凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí),，必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明,，以便獲得較佳結(jié)果,。在細(xì)胞處于生長(zhǎng)期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代盡可能靠前,。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%,。請(qǐng)注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,，使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基,。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑無(wú)血清細(xì)胞凍存液：一些保護(hù)劑,，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,。成都無(wú)血清細(xì)胞凍存液

使用方法：1)細(xì)胞超凈臺(tái)無(wú)菌環(huán)境,，1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞，細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml,，混懸液體積為200μl,。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷，逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl,，細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫,，降溫速率為1℃/min,，較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對(duì)比,，具體結(jié)果如附圖1所示,，可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率。其他實(shí)施例通過(guò)與比較例1進(jìn)行比較,，也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果,。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率，同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定,、以及避免由血清中的支原體,，細(xì)菌,，朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。青島正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家無(wú)血清細(xì)胞凍存液：凍存細(xì)胞,，無(wú)需程序降溫,。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢：很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO,。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘,，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜保存也可以）,，較后再液氮的環(huán)境中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存,。需要注意在-20℃的環(huán)境下保存不可超過(guò)1個(gè)小時(shí)，主要用以防止冰晶產(chǎn)生過(guò)大,，造成細(xì)胞大量的死亡,。對(duì)于無(wú)血清的細(xì)胞凍存液來(lái)說(shuō)，其所含有的成分是：不含血清,，含DMSO,、pH調(diào)節(jié)劑、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分等,。其中不含有動(dòng)物來(lái)源性的蛋白,，所以能夠減少各類的細(xì)菌、霉菌,、支原體等帶來(lái)的污染,，而且可以確保凍存細(xì)胞的安全。比較通用于各種動(dòng)物的細(xì)胞株,。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介我們經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)研究與反復(fù)驗(yàn)證,，研發(fā)出一系列新型細(xì)胞凍存產(chǎn)品，能有效地提高常規(guī)細(xì)胞,、原代細(xì)胞與干細(xì)胞的復(fù)蘇后存活率與活力,。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，使用方便,，助力科研工作者擺脫程序繁瑣,、操作復(fù)雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法,，專注于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究,。LiveCyteTM（LC-1601）是即用型細(xì)胞凍存液，所含化學(xué)成分明確,，無(wú)動(dòng)物源性成分,，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存并長(zhǎng)期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞,。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液,，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。1000 rmp離心5分鐘,，去除離心管中的上清液,，收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞凍存的操作步驟：1.配制含10%DMSO或甘油,、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液,；2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液,，用PBS清洗,。3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái),；4.離心1000rpm,，5min；5.去除胰蛋白酶,，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,，計(jì)數(shù),，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml～1×107/ml；6.將細(xì)胞分裝入凍存管中,，每管1～1.5ml,；7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者,；8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/min,；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min,；到-100℃時(shí),，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜,，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi),。凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱，穩(wěn)定保存數(shù)年,。上海正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)

無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法：將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中,。成都無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)血清細(xì)胞凍存液與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液比較及優(yōu)勢(shì)：1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液只適用于含血清細(xì)胞的凍存，但并不適用于無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞,，例如一些CIK細(xì)胞等,，而無(wú)血清細(xì)胞凍存液即適用于含血清細(xì)胞的凍存,，又適用于無(wú)血清細(xì)胞的凍存，是一種通用型細(xì)胞凍存液,，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株,；2.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含10%胎牛血清，因血清是動(dòng)物源性成份,，因此病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn)很高，而無(wú)血清細(xì)胞凍存液因不含血清,，只含DMSO,、葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)成份，較大降低了動(dòng)物血清來(lái)源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn),，確保凍存細(xì)胞的安全；3.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含血清,，但動(dòng)物血清成分復(fù)雜,，個(gè)體差異大，且生產(chǎn)來(lái)源不穩(wěn)定,，因此批次間質(zhì)量常常不穩(wěn)定,，這導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)也會(huì)受到影響，而無(wú)血清細(xì)胞凍存液成分和配比明確,，批次間差異很小,，能夠保證生長(zhǎng)細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定性，細(xì)胞存活率高,。成都無(wú)血清細(xì)胞凍存液