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眾所周知,只有游離鈣才具有生物學(xué)活性,,而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,,同時(shí)也受鈣結(jié)合蛋白的影響。細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,,其中包括電壓門控鈣離子通道,、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時(shí)受體電位C型通道(TRPC)等,。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強(qiáng)度表現(xiàn)出來,,以反映神經(jīng)元活性。該方法可以同時(shí)觀察多個(gè)功能或位置相關(guān)的腦細(xì)胞,。鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)鈣離子產(chǎn)生各種各樣的胞內(nèi)信號,。鈣成像口碑好
鈣成像技術(shù)(calciumimaging)是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法。在神經(jīng)系統(tǒng)研究方面,,在在體(invivo)或者離體(invitro)實(shí)驗(yàn)中,,鈣成像技術(shù)被廣泛應(yīng)用于同時(shí)監(jiān)測成百上千個(gè)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而檢測神經(jīng)元的活動情況),。有了鈣成像技術(shù),,原本悄無聲息的神經(jīng)活動就變成了一幅斑斕閃爍的壯觀影像,科學(xué)家終于可以親眼看著神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)之中往來穿梭。因此,,這種技術(shù)一出現(xiàn),,就受到了全世界神經(jīng)科學(xué)家們的追捧,至今依然是人們觀測神經(jīng)活動直接的手段,。細(xì)胞鈣離子鈣成像價(jià)格多少雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行活動動物成像的時(shí)候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比,。
對于成像和長時(shí)間成像,較重要的是要保證細(xì)胞的正常生長,。熒光團(tuán)受激發(fā)光光照后產(chǎn)生的氧化物質(zhì)與蛋白質(zhì),、核酸和脂肪等發(fā)生反應(yīng),熒光信號降低的同時(shí)(光致退色)也降低了細(xì)胞壽命(光線損傷),。在光照過程中氧化劑的產(chǎn)生,主要決定于熒光團(tuán)的光化學(xué)性質(zhì)和光照劑量,因此減少光照劑量成為解決上述問題的途徑之一,。光漂白(Photobleaching)指在光的照射下熒光物質(zhì)所激發(fā)出來的熒光強(qiáng)度隨著時(shí)間推移逐步減弱乃至消失的現(xiàn)象。熒光成像的質(zhì)量很大程度上依賴于熒光信號強(qiáng)度,,提高激發(fā)光強(qiáng)度固然可以提高信號強(qiáng)度,,但激發(fā)光的強(qiáng)度不是可以無限提高的,當(dāng)激發(fā)光的強(qiáng)度超過一定限度時(shí),,光吸收就趨于飽和,,并不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子,這就是光漂白現(xiàn)象,。在顯微技術(shù)中,,光漂白使得觀測變得很復(fù)雜,因?yàn)樗鼤斐善茐?,使螢光團(tuán)無法繼續(xù)放光,,從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
細(xì)胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時(shí)間性和空間性,。當(dāng)di1個(gè)細(xì)胞興奮時(shí),,產(chǎn)生了一個(gè)電沖動,此時(shí),,細(xì)胞外的鈣離子流入該細(xì)胞內(nèi),,促使該細(xì)胞分泌神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級神經(jīng)細(xì)胞膜上的蛋白分子結(jié)合,,促使這一級神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生新的電沖動,。以此類推,神經(jīng)信號便一級一級地傳遞下去,,從而構(gòu)成復(fù)雜的信號體系,,終形成學(xué)習(xí)、記憶等大腦的高級功能,。在哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)中,,鈣離子同樣扮演著重要的信號分子的角色,。靜息狀態(tài)下大部分神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度約為50-100nM,而細(xì)胞興奮時(shí)鈣離子濃度能瞬間上升10-100倍,,增加的鈣離子對于突觸囊泡胞吐釋放神經(jīng)遞質(zhì)的過程必不可少,。眾所周知,只有游離鈣才具有生物學(xué)活性,,而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,,同時(shí)也受鈣結(jié)合蛋白的影響。細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,,其中包括電壓門控鈣離子通道,、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時(shí)受體電位C型通道(TRPC)等,。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強(qiáng)度表現(xiàn)出來,以反映神經(jīng)元活性,。該方法可以同時(shí)觀察多個(gè)功能或位置相關(guān)的腦細(xì)胞,。傳統(tǒng)鈣成像實(shí)驗(yàn)要求成像的光路極為穩(wěn)定。
利用鈣成像技術(shù)記錄大腦活動,,隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,,其主要原理是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,,以此細(xì)胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應(yīng)用于實(shí)時(shí)監(jiān)測一群相關(guān)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,,從而判斷其功能活動,。該技術(shù)的出現(xiàn)使得科學(xué)家可以親眼目睹神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)之中時(shí)間和空間上的傳遞穿梭。鈣成像數(shù)據(jù)采集盒擁有 2TB 存儲空間,,可選擇以太網(wǎng)或 Wi? 方式連接電腦,。合肥超微顯微鈣成像哪里有
鈣信號發(fā)揮著高度特異性的功能。鈣成像口碑好
鈣離子在很多生理活動中都發(fā)揮著重要作用,,除了在肌肉細(xì)胞收縮中扮演著重要角色,,鈣離子也是神經(jīng)元活動的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一:當(dāng)神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化,產(chǎn)生的動作電位傳導(dǎo)到神經(jīng)元軸突末梢時(shí),,細(xì)胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,,大量鈣離子內(nèi)流,包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,,下游神經(jīng)元就得以接受到上游的信號,。因此,鈣離子成像可以追蹤神經(jīng)元動作電位,,從而幫助我們了解神經(jīng)元集群的活動,,可以用于感知覺,,學(xué)習(xí)記憶,社會性行為等各種各樣的研究中,。鈣成像口碑好