TOPTICAFemtoFiberultra920超快光纖激光器是一種易于操作且無需維護的激光系統(tǒng),。其輸出波長為920nm，非常適合常規(guī)熒光基團（如GFP,，eGFP,，Eosin，GCaMP,，CFP,，Calcein或者Venus）的雙光子激發(fā),。能給熒光基團提供比較高的峰值功率，常用于神經(jīng)科學和其他與激光有關(guān)的生物光子學學科,。而且其獨特設計（制造簡單且經(jīng)濟高效的光源）對雙光子熒光顯微鏡發(fā)展的革新具有潛在的可能,。在雙光子顯微鏡中，峰值功率就是亮度,！如果您希望獲得比較好的圖像亮度,，那么你就需要短脈沖，高功率,，較重要的是需要干凈的時間脈沖形狀,。FemtoFiberultra920具有足夠高的輸出功率，較短的脈沖和獨特的Clean-Pulse技術(shù),，以及具有相對比較高的峰值功率,，使得其在雙光子顯微鏡中可以實現(xiàn)****的亮度，而不會對樣品造成不必要的加熱,。FemtoFiberultra920交鑰匙,，完全集成的色散補償（可確保樣品處的脈沖較短），內(nèi)置的功率控制,，操作直觀以及其堅固而緊湊的設計,，使該系統(tǒng)具有極為友好的用戶體驗，是非線性顯微鏡應用的較好解決方案,。例如熒光蛋白的雙光子激發(fā)和基于SHG的對比機制,。雙光子顯微鏡可以用于局部微蝕鐳射磨皮后的膠原重塑的檢測。進口激光雙光子顯微鏡熒光壽命計數(shù)

雙光子顯微鏡為什么穿透能力強,？生物組織在近紅外波段存在兩個窗口,第1個近紅外窗口對應波長在700nm-900nm,第2個近紅外窗口對應波長在1000nm-1400nm之間,。舉例說明就是單晶硅對于可見光幾乎是不透明的，但是對于紅外波段就像是“水晶”一樣通透性很好了,。原因有兩點：1.生物組織對紅外光的吸收弱,，對可見光吸收強。類似的,，平時用手電筒照射手指,，會看到手通透紅亮，也是由于生物組織對長波長的紅光吸收少,。2.生物組織對紅外光的散射弱,。因為瑞利散射的強度反比于波長λ的四次方。類似的,，早晨的太陽非常紅,，也就是因為長波長的紅光穿透力更強。這兩點共同導致長波長的紅外光比可見光對生物組織的穿透能力強,。進口2PPLUS雙光子顯微鏡廠家電話雙光子顯微鏡大量運營在實驗室當中,。

王愛民副教授結(jié)合工作實例,，展示了雙光子顯微鏡的研發(fā)與應用。歷經(jīng)3年多的協(xié)同奮戰(zhàn),，成功研制新一代高速分辨微型化雙光子熒光顯微鏡,，重量只為2.2克，這一微型顯微鏡獲取了小鼠在自由行為過程中大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸活動清晰,、穩(wěn)定的圖像,，該顯微鏡適于佩戴在小動物頭部，可實時記錄數(shù)十個神經(jīng)元,、上千個神經(jīng)突觸的動態(tài)信號,，在大型動物上，還可望實現(xiàn)多探頭佩戴,、多顱窗不同腦區(qū)的長時程觀測,。雙光子顯微成像的在生物醫(yī)學研究和醫(yī)療領域應用有較大的應用前景，首先雙光子顯微鏡能夠進行細胞和組織結(jié)構(gòu)成像,，在亞微米級成像,，此功能與目前市場上的共聚焦類顯微鏡性能類似；雙光子顯微成像能夠?qū)崟r,、在體,、原位、無創(chuàng)地,，根據(jù)不同物質(zhì)組份的光譜特性,，區(qū)分成像；雙光子顯微鏡能夠進行生化指標成像,，在無造影劑的前提下,，利用自發(fā)熒光、二次諧波,、熒光獲得活細胞生化信息,。

WinfriedDenk較初使用的光源是染料飛秒激光器(100fs脈寬、630nm可見光波長),。雖然染料激光器對于實驗室演示尚可,，但是使用很不方便所以遠未實現(xiàn)商用,。很快雙光子顯微鏡的標配光源就變成了飛秒鈦寶石激光器,。除了固態(tài)光源優(yōu)勢，鈦寶石激光器還具有較寬的近紅外波長調(diào)諧范圍,，而近紅外相比可見光穿透更深,，對生物樣品損傷更小。下圖是Thorlabs的雙光子和三光子顯微鏡配置,，鈦寶石飛秒可調(diào)諧激光器位于平臺較左邊,。從雙光子到三光子科學家正在從雙光子轉(zhuǎn)向三光子顯微鏡,。1996年，ChrisXu在康奈爾大學(Denk同導師實驗室)讀博期間發(fā)明了三光子顯微鏡,，如果雙光子吸收可行,，那么三光子看起來也是自然的發(fā)展方向。三光子成像使用更長的波長,，大約在1.3和1.7微米,，其成像深度也比雙光子更深，目前記錄約為2.2毫米,，人類大腦皮層厚約4毫米,。相比雙光子顯微鏡，三光子還要求以較低重頻使用更強和更短的激光脈沖,，而傳統(tǒng)的鈦寶石激光器難以達到這些要求,，但是對于摻鐿光纖飛秒光參量放大器則非常容易，比如我們的Y-Fi光參量放大器(OPA),。雙光子顯微鏡將得到更大的發(fā)展與更廣的應用,。

雙光子顯微成像技術(shù)不是什么新技術(shù)，早在20多年前就有了,，目前已經(jīng)在生命科學和材料科學中廣泛應用,。幾年前雙光子**過期后，已經(jīng)推出自己的雙光子顯微鏡的廠家估計不少于10家以上,。即便如此,，世界上很多實驗室都搭雙光子，自己搭的好處有很多,，首先是便宜,，尤其是實驗室已經(jīng)有飛秒激光器，那就更很省錢了,。其次是靈活,，可以選擇針對特殊用途的搭配，改動也靈活,。結(jié)束后的好處就是可以鍛煉隊伍,，一趟走下來可以把新手帶出來，后期維護也更加自由,。當然壞處也不少,，首先是操心，特別是第1次搭的時候,，開始要想方案,，后來要解決各種實際問題。其次是花時間,，加上買配件的時間,，比買一臺現(xiàn)成的商業(yè)化雙光子耗時長?，F(xiàn)在已經(jīng)有不少關(guān)于如何搭雙光子顯微鏡的文章，各種protocol,，大多是老外寫的,，中文的較少。其實完全自己搭一套好用的系統(tǒng)還是不容易的,，尤其是沒有經(jīng)驗的時候,，容易走彎路，多花錢,，也多花時間,，再加上雙光子的重要器件都需要從國外購買，在國內(nèi)買這些東西耗時較長,。因此,，我想總結(jié)一下我們的經(jīng)驗，貼出來分享,，希望能幫到想自己動手的實驗室雙光子顯微鏡有哪些分類呢,？進口ultimainvestigator雙光子顯微鏡價位

雙光子顯微鏡使用方法是什么？進口激光雙光子顯微鏡熒光壽命計數(shù)

單光子顯微技術(shù)是成熟的熒光顯微技術(shù),，但由于其使用的激發(fā)光波長較短,，成像深度有限；能量較大,會造成對熒光物質(zhì)的漂白,光毒性嚴重,。激光共焦掃描顯微鏡由于共焦顯微鏡的孔徑很小,實現(xiàn)樣本三維成像要逐點掃描,成像速度慢,對樣本損害大,很難用于長時間活細胞成像,。而寬場顯微鏡能夠很好地實現(xiàn)實時動態(tài)成像,光漂白小,因而較早應用于活細胞內(nèi)的實時檢測，但寬場顯微鏡由于離焦信號的干擾,難以實現(xiàn)多維成像,。雙光子熒光顯微鏡（Two-PhotonLaser-ScanningMicroscopy）,。雙光子顯微成像技術(shù)是近些年發(fā)展起來的結(jié)合了共聚焦激光掃描顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新型非線性光學成像方法,采用長波激發(fā)，能對組織進行深層次成像,。常用的比較好激發(fā)波長大多位于800-900nm,，而水、血液和固有組織發(fā)色團對這個波段的光吸收率低,，此外散射的激發(fā)光子不能激發(fā)樣品,，因此背景第，光損傷小,，適用于在體檢測,。雙光子熒光成像技術(shù)能準確定位細胞內(nèi)置入的微電極位置，從而觀察胞體,、樹突甚至單個樹突棘的活性,。研究者可完整的觀察神經(jīng)組織的分辨熒光圖像,甚至可以分辨神經(jīng)細胞單個樹突棘中的鈣分布,。進口激光雙光子顯微鏡熒光壽命計數(shù)