外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）,。超離法是常用的外泌體純化手段,，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示）,，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑,；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量,。2,、密度梯度離心。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時(shí),。來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。無錫外泌體提取試劑直銷價(jià)

外泌體的提取,、分離方法：免疫親和層析法,。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,，主要用于生物大分子的分離,、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,，如TSG101或四跨膜蛋白,。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別,，這使得提取的外泌體純度高,，但是產(chǎn)量低。Zarovni等分別用超速離心,、密度梯度離心和免疫層析法,，從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白，結(jié)果表明,，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix,、CD9、CD63),，同時(shí),，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。溫州正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家外泌體的提取有超速離心,、試劑盒,、超濾法、蔗糖密度梯度離心等,，然而各種方法均有其利弊,。

CD47是信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα，也稱為CD172a）的配體,，CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號(hào),，從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,，增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體,。合成納米顆粒對(duì)細(xì)胞有一定毒性作用，但使用外泌體能夠較小化對(duì)細(xì)胞的毒性,。研究人員發(fā)現(xiàn),，CD47和病基因KRAS驅(qū)動(dòng)的胞飲作用都會(huì)壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理，并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對(duì)外泌體的特異性,。所以,，外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力，并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期。

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的菌類大小的顆粒,。它們天然地存在于血液中,。根據(jù)來自美國德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項(xiàng)新的研究，對(duì)外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法,。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員RaghuKalluri博士,。在這項(xiàng)新的研究中,，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解，增加它們的總存活率,。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運(yùn)送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因,，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,，這是因?yàn)檫@些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中,。外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液,、唾液、尿液,、腦脊液和乳汁中,。

研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成，并初步闡明其分子機(jī)制,。研究加深了對(duì)瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認(rèn)識(shí),，為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ)。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對(duì)象,，從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體,，并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部，并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進(jìn)行對(duì)照,。研究發(fā)現(xiàn),，瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),，瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)壓制血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體(VEGFR2)的表達(dá)從而阻斷血管生成的信號(hào)通路,。這些發(fā)現(xiàn)加深了人們對(duì)瘧原蟲抗病機(jī)理的理解，并為瘧原蟲療法治病一些疾病的臨床研究提供進(jìn)一步的理論依據(jù),。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,，使外泌體懸浮于液體上層。南昌外泌體提取試劑供應(yīng)商

目前人們多采用超速離心、免疫磁珠,、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離。無錫外泌體提取試劑直銷價(jià)

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清,，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,；樣本輸入量多樣；無需耗時(shí)的超速離心,，過濾或特殊注射器,；無需沉淀試劑，也無需過夜培養(yǎng),；無需蛋白酶處理,；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白,；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中,，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān),。無錫外泌體提取試劑直銷價(jià)