包括以下步驟:(1)將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用,;(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目,;(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,,得到膠原溶脹液;(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,,鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50:I?100:1,,在4°C,48?74小時(shí)酶解,,期間間歇性攪拌,。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,。武漢正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:探討...
鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,臨床上常用的有人工骨移植,、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,人工骨材料多為磷酸三鈣,、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機(jī)礦物材料[1-2],,由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織,。但是,,自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織,數(shù)量有限,,難以滿足臨床需要。因此,,研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,,成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,,在分子結(jié)構(gòu)上,,羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,,...
含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻,。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測試),。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。手持尾巴,,用止血...
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I,、無菌10×PBS、無菌蒸餾水,、無菌1MNaOH,。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4....
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,,0.1mol/L乙酸(一般不用),,雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))...
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法,。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備,。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機(jī)體過敏,、止血效果差等缺點(diǎn),,本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好,;止血效果快,,具有很強(qiáng)的親水性;同時(shí)可啟動血小板的凝聚,,一旦血小板凝聚,,就可形成血栓,,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時(shí),,膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,,可以起到防止腸粘連的功效。I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體,。...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,,之前多從牛皮、豬皮,、牛腱中提取,,但這類膠原蛋白不光有油脂等其他雜質(zhì),也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型,;同時(shí),,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染,如果用此開發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險(xiǎn)及危害,;再次,,人的真皮中主要含有I型和III型,但I(xiàn)II型不易大量獲得,,故應(yīng)用單一的I型膠原蛋白是解決體外應(yīng)用的醫(yī)用產(chǎn)品引起的抗原性問題的關(guān)鍵,,這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一。同時(shí),,I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結(jié)構(gòu)決定了它的一些特有的性能,,如機(jī)械性能、促進(jìn)細(xì)胞生長...
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉,。鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。寧波鼠尾膠原單價(jià)鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解...
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,,另一條帶的相對分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2,、6d后,,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。鼠尾膠原醋酸溶解:在2-8度中放置過夜,。青島正規(guī)鼠尾膠...