TOPTICAFemtoFiberultra920超快光纖激光器是一種易于操作和免維護(hù)的激光系統(tǒng)其輸出波長(zhǎng)為920nm,，非常適合常規(guī)熒光基團(tuán)(如GFP、eGFP,、曙紅,、GCaMP、CFP,、鈣黃綠素或金星)的雙光子激發(fā),。它可以為熒光基團(tuán)提供相對(duì)較高的峰值功率，常用于神經(jīng)科學(xué)和其他與激光相關(guān)的光子學(xué),。此外,，其獨(dú)特的設(shè)計(jì)(簡(jiǎn)單和經(jīng)濟(jì)的光源)具有創(chuàng)新雙光子熒光顯微鏡發(fā)展的潛力。在雙光子顯微鏡中,，峰值功率就是亮度,！如果你想獲得更好的圖像亮度，那么你需要短脈沖，高功率,，更重要的是,，干凈的時(shí)間脈沖形狀。FemtoFiberultra920具有足夠高的輸出功率,、短脈沖,、獨(dú)特的Clean-Pulse技術(shù)和相對(duì)較高的峰值功率，這使得在雙光子顯微鏡中實(shí)現(xiàn)****亮度而無(wú)需對(duì)樣品進(jìn)行不必要的加熱成為可能,。FemtoFiberultra920全包式,、完全集成的色散補(bǔ)償(可確保樣品處的短脈沖)、內(nèi)置電源控制,、直觀的操作及其堅(jiān)固緊湊的設(shè)計(jì)使系統(tǒng)具有非常友好的用戶體驗(yàn),，是非線性顯微鏡應(yīng)用的良好解決方案。例如,，熒光蛋白的雙光子激發(fā)和基于SHG的對(duì)比機(jī)制雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器,。進(jìn)口ultimainvestigator雙光子顯微鏡授權(quán)商

與普通顯微鏡相比，電子顯微鏡可以在更小的尺度上觀察事物,，冷凍電子顯微鏡可以觀察活性生物大分子,。雙光子顯微鏡有什么優(yōu)勢(shì)？它能做普通光學(xué)顯微鏡做不到的事情嗎,？原來(lái)雙光子顯微鏡可以準(zhǔn)確穿透厚標(biāo)本進(jìn)行定點(diǎn)和***觀察,！因?yàn)殡姶挪ǖ牟ㄩL(zhǎng)越短，粒子越強(qiáng),，散射的影響越大,。雙光子顯微鏡將激發(fā)光源改為長(zhǎng)波長(zhǎng)激光，增加了激光的穿透力,，同時(shí)降低了對(duì)細(xì)胞的毒性,。此外，由于雙光子激發(fā)效應(yīng)只能發(fā)生在物鏡的焦點(diǎn)處,，因此掃描精度極高,，還可以提高激發(fā)光效率，減少掃描點(diǎn)以外的熒光物質(zhì)的消耗,。激光雙光子顯微鏡成像視野一般是多少雙光子顯微鏡成像技術(shù)及不同轉(zhuǎn)基因小鼠開(kāi)展對(duì)多種臟器的成像研究,。

通過(guò)并行化不同激光波長(zhǎng)的激光掃描，研究人員增加了在相同時(shí)間內(nèi)可以成像的體積,，同時(shí)保持了高的時(shí)間和空間分辨率。研究人員通過(guò)引入兩種不同波長(zhǎng)的鈣信號(hào)熒光探針,，將神經(jīng)元群體的活動(dòng)標(biāo)記為兩種不同的顏色,，同時(shí)激發(fā)兩種不同波長(zhǎng)的探針，從而實(shí)現(xiàn)了兩種顏色的并行數(shù)據(jù)記錄。為了實(shí)現(xiàn)三維空間成像,，研究人員還在兩個(gè)激光束上配置了快速變焦系統(tǒng),，即一個(gè)電透鏡和一個(gè)空間光調(diào)制器。因此,，可以以10Hz的速度同時(shí)記錄10個(gè)500微米和500微米的平面,，覆蓋600微米的深度，覆蓋大腦皮層第二層到第五層的結(jié)構(gòu),，體積內(nèi)可以記錄2000多個(gè)神經(jīng)元,。

通過(guò)對(duì)顯微光學(xué)系統(tǒng)的重新設(shè)計(jì)，將FHIRM-TPM2.0的成像視場(chǎng)擴(kuò)展至420×420平方微米,，顯微物鏡的工作距離擴(kuò)展至1mm,，實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)成像。嵌入可拆卸的快速軸向掃描模塊,，實(shí)現(xiàn)深度180微米的三維體成像和多平面快速切換的實(shí)時(shí)成像,。該模塊由一個(gè)快速電動(dòng)變焦鏡頭和一對(duì)中繼鏡頭組成，在不同深度成像時(shí)保持放大率恒定,。其中,，變焦模塊重1.8克，科研人員可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求自由拆卸,。此外,，新型微型成像探頭可以瞬間插拔，極大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,，避免了長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物的干擾,。反復(fù)裝卸探針追蹤同批神經(jīng)元時(shí)，視場(chǎng)旋轉(zhuǎn)角度小于0.07弧度,，邊界偏差小于35微米,。雙光子顯微鏡將得到更大的發(fā)展與更廣的應(yīng)用。

從雙光子的原理和特點(diǎn)我們就可以明顯的得出雙光子的優(yōu)點(diǎn)：☆穿透能力強(qiáng)：相對(duì)于紫外光,，可見(jiàn)光和近紅外光都具有更強(qiáng)的穿透能力,，因而受生物組織散射的影響更小，解決對(duì)生物組織中深層物質(zhì)的層析成像研究問(wèn)題,；☆高分辨率：由于雙光子吸收截面很小,，只有在焦平面很小的區(qū)域內(nèi)可以激發(fā)出熒光，雙光子吸收局限于焦點(diǎn)處的體積約為波長(zhǎng)3次方的范圍內(nèi),；☆漂白區(qū)域?。河捎诩ぐl(fā)只存在于交點(diǎn)處，所以焦點(diǎn)以外的區(qū)域都不會(huì)發(fā)生光漂白現(xiàn)象,；☆熒光收集率高：與共聚焦成像相比,，雙光子成像不需要光學(xué)濾波器（共焦）,，這樣就提高了對(duì)熒光的收集率，而收集率的提高直接導(dǎo)致圖像對(duì)比度的提高,。雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖器,。國(guó)外激光雙光子顯微鏡光毒性

雙光子顯微鏡使用方法是什么？進(jìn)口ultimainvestigator雙光子顯微鏡授權(quán)商

相比普通的顯微鏡電子顯微鏡可以觀察尺度更小的東西,，冷凍電鏡更是可以觀察有活性的生物大分子,，而雙光子顯微鏡有什么優(yōu)勢(shì)呢？它能做到什么普通光學(xué)顯微鏡做不到的事情嗎,？原來(lái),，雙光子顯微鏡可以精確穿透較厚標(biāo)本進(jìn)行定點(diǎn)、***觀察,！由于電磁波的波長(zhǎng)越短,，粒子性越強(qiáng)，受散射影響也就越大,。雙光子顯微鏡將激發(fā)光源改為長(zhǎng)波長(zhǎng)激光,，在增加了激光的穿透性的同時(shí)還減少了對(duì)細(xì)胞的毒性。除此之外,，因?yàn)橹挥形镧R焦點(diǎn)處能發(fā)生雙光子激發(fā)效應(yīng),，所以掃描的精確度極高，也能提高激發(fā)光效率,，減少被掃描點(diǎn)之外的熒光物質(zhì)消耗,。進(jìn)口ultimainvestigator雙光子顯微鏡授權(quán)商