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外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高,、操作難度大,。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿、尿液及其他體液(腦脊液,、腹水,、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,,并搭配純化過濾裝置,,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng):1.對于待測樣品粘度過大時(shí),,可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理,。2.當(dāng)血清、血漿,、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時(shí),可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過EPF柱離心,。外泌體提?。好庖叻蛛x技術(shù)。天津外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹
作為一種分子通斷開關(guān)的KRAS發(fā)生突變時(shí)會處于“開啟”狀態(tài),。在80%~95%的胰腺導(dǎo)管腺?。≒DAC)當(dāng)中,這個(gè)基因發(fā)生突變,,這也是這種一些疾病中較為常見的突變,。這些研究人員證實(shí)iExosome能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子,并且比他們的合成對應(yīng)物脂質(zhì)體(liposome)更加高效,。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢,。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說,“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比,,外泌體表現(xiàn)出運(yùn)送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優(yōu)異能力,。我們也證實(shí)外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環(huán)單核細(xì)胞的吞噬作用。徐州正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家外泌體的提取分離:PEG-base沉淀法,。
外泌體的提取,、分離方法:聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,,近幾年,,將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前,市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,,較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,,該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,但是價(jià)格昂貴,。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,,之后再低速離心。
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原提呈,、細(xì)胞遷移,、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲,。一些病癥,。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖,、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo),。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,以明顯降低RAS活化,、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過程,。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管,。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈硬化,。分子標(biāo)記。疾病診斷,。在酒精性肝病,、NASH、菌類性肝炎,、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,,隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,提取效率和純化效果逐漸提高。
外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,,通過分析外泌體的組分,,可以幫助識別其來源的細(xì)胞類型。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測試。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,,使外泌體懸浮于液體上層,。以提取尿液中的外泌體為例,每次至少需要200毫升的尿液量,。上海正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)
由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,,大于一般蛋白質(zhì)。天津外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹
外泌體(exosomes)是活細(xì)胞經(jīng)過"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過程而形成的膜性囊泡,,來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體),,直徑約為30-150nm,密度在1.13-1.21g/ml,,天然存在于血液,、唾液、尿液及母乳等體液中,,同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,人體中大約有1014個(gè)外泌體,,大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。外泌體中含有核酸(DNA、miRNA,、lncRNA,、mRNA、tRF等),、蛋白和脂類,,在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,研究表明其在干細(xì)胞,、免疫調(diào)控,、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用天津外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹
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