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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-07-27

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體,、霉菌,、色素、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等,。過(guò)碘酸(又稱(chēng)高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類(lèi)及有關(guān)物質(zhì)中的1,,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟。多糖主要指糖原,,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞,、骨骼肌、心肌等處,。上海提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

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糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,,打開(kāi)應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團(tuán)或沒(méi)有氣味,,則不能用,配制時(shí)使用的容器,、藥勺,、稱(chēng)藥天平與稱(chēng)藥紙等必須潔凈、無(wú)污染,。新配制好的Schiff劑為無(wú)色透明液體[1],,配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可,。沈洪武等通過(guò)對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),,冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),,環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),,使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間,。江蘇提供糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹擁有千錘百煉的專(zhuān)業(yè)人才隊(duì)伍,保證實(shí)驗(yàn)快速,、有效的完成,。

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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過(guò)碘酸水溶液5分鐘,?;?%過(guò)碘酸95%酒精溶液(過(guò)碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘,。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水,、透明,、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,,細(xì)胞核呈藍(lán)色,。試劑配制:(1)0.5%過(guò)碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過(guò)濾,,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉,。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,,然后加入少量活性碳并震蕩,、過(guò)濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無(wú)色,。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差,。

糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1,、糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮,。2,、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,,因無(wú)水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端),。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是,。4,、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色,,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠(chǎng)家,但不同批號(hào),,其效果就可能不同,,應(yīng)特別引起注意過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,,氧化時(shí)的溫度以18~22℃佳。

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糖原D-PAS染色液:使用方法:1,、兩張相同切片,,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水,。2,、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理,,入水中1h作為對(duì)照,。3、流水沖洗兩張切片各5~10min,。4,、入過(guò)碘酸溶液,室溫放置5~8min,,一般不宜超過(guò)10min,。5、自來(lái)水沖洗1次,,再用蒸餾水浸洗2次,。6、入SchiffReagent,,置于室溫陰暗處浸染10~20min,。7、自來(lái)水沖洗10min,。8,、入Mayer蘇木素染色液,染細(xì)胞核1~2min,。9,、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s。10,、自來(lái)水沖洗10~15min,,更換蒸餾水清洗使其返藍(lán)。11,、二甲苯透明,,中性樹(shù)膠封固。糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷,。湖南提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,,防止進(jìn)一步的損傷。上海提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng),,有時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,,陽(yáng)性反應(yīng)的程度也很強(qiáng)。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽(yáng)性反應(yīng),。②缺鐵性貧血,、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱(chēng)地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng),有時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高,。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽(yáng)性反應(yīng),。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血,、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時(shí)個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)上海提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)