某種物質(zhì)能產(chǎn)生熒光,，首要條件是分子必須具有吸收的結(jié)構(gòu)，即生色團（分子中具有吸收特征頻率的光能的基團）,。其次,，該物質(zhì)必須具有一定的量子產(chǎn)率和適宣的環(huán)境。我們把分子中發(fā)射熒光的基團稱為熒光團,。熒光團一定是生色團,，但生色團不一定是熒光團。因為,，如果生色團的量子產(chǎn)率等于零,，就不能發(fā)射出熒光，處于激發(fā)態(tài)的分子,，可以由許多方式（如熱,，碰撞）把能量釋放出來，發(fā)射熒光只是其中的一種方式,。此外,，一種物質(zhì)吸收光的能力及量子產(chǎn)率又與物質(zhì)所處的環(huán)境密切相關(guān)。多光子顯微鏡可以進行深層成像,，且具有三維成像的能力,，可以應(yīng)用于拍攝不透明的厚樣品。熒光多光子顯微鏡單分子成像定位

與傳統(tǒng)的單光子寬視野熒光顯微鏡相比,，多光子顯微鏡（MPM）具有光學切片和深層成像等功能,，這兩個優(yōu)勢極大地促進了研究者們對于完整大腦深處神經(jīng)的了解與認識。2019年,，JeromeLecoq等人從大腦深處的神經(jīng)元成像,、大量神經(jīng)元成像,、高速神經(jīng)元成像這三個方面論述了相關(guān)的MPM技術(shù)[1]。想要將神經(jīng)元活動與復雜行為聯(lián)系起來,，通常需要對大腦皮質(zhì)深層的神經(jīng)元進行成像,，這就要求MPM具有深層成像的能力。激發(fā)和發(fā)射光會被生物組織高度散射和吸收是限制MPM成像深度的主要因素,，雖然可以通過增加激光強度來解決散射問題,，但這會帶來其他問題，例如燒壞樣品,、離焦和近表面熒光激發(fā),。增加MPM成像深度比較好的方法是用更長的波長作為激發(fā)光。多光子顯微鏡代理多光子激光掃描顯微鏡是建立在激光掃描顯微鏡技術(shù)基礎(chǔ)上的實驗方法,，三維觀察上提供更的光學切片能力,。

    神經(jīng)科學重要的研究工具-多光子顯微鏡作為神經(jīng)科學重要的研究工具，近年來發(fā)展快速,，品牌也眾多,。我們通常都是在一間開著冷氣的房間里的超大防震臺上見過這樣一套設(shè)備。臺面上復雜的光路也讓我們在使用中小心翼翼,，生怕弄壞了哪里而無從修復,。你是否想象過一臺放在書桌邊上就能使用的多光子顯微鏡，一臺跟普通顯微鏡一樣操作簡便的多光子顯微鏡,，一臺不用擔心會碰壞的多光子顯微鏡,，一臺可以在不同實驗室之間搬來搬去的多光子顯微鏡，一臺可以從任意角度進行觀察掃描的多光子顯微鏡,？滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),，生產(chǎn)，銷售于一體的專注于神經(jīng)科學產(chǎn)品及致力于向高校,、科研機構(gòu)等領(lǐng)域提供實驗室一體化方案的高科技企業(yè),。業(yè)務(wù)服務(wù)范圍已遍布至全國各地幾百家實驗室。目前公司主營產(chǎn)品是享譽全球的國際品牌和產(chǎn)品,這些儀器設(shè)備都是科學研究所必備且不可替代的基礎(chǔ)儀器,。

多光子激發(fā)在紫外成像的優(yōu)勢在可見光脈沖中能得到紫外衍射的顯微觀察像,。即使不使用紫外域光源、光學元件用可見光源,、光學元件就能得到紫外光激勵的高空間分辨率圖像,。多光子在生物成像中的優(yōu)勢在生物顯微鏡觀察方面，較早考慮的是不損壞生物本身的活性狀態(tài),，維持水分、離子濃度,、氧和養(yǎng)分的流通,。在光觀察場合,，無論是熱還是光子能量方面都必須停留在細胞不受損傷的照射量、光能量內(nèi),。多光子顯微鏡則能夠滿足此,，而且還具有很多優(yōu)點。如三維分辨率,、深度侵入,、在散射效率、背景光,、信噪比,、控制等方面，均有以往激光顯微鏡不具備,，或具有無法比擬的超越特性,。帶寬足以覆蓋鈦藍寶石激光器的可調(diào)諧范圍和用于多光子顯微鏡的許多其它激光器的典型中心頻率。

多光子激光掃描顯微鏡行業(yè)發(fā)展,，世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,，德國是以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為，而日本以尼康和奧林巴斯公司為,，2020年,，上述企業(yè)占據(jù)著世界多光子激光掃描顯微鏡市場 64.44%的市場份額，其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向,。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,，中國市場這方面的需求增長更快，未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿?。多光子顯微鏡已經(jīng)被生物學家普遍的運用于實驗中,。美國熒光多光子顯微鏡實驗

多光子顯微鏡的大多數(shù)補償器都采用棱鏡。熒光多光子顯微鏡單分子成像定位

對于雙光子成像而言,，離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個比較大的深度限制因素,，而對于三光子成像這兩個問題大大減小，但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,，所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強度的熒光信號,。功能性3P顯微鏡比結(jié)構(gòu)性3P顯微鏡的要求更高，它需要更快速的掃描,，以便及時采樣神經(jīng)元活動,；需要更高的脈沖能量，以便在每個像素停留時間內(nèi)收集足夠的信號,。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),，該網(wǎng)絡(luò)既具有局部的連接又具有遠程的連接。要想將神經(jīng)元活動與行為聯(lián)系起來,，需要同時監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動,，大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)會在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,，要想了解這種快速的神經(jīng)元動力學，就需要MPM具備對神經(jīng)元進行快速成像的能力,?？焖費PM方法可分為單束掃描技術(shù)和多束掃描技術(shù)。熒光多光子顯微鏡單分子成像定位