鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá),。方法制作鼠尾膠原,，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。南京正規(guī)鼠尾膠原服務(wù)電話

生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,，利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心，簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,，并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中,，進(jìn)行多次真空冷凍干燥,，并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉；較后由滅菌,、無菌包裝,，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,，提高了產(chǎn)率和生物相容性,，降低了成本，適用于生物醫(yī)用材料,，所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu),。金華重慶鼠尾膠原酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。

要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把,，無齒鑷1把，200ml燒杯1個(gè),，培養(yǎng)皿1個(gè),，帶蓋廣口瓶1個(gè)，離心管,、小瓶數(shù)個(gè),，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1％醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液,。取大鼠尾巴,，洗凈，置75%酒精浸泡消毒后,，手持尾巴,，用止血鉗夾住尾巴較高，折斷尾骨后拉出尾腱,，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,，稱尾腱的重量，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,，搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48小時(shí),，離心,。吸取其上清，分裝至小瓶,，4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成。

鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原,，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接,；有鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,，易于封接和長時(shí)間（約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型。

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜,。鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,。昆明鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

通常情況下骨質(zhì)總量中的鈣,、鎂、磷等無機(jī)物質(zhì)光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機(jī)物質(zhì)卻要占超過80%,。南京正規(guī)鼠尾膠原服務(wù)電話

除了讓細(xì)胞更好貼上去,，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,，這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,，讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長。當(dāng)然,，除了這些,，耗子尾汁還能做到很多事情，只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品，制作止血海綿敷料等各種用途,。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,，老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。蘇州君欣生物科技有限公司南京正規(guī)鼠尾膠原服務(wù)電話