探針DNA克隆的篩選也可采用血清學(xué)方法,,所不同的是所建DNA文庫(kù)為可表達(dá)性,克隆菌落或噬斑經(jīng)裂解后釋放出表達(dá)抗原,,然后用來(lái)源細(xì)菌的多克隆抗血清篩選陽(yáng)性克隆,,所得到多個(gè)陽(yáng)性克隆再經(jīng)其它細(xì)菌的抗血清篩選,,***只與本細(xì)菌抗血清反應(yīng)的表達(dá)克隆即含有此細(xì)菌的特異性基因片段,,它所編碼的蛋白是該菌種所特有的。用這種表達(dá)文庫(kù)篩選得到的顯然只是特定基因探針,。對(duì)于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑,。這也是許多重要蛋白質(zhì)的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質(zhì),,然后測(cè)定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列,,然后根據(jù)這一序列合成一套寡核苷酸探針。除H,、He,、Li、Be等幾個(gè)較輕元素外,,還有U元素以后的元素...
DNA探針是**常用的核酸探針,,指長(zhǎng)度在幾百堿基對(duì)以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針。現(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多,,有細(xì)菌,、病毒,、原蟲(chóng)、***,、動(dòng)物和人類細(xì)胞DNA探針,。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列,。這些DNA片段須是特異的,,如細(xì)菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,。以細(xì)菌為例,分子雜交技術(shù)用于細(xì)菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準(zhǔn)確的多,,是細(xì)菌分類學(xué)的一個(gè)發(fā)展方向,。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景,。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),,X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。松江區(qū)質(zhì)量探...
用此探針在DNA文庫(kù)中篩選,,陽(yáng)性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因,。值得一提的是真核細(xì)胞和原核細(xì)胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列,,而原核則沒(méi)有,。因此,真核基因組DNA探針用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)雜交效率要明顯低于cDNA探針,。DNA探針(包括cDNA探針)的主要優(yōu)點(diǎn)有下面三點(diǎn):①這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中,,可以無(wú)限繁殖,取之不盡,,制備方法簡(jiǎn)便,。②DNA探針不易降解(相對(duì)RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性,。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟,,有多種方法可供選擇,如缺口平移,,隨機(jī)引物法,,PCR標(biāo)記法等,能用于同位素和非同位素標(biāo)記,。電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,,不同的元素有不同的X射線...
值得一提的是,通過(guò)改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,,可以控制RNA的轉(zhuǎn)錄方向,,即以哪條DNA鏈以模板轉(zhuǎn)錄RNA,。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補(bǔ)),反義RNA又稱cRNA,,除可用于反義核酸研究外,,還可用于檢測(cè)mRNA的表達(dá)水平。在這種情況下,,因?yàn)樘结樅桶行蛄芯鶠閱捂?,所以雜交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。RNA探針除可用于檢測(cè)DNA和mRNA外,,還有一個(gè)重要用途,,在研究基因表達(dá)時(shí),常常需要觀察該基因的轉(zhuǎn)錄狀況,。電子探針可以對(duì)試樣中微小區(qū)域(微米級(jí))的化學(xué)組成進(jìn)行定性或定量分析,。寶山區(qū)品牌探針售價(jià)(3)X射線強(qiáng)度測(cè)量系統(tǒng)。特...
是將探針卡上的探針直接與芯片上的焊墊或凸塊直接接觸,,引出芯片訊號(hào),,再配合周邊測(cè)試儀器與軟件控制達(dá)到自動(dòng)化量測(cè)的目的。探針卡應(yīng)用在IC尚未封裝前,,針對(duì)裸晶系以探針做功能測(cè)試,,篩選出不良品、再進(jìn)行之后的封裝工程,。因此,,探針卡是IC制造中對(duì)制造成本影響相當(dāng)大的重要制程之一。用戶危害2019年央視3·15晚會(huì)曝光了一種WiFi探針盒子,,這種盒子能在用戶毫不知情的情況下,,獲取用戶手機(jī)MAC地址,并將其轉(zhuǎn)換成用戶手機(jī)號(hào),。將近半年過(guò)去了,,北京青年報(bào)記者調(diào)查發(fā)現(xiàn),仍有一些商家在網(wǎng)絡(luò)商城中售賣此類WiFi探針盒子,,并均表示此類盒子可以采集周邊用戶的手機(jī)號(hào)碼,,用于“精細(xì)營(yíng)銷”。 [2]能兼作透射電鏡,、能進(jìn)行電子衍...
電子探針?lè)治鍪侵敢跃劢沟母咚匐娮觼?lái)激發(fā)出試樣表面組成元素的特征X射線,,對(duì)微區(qū)成分進(jìn)行定性或定量分析的一種材料物理試驗(yàn),又稱電子探針X射線顯微分析,。電子探針?lè)治龅脑硎牵阂詣?dòng)能為10~30千電子伏的細(xì)聚焦電子束轟擊試樣表面,,擊出表面組成元素的原子內(nèi)層電子,使原子電離,,此時(shí)外層電子迅速填補(bǔ)空位而釋放能量,,從而產(chǎn)生特征X射線,。電子探針的功能主要是進(jìn)行微區(qū)成分分析。它是在電子光學(xué)和X射線光譜學(xué)原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種高效率分析儀器,。其原理是用細(xì)聚焦電子束入射樣品表面,,激發(fā)出樣品元素的特征x射線,分析特征X射線的波長(zhǎng)(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(定性分析),,分析X射線的強(qiáng)度,,則可知道樣品...
缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法,反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I(DNase I),、大腸桿菌DNA聚合酶I(DNA polymerase I),、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸(如dATP,、dTTP,、dCTP,”P(pán)—dGTP),,其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機(jī)切開(kāi)若干個(gè)缺口(不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?,然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性,,切去5’末端的核苷酸;同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚合酶活性,,使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口.DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用,,使缺口不斷向3’的方向移動(dòng),DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)...
DNA探針是**常用的核酸探針,,指長(zhǎng)度在幾百堿基對(duì)以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針?,F(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多,有細(xì)菌,、病毒,、原蟲(chóng)、***,、動(dòng)物和人類細(xì)胞DNA探針,。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列,。這些DNA片段須是特異的,,如細(xì)菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,。以細(xì)菌為例,,分子雜交技術(shù)用于細(xì)菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準(zhǔn)確的多,是細(xì)菌分類學(xué)的一個(gè)發(fā)展方向,。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性,,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景,。不隨意安裝非正規(guī)商家應(yīng)用App、及各類廣告插件App,使用正規(guī)合法App是保護(hù)個(gè)人...
電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀,、X射線顯微分析儀,。其原理是利用聚焦的高能電子束轟擊固體表面,使被轟擊的元素激發(fā)出特征X射線,,按其波長(zhǎng)及強(qiáng)度對(duì)固體表面微區(qū)進(jìn)行定性及定量化學(xué)分析,。主要用來(lái)分析固體物質(zhì)表面的細(xì)小顆粒或微小區(qū)域,,**小范圍直徑為1μm左右,。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。***感量可達(dá)10-14至10-15g,。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合裝置,,可在觀察微區(qū)形貌的同時(shí)逐點(diǎn)分析試樣的化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)。廣泛應(yīng)用于地質(zhì),、冶金材料,、水泥熟料研究等部門(mén)。如圖《電子探針示意圖》所示,。計(jì)算時(shí)應(yīng)用布拉格方程:nλ=2dsinθ,。上海優(yōu)勢(shì)探針按需定制***臺(tái)電子探針是法國(guó)制成的,是在19...
在不損耗試樣的情況下,,電子探針通常能分析直徑和深度不小于1微米范圍內(nèi),、原子序數(shù)4以上的所有元素;但是對(duì)原子序數(shù)小于12的元素,,其靈敏度較差,。常規(guī)分析的典型檢測(cè)相對(duì)靈敏度為萬(wàn)分之一,在有些情況下可達(dá)十萬(wàn)分之一,。檢測(cè)的***靈敏度因元素而異,,一般為10-14~10-16克。用這種方法可以方便地進(jìn)行點(diǎn),、線,、面上的元素分析,并獲得元素分布的圖象,。對(duì)原子序數(shù)高于10,、濃度高于10%的元素,定量分析的相對(duì)精度優(yōu)于±2%,。電子探針儀是 X射線光譜學(xué)與電子光學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的,。1948年法國(guó)的R.卡斯坦制造了***臺(tái)電子探針儀。1958年法國(guó)首先制造出商品儀器,。電子探針儀與掃描電子顯微鏡在結(jié)構(gòu)上有許多共同處...
探針的標(biāo)記也可以采用隨機(jī)引物法,,即向變性的探針溶液加入6個(gè)核苷酸的隨機(jī)DNA小片段,,作為引物,當(dāng)后者與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合后,,按堿基互補(bǔ)原則不斷在其3’OH端添加同位素標(biāo)記的單核苷酸,,這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,,人工合成的帶有放射性或生物素標(biāo)記的單鏈DNA片段,,可用來(lái)快速檢測(cè)病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素,、生物素或熒光染料等標(biāo)記后制成的探針,。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合,,經(jīng)放射自顯影或其他檢測(cè)手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在,。掃描電子探針儀是美國(guó)于1960年制成,不僅能對(duì)試...