DNA和RNA的鑒別染色:利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA,。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定,非固定細(xì)胞核酸,,或作溶酶體的一種標(biāo)記,。觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體,。雖然測(cè)定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果,但該方法已被許多實(shí)驗(yàn)室普遍采用,。RNA是核糖核酸,,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,,因此,,常用乙醇來(lái)沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,,故可用苯酚來(lái)沉淀RNA,。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):用途植物RNA提取試劑可從植物Chemicalbook組織。青島正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步,。好的提取試劑在確保成功的同時(shí),,操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對(duì)于動(dòng)物組織,、簡(jiǎn)單的植物材料,、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取,,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例,。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線,。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng),,無(wú)需苯酚氯仿抽提等步驟,簡(jiǎn)單快捷,。組織或細(xì)胞裂解后,,提取操作光需20分鐘便可完成杭州RNA提取試劑直銷價(jià)細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):提取的RNA,品質(zhì)高,,產(chǎn)量多,。
總RNA提取試劑,適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,,可有效防止RNA在提取過(guò)程中的降解,。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,,體外翻譯,,RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn),RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作,。該試劑可用于100次總RNA提?。?0平方厘米細(xì)胞或100mg組織)??俁NA提取試劑注意事項(xiàng):1,,RNA提取過(guò)程中所用器皿,、離心管、吸頭等應(yīng)保證無(wú)污染無(wú)RNA酶,。操作中應(yīng)小心,防止外源性RNA酶污染樣品導(dǎo)致RNA樣品降解,。2,,試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個(gè)人防護(hù),。自備新開封或?qū)iT氯仿,,異丙醇,75%乙醇,,DEPC處理水,。
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),,低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S),。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,,28S的位置大約在2kb,,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大,。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上,。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年,。RNA半衰期比較短,,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,,NorthernBlot等。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有高效的DNaseⅠ,,可有效去除DNA污染,。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,,棄穿透液,。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液,。加0.7mL通用洗柱液,,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液,。加0.3mL通用洗柱液,,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液,。此步可以省略,。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用,。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,,室溫放置1~2分鐘,。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,,可以立即使用或存放于-80℃待用血漿/血清RNA提取試劑盒:普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,。無(wú)錫RNA提取試劑廠家直銷
血漿/血清RNA提取試劑盒:可以從普通植物的根、莖,、葉中快速提取總RNA,。青島正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜
RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,,核糖和堿基構(gòu)成,。在細(xì)胞中,RNA種類繁多,。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,,RNA主要分三類,即tRNA,、rRNA,,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板,;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所,。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,,像是組成剪接體(spliceosome)的snRNA,負(fù)責(zé)rRNA成型的snoRNA,,以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,,可調(diào)節(jié)基因表達(dá),。青島正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜