鈣成像技術(shù)在許多領(lǐng)域都有廣泛的應用,，以下是一些常見的應用場景：1.神經(jīng)科學研究：鈣成像技術(shù)被廣泛應用于研究神經(jīng)元活動和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的功能,。可以觀察神經(jīng)元的鈣離子動態(tài)變化,，揭示神經(jīng)元的興奮性和抑制性活動,，研究神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的連接和信息傳遞,。2.細胞信號傳導研究：鈣離子在細胞內(nèi)起著重要的信號傳導作用,。鈣成像技術(shù)可以用于研究細胞內(nèi)鈣離子的濃度變化，揭示細胞信號傳導的機制和調(diào)控過程,。3.細胞凋亡研究：鈣離子在細胞凋亡過程中扮演重要角色,。鈣成像技術(shù)可以用于觀察細胞內(nèi)鈣離子的變化，研究細胞凋亡的啟動和執(zhí)行過程,。4.藥理學研究：鈣成像技術(shù)可以用于評估藥物對細胞內(nèi)鈣離子濃度的影響,。可以研究藥物的作用機制,、藥物的劑量效應關(guān)系等,。5.疾病研究：鈣成像技術(shù)可以應用于研究與鈣離子信號傳導相關(guān)的疾病，如神經(jīng)退行性疾病,、心血管疾病等,。可以揭示疾病發(fā)生及發(fā)展的機制,，為疾病的診斷和診療提供依據(jù),。總之,，鈣成像技術(shù)在神經(jīng)科學,、細胞生物學、藥理學和疾病研究等領(lǐng)域都有廣泛的應用,，可以幫助揭示生物過程的機制和疾病的發(fā)生及發(fā)展過程,。鈣成像數(shù)據(jù)采集盒擁有 2TB 存儲空間，可選擇以太網(wǎng)或 Wi? 方式連接電腦,。上海熒光顯微鈣成像采購信息

紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針：Fura-2和Indo-1都是紫外光激發(fā)的雙波長Ca2+熒光指示劑,，也是目前較常用的比率型鈣離子熒光探針。與其他代的熒光指示劑相比,，它們的熒光信號更強,，對Ca2+的選擇性也更強。比率指示劑會在與Ca2+結(jié)合后會改變吸收/發(fā)射特性,。以雙波長激發(fā)指示劑Fura-2為例,。如圖2所示，低Ca2+濃度下，F(xiàn)ura-2在~380nm處激發(fā),，高Ca2+濃度下,，在~340nm處激發(fā)。光譜由兩個峰組成：左側(cè)較短波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而增大,，右側(cè)較長波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而減小,。通過340/380nm交替激發(fā)，獲取在510nm處對應的發(fā)射光熒光強度的比率,，就可以對Ca2+濃度進行定量的測量,。因為Fura-2結(jié)果準確，且不易被漂白,，所以得到了普遍使用,。在體鈣成像nVoke通過鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)當神經(jīng)元活動的時候，胞內(nèi)鈣離子濃度能上升 10 - 100 倍,。

單光子顯微技術(shù)是較成熟的熒光顯微技術(shù),，但由于其使用的激發(fā)光波長較短，成像深度有限,；能量較大,會造成對熒光物質(zhì)的漂白,光毒性嚴重,。激光共焦掃描顯微鏡由于共焦顯微鏡的孔徑很小,實現(xiàn)樣本三維成像要逐點掃描,成像速度慢,對樣本損害大,很難用于長時間活細胞成像。而寬場顯微鏡能夠很好地實現(xiàn)實時動態(tài)成像,光漂白小,因而較早應用于活細胞內(nèi)的實時檢測,，但寬場顯微鏡由于離焦信號的干擾,難以實現(xiàn)多維成像,。雙光子熒光顯微鏡（Two-PhotonLaser-ScanningMicroscopy）。雙光子顯微成像技術(shù)是近些年發(fā)展起來的結(jié)合了共聚焦激光掃描顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新型非線性光學成像方法,采用長波激發(fā),，能對組織進行深層次成像,。常用的比較好激發(fā)波長大多位于800-900nm，而水,、血液和固有組織發(fā)色團對這個波段的光吸收率低,，此外散射的激發(fā)光子不能激發(fā)樣品，因此背景第,，光損傷小,，適用于在體檢測。雙光子熒光成像技術(shù)能準確定位細胞內(nèi)置入的微電極位置,，從而觀察胞體,、樹突甚至單個樹突棘的活性。研究者可完整的觀察神經(jīng)組織的分辨熒光圖像,甚至可以分辨神經(jīng)細胞單個樹突棘中的鈣分布,。

細胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性,。當個細胞興奮時，產(chǎn)生了一個電沖動,，此時,，細胞外的鈣離子流入該細胞內(nèi),，促使該細胞分泌神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級神經(jīng)細胞膜上的蛋白分子結(jié)合,，促使這一級神經(jīng)細胞產(chǎn)生新的電沖動,。以此類推，神經(jīng)信號便一級一級地傳遞下去,，從而構(gòu)成復雜的信號體系,，較終形成學習、記憶等大腦的高級功能,。在哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)中,，鈣離子同樣扮演著重要的信號分子的角色。靜息狀態(tài)下大部分神經(jīng)元細胞內(nèi)鈣離子濃度約為50-100nM,，而細胞興奮時鈣離子濃度能瞬間上升10-100倍,，增加的鈣離子對于突觸囊泡胞吐釋放神經(jīng)遞質(zhì)的過程必不可少,。眾所周知,，只有游離鈣才具有生物學活性，而細胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,，同時也受鈣結(jié)合蛋白的影響,。細胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種，其中包括電壓門控鈣離子通道,、離子型谷氨酰胺受體,、煙堿型膽堿能受體（nAChR）和瞬時受體電位C型通道（TRPC）等。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現(xiàn)出來,，以反映神經(jīng)元活性,。該方法可以同時觀察多個功能或位置相關(guān)的腦細胞。鈣信號發(fā)揮著高度特異性的功能,。

傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,，只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進行成像，共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,，一般也只用于離體鈣成像,。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展，在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展,。雙光子熒光顯微鏡能夠在進行在體成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比,。例如，用雙光子顯微鏡對海馬樹突棘的鈣離子信號進行成像,，研究神經(jīng)元突觸后長時程降低(Wangetal.,2000),；觀察在體小鼠運動皮層神經(jīng)元在嗅覺選擇任務(wù)中刺激相關(guān)電位(Komiyamaetal.,2010)等等。不過,，這些實驗還是需要對動物進行麻醉和固定,，而神經(jīng)科學領(lǐng)域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒拥膭游镞M行研究,。近年來出現(xiàn)了通過植入性的microscope或microlens進行在體freelymoving動物鈣成像的技術(shù)。使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動物大腦,，從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號被光纖收集,，然后通過Inscopix顯微鏡成像。動物頭部只需植入GRINlens,，方便活動,。鈣成像系統(tǒng)支持聯(lián)網(wǎng)，基于網(wǎng)絡(luò)的軟件可讓您隨時隨地監(jiān)控數(shù)據(jù),。哈爾濱神經(jīng)細胞鈣成像供應商

利用鈣離子指示劑檢測組織或細胞內(nèi)鈣離子濃度,，進而反應組織或細胞內(nèi)某些活動或反應。上海熒光顯微鈣成像采購信息

通過篩選天然與人工合成的融合體,，在小鼠與斑馬魚幼蟲身上成功得到以為靶點的致密神經(jīng)回路報告,，報告顯示來自神經(jīng)纖維的偽信號明顯減少，信噪比增加,，神經(jīng)元之間的偽影相關(guān)性降低,。這些結(jié)果均說明GCaMP6f和GCaMP7f的細胞體靶向變體（Soma-GCaMP6f，Soma-GCaMP7f）對提高單光子熒光成像技術(shù)的精細性起到著重要作用,。這種胞體靶向突變體對提高神經(jīng)信號標記的精細性是否具有組織特異性或物種特異性呢,？研究團隊針對這一問題，分別在小鼠不同腦區(qū)以及斑馬魚幼魚的整胚轉(zhuǎn)染和斑馬魚不同發(fā)育時期的信號采集等方面進行研究,。上海熒光顯微鈣成像采購信息