快速光柵掃描有多種實現(xiàn)方式,，使用振鏡進行快速2D掃描,，將振鏡和可調(diào)電動透鏡結(jié)合在一起進行快速3D掃描，但可調(diào)電動透鏡由于機械慣性的限制在軸向無法快速進行焦點切換,，影響成像速度,，現(xiàn)可使用空間光調(diào)制器（SLM）代替,。遠程聚焦也是一種實現(xiàn)3D成像的手段。在LSU模塊中,，掃描振鏡進行橫向掃描,，ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M，通過調(diào)控M的位置實現(xiàn)軸向掃描,。該技術(shù)不僅可以校正主物鏡L2引入的光學(xué)像差,，還可以進行快速的軸向掃描。想要獲得更多神經(jīng)元成像,，可以通過調(diào)整顯微鏡的物鏡設(shè)計來擴大FOV,，但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大，無法快速移動以進行快速軸向掃描,，因此大型FOV系統(tǒng)依賴于遠程聚焦,、SLM和可調(diào)電動透鏡。生產(chǎn)和消費的角度分析多光子顯微鏡的主要生產(chǎn)地區(qū),、主要消費地區(qū)以及主要的生產(chǎn)商,。美國熒光多光子顯微鏡成像深度

1,，光源、光路高度整合通過精密的設(shè)計,，將飛秒激光器,、掃描振鏡、PMT,、濾光片組，甚至是單光子熒光光路全套整合在一個不大的掃描頭內(nèi),，無論掃描頭如何移動,，掃描頭內(nèi)的光路都可以保持穩(wěn)定不變，從而實現(xiàn)了超穩(wěn)定,、免維護的特點,。2，配合多維度,、高精度機械控制系統(tǒng),。掃描頭直接架設(shè)在一個多維運動的機械裝置上，可沿任意方向和角度移動掃描頭,，方便對動物樣本進行多方位的掃描觀察,。而這在常規(guī)方案的多光子顯微鏡上有很大的實現(xiàn)難度，不但需要多個關(guān)節(jié)組合的光路導(dǎo)向機構(gòu),，并且在這些關(guān)節(jié)旋轉(zhuǎn)的時候,，都冒著極大的光路偏移的風險，以至于在使用一段時間后都需要對光路進行再次校準,，而這樣的問題在我司上則完全不會發(fā)生,。3.一機多能。布魯克多光子顯微鏡層析成像中國市場多光子顯微鏡產(chǎn)量,、消費量,、進出口分析及未來趨勢。

雙光子顯微鏡工作原理是將超快的紅外激光脈沖傳輸?shù)綐悠分?，在樣品中與組織或熒光標記相互作用,，這些組織或熒光標記發(fā)出用于創(chuàng)建圖像的信號。雙光子顯微鏡被多用于生物學(xué)研究,，因為它能夠產(chǎn)生高分辨率的3-D圖像,，深度達1毫米。然而,，這些優(yōu)點帶來了有限的成像速度,，因為微光條件需要逐點圖像采集和重建的點檢測器。為了加快成像速度,，科學(xué)家之前開發(fā)了一種多焦點激光照明方法,，該方法使用數(shù)字微鏡設(shè)備(DMD)，這是一種通常用于投影儀的低成本光掃描儀。此前人們認為這些DMD不能與超快激光一起工作,。然而現(xiàn)在解決了這個問題,，這使得DMD在超快激光應(yīng)用中得以應(yīng)用，這些應(yīng)用包括光束整形,、脈沖整形,、快速掃描和雙光子成像。DMD在樣品內(nèi)隨機選擇的位置上產(chǎn)生5到30點聚焦激光,。

雙光子熒光顯微成像主要有以下優(yōu)點∶a.光損傷小∶雙光子熒光顯微鏡使用可見光或近紅外光作為激發(fā)光,，對細胞和組織的光損傷很小，適合于長時間的研究;b.穿透能力強∶相對于紫外光,，可見光或近紅外光具有很強的穿透性,，可以對生物樣品進行深層次的研究;c．高分辨率∶由于雙光子吸收截面很小P，只有在焦平面很小的區(qū)域內(nèi)可以激發(fā)出熒光,，雙光子吸收局限于焦點處的體積約為λ范圍內(nèi);d.漂白區(qū)域很小,，焦點以外不發(fā)生漂白現(xiàn)象。e．熒光收集率高,。與共聚焦成像相比,，雙光子成像不需要光學(xué)濾波器，提高了熒光收集率,。收集效率提高直接導(dǎo)致圖像對比度提高,。f.對探測光路的要求低。由于激發(fā)光與發(fā)射熒光的波長差值加大以及自發(fā)的三維濾波效果,，多光子顯微鏡對光路收集系統(tǒng)的要求比單光子共焦顯微鏡低得多,，光學(xué)系統(tǒng)相對簡單。g.適合多標記復(fù)合測量,。許多染料熒光探針的多光子激發(fā)光譜要比單光子激發(fā)譜寬闊,，這樣，可以利用單一波長的激發(fā)光同時激發(fā)多種染料,，從而得到同一生命現(xiàn)象中的不同信息,，便于相互對照、補充,。多光子激光掃描顯微鏡采用波長較長的紅外激光,能量脈沖式激發(fā),紅外光比可見光在生物組織中的穿透力更強,。

對于兩個遠距離(相距1-2mm以上)的成像部位，通常采用兩個**的路徑進行成像,；對于相鄰區(qū)域,，通常使用單個物鏡的多個光束進行成像。多光束掃描技術(shù)必須特別注意激發(fā)光束之間的串擾,，這可以通過事后光源分離或時空復(fù)用來解決,。事后光源分離法是指分離光束以消除串擾的算法,；時空復(fù)用法是指同時使用多個激發(fā)光束，每個光束的脈沖在時間上被延遲,，使不同光束激發(fā)的單個熒光信號可以暫時分離,。引入的光束越多，可以成像的神經(jīng)元越多,，但多束會導(dǎo)致熒光衰減時間重疊增加,，從而限制了分辨信號源的能力；并且復(fù)用對電子設(shè)備的工作速度要求很高,；大量的光束也需要較高的激光功率來維持單束的信噪比,，這樣容易導(dǎo)致組織損傷。多光子顯微鏡已經(jīng)被生物學(xué)家普遍的運用于實驗中,。布魯克多光子顯微鏡層析成像

從產(chǎn)品類型及技術(shù)方面來看，正置顯微鏡占據(jù)絕大多數(shù)市場,。美國熒光多光子顯微鏡成像深度

多光子激光掃描顯微鏡的產(chǎn)業(yè)發(fā)展,，世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要分布在德國和日本，德國以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為基礎(chǔ),，日本以尼康和奧林巴斯為基礎(chǔ),。2020年以來，這些企業(yè)占據(jù)了全球多光子激光掃描顯微鏡市場的64.44%,，它們的發(fā)展策略影響著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向,。目前，世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求正在增長,，中國市場的需求增長更快,。未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將仍有巨大的發(fā)展?jié)摿ΑＣ绹鵁晒舛喙庾语@微鏡成像深度