在生物成像中,，我司多光子顯微鏡具有清（清晰），快（快速）,，深（深層）,，活這四個方面。結(jié)合了多光子上轉(zhuǎn)化材料以及時間編碼的結(jié)構(gòu)光超分辨技術(shù),，實現(xiàn)了快速（50MHz的掃描速度）,，超分辨（超衍射極限）成像。作為一種新的高速,，超高分辨率的成像系統(tǒng),，MUTE-SIM可以幫助我們對快速運動的生物圖像進行分辨率高的成像。盡管關于深度成像的應用我們沒有進一步展示,，但是結(jié)合1560nm近紅外光相對于可見光更佳的穿透性,，我們相信該技術(shù)將有利于對生物組織進行高速，超分辨,，高深度地成像,，有助于生物影像學的發(fā)展。滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),，生產(chǎn),，銷售于一體的專注于神經(jīng)科學產(chǎn)品及致力于向高校、科研機構(gòu)等領域提供實驗室一體化方案的高科技企業(yè),。業(yè)務服務范圍已遍布至全國各地幾百家實驗室,。目前公司主營產(chǎn)品是享譽全球的國際品牌和產(chǎn)品,這些儀器設備都是科學研究所必備且不可替代的基礎儀器。 全球多光子顯微鏡主要消費地區(qū)分析,，包括消費量及份額等,。在體多光子顯微鏡長時間觀察

使用MPM對神經(jīng)元進行成像時，通過隨機訪問掃描—即激光束在整個視場上的任意選定點上進行快速掃描—可以只掃描感興趣的神經(jīng)元,，這樣不僅避免掃描到任何未標記的神經(jīng)纖維,，還可以優(yōu)化激光束的掃描時間,。隨機訪問掃描可以通過聲光偏轉(zhuǎn)器（AOD）來實現(xiàn)，其原理是將具有一個射頻信號的壓電傳感器粘在合適的晶體上,，所產(chǎn)生的聲波引起周期性的折射率光柵,，激光束通過光柵時發(fā)生衍射。通過射頻電信號調(diào)控聲波的強度和頻率從而可以改變衍射光的強度和方向,，這樣使用1個AOD就可以實現(xiàn)一維橫向的任意點掃描,，利用1對AOD，結(jié)合其他軸向掃描技術(shù)可實現(xiàn)3D的隨機訪問掃描,。但是該技術(shù)對樣本的運動很敏感,，易出現(xiàn)運動偽影。目前,，快速光柵掃描即在FOV中進行逐行掃描,，由于利用算法可以輕松解決運動偽影而被普遍的使用。離體多光子顯微鏡三維分辨率多光子顯微鏡的發(fā)展現(xiàn)狀及未來發(fā)展趨勢,。

當激光光束焦點的位置在鏡面上,，此時被反射的激光在無限空間中成為準直光束，并在OBJ2的焦平面上形成了一個激光光斑,。同理,，如果橫向掃描光束，則會形成遠離傾斜鏡鏡面的焦點,，這又導致返回的光束會聚或發(fā)散,，進而OBJ2能在軸向不同位置形成焦點，通過這種方式即能實現(xiàn)連續(xù)的軸向掃描,。對于較小的傾斜角,，聚焦沒有球差。該組在實驗中表征了這種將橫向掃描轉(zhuǎn)換為軸向掃描技術(shù)的光學性能,，并使用它將光片顯微鏡的成像速度提升了一個數(shù)量級,，從而可以在三個維度上量化快速的囊泡動力學。該組還演示了使用雙光子光柵掃描顯微鏡以12 kHz進行共振遠程聚焦,，該技術(shù)可對大腦組織和斑馬魚心臟動力學進行快速成像,，并具有衍射極限的分辨率。

多光子激光掃描顯微鏡行業(yè)發(fā)展,，世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,，德國是以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為，而日本以尼康和奧林巴斯公司為,，2020年,，上述企業(yè)占據(jù)著世界多光子激光掃描顯微鏡市場 64.44%的市場份額，其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,，中國市場這方面的需求增長更快,，未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿Α６喙庾蛹す鈷呙栾@微鏡更能解決生物組織中深層物質(zhì)的層析成像問題, 擴大了應用范圍,。

我們要指出的是,，單光子激發(fā)熒光和雙光子激發(fā)熒光，是從熒光產(chǎn)生的機理上來區(qū)分的,。而共焦則是熒光顯微鏡的一種結(jié)構(gòu),，其目的是為了，通過共焦結(jié)構(gòu),，提高整個熒光顯微鏡的空間分辨率。所以共焦熒光顯微鏡可以根據(jù)激發(fā)光源的不同,，實現(xiàn)單光子共焦熒光成像或者雙光子共焦熒光成像,。往往一個普通的雙光子熒光顯微鏡（沒有共焦結(jié)構(gòu)）其空間分辨率也可以達到單光子共焦熒光顯微鏡的水平。這樣就可以簡化整個系統(tǒng),，相對來說,，就提高了激發(fā)光源的利用率，以及熒光的探測效率,，這個也是我們提倡雙光子熒光成像的原因之一,。雙光子熒光共焦顯微鏡由于雙光子效應和共焦結(jié)構(gòu)，分辨率則會更高,，而我們通常說的共焦顯微鏡都是指單光子激發(fā)熒光的,。多光子顯微鏡在臨床前評價IA形態(tài)、細胞外基質(zhì),、細胞密度和血管形成等方面顯示出強大的作用,。bruker多光子顯微鏡多光子激發(fā)

多光子顯微鏡作為神經(jīng)科學重要的研究工具，近年來發(fā)展快速,，品牌也眾多,。在體多光子顯微鏡長時間觀察

與傳統(tǒng)的單光子寬視野熒光顯微鏡相比，多光子顯微鏡（MPM）具有光學切片和深層成像等功能,，這兩個優(yōu)勢極大地促進了研究者們對于完整大腦深處神經(jīng)的了解與認識,。2019年，JeromeLecoq等人從大腦深處的神經(jīng)元成像,、大量神經(jīng)元成像,、高速神經(jīng)元成像這三個方面論述了相關的MPM技術(shù)。想要將神經(jīng)元活動與復雜行為聯(lián)系起來,，通常需要對大腦皮質(zhì)深層的神經(jīng)元進行成像,，這就要求MPM具有深層成像的能力。激發(fā)和發(fā)射光會被生物組織高度散射和吸收是限制MPM成像深度的主要因素,，雖然可以通過增加激光強度來解決散射問題,，但這會帶來其他問題,，例如燒壞樣品、離焦和近表面熒光激發(fā),。增加MPM成像深度比較好的方法是用更長的波長作為激發(fā)光,。在體多光子顯微鏡長時間觀察