絕大多數(shù)原核生物向?qū)NA(gRNA)參與錐體蟲(chóng)線粒體mRNA的編輯,。某些真核生物類病毒更小的***性致病因子,。植物端聚酶RNA作為端聚酶的模板,,有助于端粒DNA的完整,。真核生物核開(kāi)關(guān)或RNA開(kāi)關(guān)(riboswitch)在轉(zhuǎn)錄或翻譯水平上調(diào)節(jié)基因的...
這些基因并不能告訴你它們能做什么,所以如果你能中止它們,,你就可以開(kāi)始了解它們能做什么,。不過(guò),**初發(fā)現(xiàn)RNA現(xiàn)象的是一位華人學(xué)者,,非??上В麤](méi)有進(jìn)一步弄清這是為什么,?!盵5]二人發(fā)現(xiàn)的是一個(gè)有關(guān)控制基因信息流程的關(guān)鍵機(jī)制。人們的基因組通過(guò)從細(xì)胞核...
[2](5)核酶所催化的反應(yīng)都是不可逆的,。[2](6)核酶催化反應(yīng)時(shí)需要Mg2+,,Mg3+既維持核酶的活性構(gòu)象,又參與催化反應(yīng),。[2](7)多數(shù)核酶在細(xì)胞內(nèi)含量極低,。[2]3.核酶意義①核酶的發(fā)現(xiàn)和研究使我們對(duì)RNA的生理功能有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí),即它...
操作過(guò)程要小心,,帶口罩,、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在,,但這并不表示RNA不純,,需電泳檢測(cè)。使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買特定使用提取試劑盒,,如果不是特定使用試劑盒,,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,,會(huì)影響...
②上層容量約為所加TotalRNAExtractionReagent總量的50-60%,。如加入1mLTotalRNAExtractionReagent,上層水相約為500-600μL,。建議吸取400-500μL,以防吸到中間層造成DNA污染,。③有機(jī)相和...
200)5400血液RNA小量提取試劑盒:從小于R6814-00BloodRNAKit(5)170R6814-01BloodRNAKit(50)1620R6814-02BloodRNAKit(200)5760血液總RNA中量提取試劑盒:從小于10ml新...
并上下振蕩數(shù)次混勻,。備注:為了盡量減少污染,,未使用完的細(xì)胞凍存液**好凍回-20℃,反復(fù)凍融不影響使用效果,。2.用細(xì)胞消化液將生長(zhǎng)良好的細(xì)胞消化成單細(xì)胞,,并用細(xì)胞計(jì)數(shù)器或血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度。備注:懸浮細(xì)胞不需要消化但仍需要細(xì)胞計(jì)數(shù),,不易消化成單細(xì)胞...
25)植物RNA大量提取試劑盒:從小于5g新鮮或冷藏的植物組織中提取高達(dá)2mg總RNAR6629-01PlantRNAMaxiKit(5)R6629-02PlantRNAMaxiKit(20)真的菌群RNA小量提取試劑盒:從小于100mg真的菌群組織或...
輕輕吹3-5次混勻,。B.輕輕混勻轉(zhuǎn)染試劑,用50ulOpti-MEM稀釋lipofectamineTM2000,輕輕吹3-5次混勻,,室溫下靜置5min,。C.混合轉(zhuǎn)染試劑和siRNA稀釋液,輕輕吹3-5次混勻,,室溫下靜置20min,。D.轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入到2...
4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,,37℃孵育5-10min,,然后進(jìn)行圖像分析。2.活ti成像分析1)用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,,混勻。2)用μm濾膜過(guò)濾除菌,。立即使用,,或分裝于-20℃避光保...
提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性,。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷,。對(duì)于一些原代細(xì)胞(皮膚細(xì)胞),,除滲透型保護(hù)劑外,還會(huì)適當(dāng)添加表面型保護(hù)劑(海藻糖),,以提高細(xì)胞存活率,。所需材料?超...
產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,,特別是體內(nèi)***成像技術(shù),。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素...
去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗1-2次;去掉培養(yǎng)瓶里的殘余血清,;3,、加入適量胰酶(濃度一般為),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶,,放入培養(yǎng)箱消化,;4、細(xì)胞消化(具體時(shí)間根據(jù)鏡下形態(tài)判斷),,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,細(xì)胞胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間不再連接成片,,此時(shí)加入完全培養(yǎng)基終止消化,;5、...
如果想要達(dá)到這樣的目的,,那么就需要細(xì)胞冷卻液,,這種東西怎樣配置呢?下面就來(lái)具體的了解一下,細(xì)胞凍存液的配方是什么,?(一)細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油,、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,,用PBS清洗,。3.去...
熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠,、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,,可以對(duì)整個(gè)動(dòng)物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析:將不同類型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞,、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表...
可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時(shí)的“輝光型”信號(hào)在大量檢測(cè)板之間提供一致的信號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲(chóng)熒光素酶相比,,海腎...
隨后30年里,,Promega不斷在螢光素酶實(shí)驗(yàn)工具領(lǐng)域推陳出新,保持技術(shù)帶跑的人的地位,。這里提到的螢光素酶即熒光素酶,。1991螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)(LAR)Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3螢光素酶檢測(cè)試劑Lucif...
但是顯然已經(jīng)不能適應(yīng)現(xiàn)今細(xì)胞***的應(yīng)用場(chǎng)景。隨著細(xì)胞***以及細(xì)胞儲(chǔ)存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化,。凍存要求發(fā)生改變,因?yàn)閮龃婕?xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用,,所以凍存液成分由原來(lái)血清變?yōu)闊o(wú)血清,,無(wú)動(dòng)物源成分,凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或...
后者能夠易溶于水或緩沖液中,使用方便,,溶劑無(wú)毒性,,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn),。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒(méi)有實(shí)質(zhì)性的差別。產(chǎn)品性質(zhì)運(yùn)輸和保存運(yùn)輸條件:4℃冰袋運(yùn)輸,;短期保存:4℃干燥避光長(zhǎng)期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期...
常須將培養(yǎng)物進(jìn)行冷凍保存,,并在需要的時(shí)候重新復(fù)蘇和培養(yǎng)。目前,,細(xì)胞凍存**常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,,主要采用加適量保護(hù)局的緩慢冷凍法保存細(xì)胞。無(wú)血清非程序細(xì)胞凍存液,,添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑可防止或延緩細(xì)胞在凍存過(guò)程中的沉降,,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍...
luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示:,,在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),生成氧化熒光素(oxyluciferin),,分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,,并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口,,產(chǎn)品價(jià)格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解、受潮影...
或分裝于-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。4)待圖像分析前,,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,,然后進(jìn)行圖像分析,。2.***成像分析1)用無(wú)菌的DPBS(w...
更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲(chóng),而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲(chóng)中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入,。一...
不同細(xì)胞系請(qǐng)參照附表,。細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1-3x106cells/mL雜交瘤細(xì)胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24小時(shí)后死去。貼壁腫瘤細(xì)胞5-7x106cells/mLHela除外,1~3×...
白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞。有人親測(cè)10%血清凍存細(xì)胞,,結(jié)果證明是可以的,,但高血清比例的凍存液更有助于提高細(xì)胞活力,此外嬌貴的細(xì)胞可以適當(dāng)提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力,。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。...
本發(fā)明的目的在于提供一種細(xì)胞凍存液,,使凍存培養(yǎng)后的細(xì)胞具有成活率高的優(yōu)點(diǎn),,同時(shí)滿足凍存液成分簡(jiǎn)單、成本低等要求,。本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)上述目的,。***方面,本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液,,所述細(xì)胞凍存液的成分如下:將上述組分加入到工業(yè)用水中,,用于...
隨后30年里,Promega不斷在螢光素酶實(shí)驗(yàn)工具領(lǐng)域推陳出新,,保持技術(shù)帶跑的人的地位,。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。1991螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)(LAR)Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3螢光素酶檢測(cè)試劑Lucif...
去除舊培養(yǎng)液,,用PBS清洗1-2次,;去掉培養(yǎng)瓶里的殘余血清;3,、加入適量胰酶(濃度一般為),,使胰酶覆蓋整個(gè)瓶,放入培養(yǎng)箱消化,;4,、細(xì)胞消化(具體時(shí)間根據(jù)鏡下形態(tài)判斷),顯微鏡下觀察細(xì)胞,,細(xì)胞胞質(zhì)回縮,,細(xì)胞間不再連接成片,此時(shí)加入完全培養(yǎng)基終止消化,;5,、...
凍存成功的兩大必要條件細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)按照標(biāo)準(zhǔn)凍存程序操作為什凍存細(xì)胞需要加入保護(hù)劑在不附加任何保護(hù)劑下直接凍存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷,、電解質(zhì)升高、滲透壓改變,、脫水,、PH改變,、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡,。如向培...
在細(xì)胞體外培養(yǎng)工作中,,為了達(dá)到長(zhǎng)期保存細(xì)胞的生物活性的目的,須將細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存,,并在實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng),。目前,細(xì)胞凍存**常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,,主要采用添加適量保護(hù)劑使細(xì)胞緩慢降溫至指定溫度范圍,,從而到達(dá)保護(hù)細(xì)胞的目的,。EKBIO...