外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高,、操作難度大。李記生物自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,,組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理,,適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清,、血漿,、尿液及其他體液(腦脊液、腹水,、羊水,、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過(guò)濾裝置,,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項(xiàng):1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí),可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理,。2.當(dāng)血清,、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,,收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí),,可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,。開(kāi)封外泌體提取試劑廠家推薦
為了分離外泌體,研究人員用兩個(gè)這樣的單元串聯(lián)構(gòu)建了一個(gè)裝置,。首先,,使用聲波從血液樣品中除去細(xì)胞和血小板。一旦細(xì)胞和血小板被去除,,樣品進(jìn)入第二個(gè)微流體單元,,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細(xì)胞外囊泡分開(kāi)。這項(xiàng)工作的通訊作者之一,,麻省理工學(xué)院材料科學(xué)與工程系科學(xué)家MingDao博士說(shuō):“聲波更溫和,。而且在分離時(shí),這些囊泡受處理的時(shí)間只有1秒鐘或更短,。這是一個(gè)很大的優(yōu)勢(shì),。”使用該設(shè)備,,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘,?!斑@種新技術(shù)可以解決當(dāng)前外泌體分離技術(shù)的缺點(diǎn),如周期長(zhǎng),,一致性差,,產(chǎn)量低,污染以及完整性受損等,。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過(guò)程簡(jiǎn)化為按一個(gè)按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡(jiǎn)單,。”研究人員們說(shuō),。昆明外泌體提取試劑單價(jià)有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。
外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,,一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,,壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng);肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,,可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8,,使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化,從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中,,細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱,,NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān),。此外,啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá),,進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移,。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,,但也有報(bào)道稱,,外泌體miR-302b可以通過(guò)壓制TGFβRⅡ來(lái)壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,,雜蛋白較多(假陽(yáng)性),,顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,。
外泌體與肺病預(yù)后:在當(dāng)代精細(xì)醫(yī)療的大趨勢(shì)下,,外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù),。根據(jù)一些病癥來(lái)源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究,臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定較合適的治病方案,,以達(dá)到改善肺病患者生存率,,延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的,。但是,針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問(wèn)題有待廣大研究者解決,,如:外泌體的純化及標(biāo)記方法,、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等,??偠灾饷隗w的研究有著廣闊的前景,,基于外泌體與肺病的研究,,有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和治病的有效措施,造福更多的患者,。外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):無(wú)需蛋白酶處理,。
人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞,、血小板、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),,外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸,、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA。由于國(guó)內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏,,我國(guó)對(duì)外泌體的研究還基本依賴于過(guò)程繁瑣的超速離心和進(jìn)口提取試劑盒,。上海外泌體提取試劑廠家直銷
用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng):抽血時(shí)間。開(kāi)封外泌體提取試劑廠家推薦
外泌體(exosomes)是活細(xì)胞經(jīng)過(guò)"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過(guò)程而形成的膜性囊泡,,來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體),,直徑約為30-150nm,密度在1.13-1.21g/ml,,天然存在于血液,、唾液,、尿液及母乳等體液中,同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,,人體中大約有1014個(gè)外泌體,大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。外泌體中含有核酸(DNA,、miRNA、lncRNA,、mRNA,、tRF等)、蛋白和脂類,,在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,,研究表明其在干細(xì)胞、免疫調(diào)控,、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用開(kāi)封外泌體提取試劑廠家推薦