在該自適應光學雙光子熒光顯微鏡中,，她們將空間光位相調(diào)制器光學共軛到顯微物鏡的后焦平面，通過位相調(diào)制器將入射光分成若干子區(qū)域,，每一塊子區(qū)域的波前都可以被控制,。同時，她們用數(shù)字微陣列光處理器,，以不同的頻率同時調(diào)制其中一半子區(qū)域的入射光強度,，以另一半子區(qū)域作為“參考波前”。來自所有子區(qū)域光束會在焦點處會聚干涉,，通過監(jiān)測焦點激發(fā)的雙光子信號隨時間的變化情況,，并進行傅里葉變換分析，可以“分解”得到被調(diào)制的每一塊子區(qū)域的“光線”的貢獻信息,，從而可以實現(xiàn)對一半子區(qū)域波前的并行測量,。對另一半子區(qū)域重復這一測量過程，從而獲得整個入射波前的信息并進行校正,。該方法耗時很短,，通常約1~3分鐘左右即可完成像差的測量和校正，無需復雜的計算,，適用于任何標記密度和標記類型的樣品,。更重要的是，得到的像差校正圖案可以用于提高較大視場范圍內(nèi)的成像質(zhì)量,。該方法無疑為在體研究小鼠大腦皮層深層區(qū)域的生物,、醫(yī)學問題提供了可行性方案。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖光,，是通過物鏡匯聚的,。進口ultima2PPLUS雙光子顯微鏡光子探測

在傳統(tǒng)寬場顯微鏡中，來自標本不同縱深的光線都可投射到同一焦平面（感光元件）上,，所以其成像是整個樣品的重疊像,，沒有縱向分辨能力。單光子激光共聚焦顯微鏡用***有效濾除了雜散光,，分辨率有了本質(zhì)上的提高,，擁有了對樣品的特定焦平面精細成像的能力，可以進行三維成像,、動態(tài)成像等,。然而，***在濾除雜散光的同時也將大部分來自焦平面的熒光濾除了,，只有很弱的熒光到達檢測器,。若要提高信號強度，需要加大激發(fā)光功率,，這又會導致對活細胞的光毒性和熒光分子的光漂白增加,。雙光子顯微鏡比較大的優(yōu)勢來源于其雙光子光源的非線性光學效應,，與單光子共聚焦顯微鏡比較大的不同在于無須使用***限制光學散射，其具體優(yōu)勢如下,。進口布魯克雙光子顯微鏡成像原理雙光子顯微鏡成像技術及不同轉(zhuǎn)基因小鼠開展對多種臟器的成像研究,。

TOPTICAFemtoFiberultra920超快光纖激光器是一種易于操作且無需維護的激光系統(tǒng)。其輸出波長為920nm,，非常適合常規(guī)熒光基團（如GFP,，eGFP，Eosin,，GCaMP,，CFP，Calcein或者Venus）的雙光子激發(fā),。能給熒光基團提供比較高的峰值功率,，常用于神經(jīng)科學和其他與激光有關的生物光子學學科。而且其獨特設計（制造簡單且經(jīng)濟高效的光源）對雙光子熒光顯微鏡發(fā)展的革新具有潛在的可能,。在雙光子顯微鏡中,，峰值功率就是亮度！如果您希望獲得比較好的圖像亮度,，那么你就需要短脈沖,，高功率，較重要的是需要干凈的時間脈沖形狀,。FemtoFiberultra920具有足夠高的輸出功率,，較短的脈沖和獨特的Clean-Pulse技術，以及具有相對比較高的峰值功率,，使得其在雙光子顯微鏡中可以實現(xiàn)****的亮度,，而不會對樣品造成不必要的加熱。FemtoFiberultra920交鑰匙,，完全集成的色散補償（可確保樣品處的脈沖較短）,，內(nèi)置的功率控制，操作直觀以及其堅固而緊湊的設計,，使該系統(tǒng)具有極為友好的用戶體驗,，是非線性顯微鏡應用的較好解決方案。例如熒光蛋白的雙光子激發(fā)和基于SHG的對比機制,。

在2020年12月22日，臨研所,、病理科和科研處邀請北京大學王愛民副教授做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統(tǒng)介紹及其在臨床醫(yī)療診斷”的學術報告,。學術報告由臨研所醫(yī)學實驗研究平臺潘琳老師主持。王愛民,，北京大學信息科學技術學院副教授,，畢業(yè)于北京大學物理系,，獲學士、碩士學位,，后于英國巴斯大學物理系獲博士學位,。該研究組研發(fā)的微型雙光子顯微鏡，第1次在國際上獲得了小鼠大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸清晰穩(wěn)定的動態(tài)信號,，該成果獲得了2017年度“中國光學進展”和“中國科學進展”,，并被Nature Methods評為2018年度“年度方法--無限制行為動物成像”。目前,，該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術在臨床診斷中的應用,，為未來即時病理、離體組織檢測,、術中診斷等提供新的影像手段和分析方法,。雙光子顯微鏡大量運營在實驗室當中；

雙光子顯微鏡的優(yōu)勢：在深度組織中以較長時間對活細胞成像,，雙光子顯微鏡是當前之選,。雙光子和共聚焦顯微鏡都是通過激光激發(fā)樣品中的熒光標記，使用探測器測量被激發(fā)的熒光,。但是,，共聚焦一般使用單模光纖耦合激光器，通過單光子激發(fā)熒光,，而雙光子使用飛秒激光器,，通過幾乎同時吸收兩個長波光子激發(fā)熒光。下面是兩種技術的對比圖,。雙光子激發(fā)熒光的主要優(yōu)勢：雙光子比共聚焦使用的更長的波長,，所以對組織的損傷更小且穿透更深。共聚焦的成像深度一般為100微米,，雙光子則能達到250到500微米,，甚至超過1毫米。另外,，同時吸收兩個光子意味只有較強度聚焦點處能被激發(fā),，所以不會損傷焦平面之外的組織，并且生成更清晰的圖像,。雙光子顯微鏡的應用中,，該如何選擇以及更好的使用PMT。ultimainvestigator雙光子顯微鏡供應商

雙光子顯微鏡有哪些應用呢,？進口ultima2PPLUS雙光子顯微鏡光子探測

隨著現(xiàn)在科學技術的發(fā)展,，儀器儀表行業(yè)發(fā)生了突飛猛進的發(fā)展，再加上當前計算機技術,、網(wǎng)絡技術的進步和發(fā)展,，組建網(wǎng)絡而構(gòu)成實用的監(jiān)控系統(tǒng),，可以提高生產(chǎn)效率和共享信息資源方向發(fā)展。當前儀器儀表行業(yè)產(chǎn)品發(fā)展呈現(xiàn)微型化,、多功能化,、智能化、網(wǎng)絡化四大發(fā)展趨勢,。我國現(xiàn)有有限責任公司（自然）企業(yè)數(shù)千多家,，已經(jīng)形成門類品種比較齊全，具有一定技術基礎和生產(chǎn)規(guī)模的產(chǎn)業(yè)體系,。但同時業(yè)內(nèi)行家也指出,，雖然我國測試儀器產(chǎn)業(yè)有了一定的發(fā)展，但遠遠不能滿足國民經(jīng)濟各行各業(yè)日益增長的迫切需求,。nVista,，nVoke，3D bioplotte,，invivo產(chǎn)業(yè)是國民經(jīng)濟的基礎性,、戰(zhàn)略性產(chǎn)業(yè)，是信息化和工業(yè)化深度融合的源頭,，對促進工業(yè)轉(zhuǎn)型升級,、發(fā)展戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)、推動現(xiàn)代**建設,、保證和提高大家生活水平具有重要作用,。隨著中國的不斷進步，世界上只有一個救世主——市場,，能救企業(yè)的只有你自己——自強,，提高服務型重點競爭力才是中國制造業(yè)的獨一出路。以顯微科學儀器行業(yè)的發(fā)展與變化為例,，以親身的實踐為例,，毛磊認為，隨著經(jīng)濟的不斷發(fā)展,，我國的環(huán)境和實力都發(fā)生了巨大變化,，有了完全不同的基礎，這為國產(chǎn)科學儀器走向**增強了信心,。進口ultima2PPLUS雙光子顯微鏡光子探測