無(wú)血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品介紹:無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方,,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,,**降低了細(xì)胞在凍存過(guò)程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷,。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無(wú)任何動(dòng)物源組分,,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),,并且可減少各類(lèi)***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn),,確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,,無(wú)需程序降溫。無(wú)血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件:3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí),,盡可能-20℃冷凍保存,。長(zhǎng)沙正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液價(jià)格
使用方法:1)細(xì)胞超凈臺(tái)無(wú)菌環(huán)境,1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞,,細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml,,混懸液體積為200μl。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷,,逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl,,細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開(kāi)啟程序性降溫,,降溫速率為1℃/min,較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存,。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對(duì)比,,具體結(jié)果如附圖1所示,可見(jiàn)采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率,。其他實(shí)施例通過(guò)與比較例1進(jìn)行比較,,也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率,,同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定,、以及避免由血清中的支原體,細(xì)菌,,朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染,。青島正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)無(wú)血清凍存液用途:細(xì)胞保藏中心,無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存,。
細(xì)胞凍存秘籍:低溫儲(chǔ)存始終保持儲(chǔ)存溫度低于-130°C,。細(xì)胞可以在更高的溫度下存活,但生存力通常會(huì)隨著時(shí)間的推移而降低,。理想的儲(chǔ)存容器是液氮罐,,其中細(xì)胞或者被浸沒(méi)在液氮中,或者被懸浮在液氮上方的蒸汽相中,。出于安全原因(以下#6),,推薦氣相儲(chǔ)存。要維護(hù)液氮中儲(chǔ)存的細(xì)胞需要記住以下幾點(diǎn):A. 確保標(biāo)簽系統(tǒng)適用于(長(zhǎng)久)低溫儲(chǔ)存,。B. 保持良好記錄,,包括細(xì)胞儲(chǔ)存位置,,生長(zhǎng)特點(diǎn)和操作記錄。C. 請(qǐng)頻繁檢查液氮罐的狀態(tài)(較好每天或至少每周一次),。有多種商用警報(bào)系統(tǒng)可用于持續(xù)監(jiān)控其狀態(tài),。珍貴細(xì)胞應(yīng)至少存放在兩個(gè)不同的地點(diǎn)。
細(xì)胞凍存,,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1,、凍存液比例一般是培養(yǎng)基:血清:DMSO=7:2:1或5:4:1;動(dòng)物種屬的原代細(xì)胞凍存液可采用的比例是培養(yǎng)基:血清:DMSO=0:9:1,,即直接用血清重懸細(xì)胞再加入DMSO,,盡管如此,原代細(xì)胞的復(fù)蘇成活率還是很低,。2,、有文獻(xiàn)表明,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,,因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生,。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確,目前慣用的就是4℃30min,、-20℃ 1h30min,、-80℃ 2h后轉(zhuǎn)入液氮中。無(wú)血清凍存液用途:置于-20℃保存,,有效期為3年,。
細(xì)胞凍存:取出凍存管,注明細(xì)胞名稱(chēng),,代數(shù),,日期。離心后,,以無(wú)菌吸管吸棄上清,,不要吸到底部的細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻,,根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,,將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中,,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜,。嚴(yán)密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,,使溫度每分鐘大約降低1℃,。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,,然后將凍存盒置于–80℃條件下過(guò)夜,。若無(wú)凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過(guò)夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中,,置于液氮上方的氣相空間中儲(chǔ)存,。需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存,。無(wú)錫無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠(chǎng)家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液:一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,。長(zhǎng)沙正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液價(jià)格
細(xì)胞凍存秘籍:程序1.凍存前檢查凍存前,,細(xì)胞應(yīng)處于指數(shù)生長(zhǎng)期,確保細(xì)胞處于健康狀態(tài),。理想情況下,,應(yīng)在收獲細(xì)胞前24小時(shí)更換培養(yǎng)基。建議對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行微生物污染物,,特別是支原體的檢測(cè),,并通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒ǎ鏢TR分析確定其身份,。如果在培養(yǎng)過(guò)程中使用物品,,那么建議在冷凍前1到2周不使用物品,,這樣如果出現(xiàn)污染,,可以更容易地發(fā)現(xiàn)。2.收集細(xì)胞通常,,您可以使用常規(guī)細(xì)胞傳代的實(shí)驗(yàn)程序來(lái)收獲細(xì)胞,。細(xì)胞收獲期間盡可能溫和操作。本程序推薦的試劑量是針對(duì)為75平方厘米(T-75)培養(yǎng)瓶,;若使用其他培養(yǎng)容器,,請(qǐng)相應(yīng)調(diào)整所用試劑量。A.使用無(wú)菌吸管,,取出并丟棄培養(yǎng)基,。請(qǐng)妥善處置與細(xì)胞接觸的任何材料和溶液。B.用5到10ml CMF-PBS沖洗細(xì)胞,,去除所有痕量的血清,。C.加入3到5ml的胰酶(在CMF-PBS中),37℃孵育,。預(yù)熱酶溶液通常會(huì)縮短處理時(shí)間,。長(zhǎng)沙正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液價(jià)格
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