2020年，TonmoyChakraborty等人提出了一種加快2PM軸向掃描速度的方法[2],。在光學顯微鏡中,，物鏡或樣品的緩慢軸向掃描速度限制了體積成像的速度,。近年來，通過使用遠程聚焦技術或電可調諧透鏡（ETL）已經實現了快速軸向掃描,；但是,，遠程聚焦中反射鏡的機械驅動會限制軸向掃描速度，ETL會引入球面像差和更高階像差,，從而無法進行高分辨率成像,。為了克服這些局限性，該組引入了一種新穎的光學設計,，能將橫向掃描轉換為可用于高分辨率成像的無球差的軸向掃描,。該設計有兩種實現方式，第一種能夠執(zhí)行離散的軸向掃描,，另一種能夠進行連續(xù)的軸向掃描,。具體裝置如圖3a所示,，由兩個垂直臂組成,，每個臂中都有一個4F望遠鏡和一個物鏡。遠程聚焦臂包含一個檢流掃描鏡（GSM）和一個空氣物鏡（OBJ1）,，另一個臂（稱為照明臂）由一個水浸物鏡（OBJ2）構成,。將這兩個臂對齊，以使GSM與兩個物鏡的后焦平面共軛,。準直的激光束被偏振分束器反射到遠程聚焦臂中,，GSM對其進行掃描，進而使得OBJ1產生的激光焦點進行橫向掃描,。雙光子共聚焦顯微鏡比單光子共聚焦顯微鏡具有更亮的橫向分辨率和縱向分辨率,。bruker多光子顯微鏡代理商

針對雙光子熒光顯微鏡的特點，從理論上分析雙光子成像特點,，并搭建一套時間,、空間分辨率高，能實時,、動態(tài),、多參數測量的雙光子熒光顯微鏡系統。具體系統應實現∶（1）能對不同染料的雙光子熒光進行探測;（2）用特定染料對樣品標記以后,，能實現雙光子熒光的三維成像;（3）通過實驗的研究,，改進雙光子熒光顯微成像系統;（4）在保證成像質量的前提下，簡化整個系統,，使得實驗操作方便,、安全。單光子激發(fā)熒光的過程,，就是熒光分子吸收一個光子,，從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),，躍遷以后，能量較大的激發(fā)態(tài)分子,，通過內轉換把部分能量轉移給周圍的分子,，自己回到比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動能級。處于比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動能級像在生物醫(yī)學光學成像研究中顯示了較大的優(yōu)勢,。而在顯微成像中,，雙光子熒光顯微鏡憑其獨有的優(yōu)點，成為研究細胞結構和功能檢測的重要工具,。清醒動物多光子顯微鏡峰值功率密度中國市場多光子顯微鏡進出口貿易趨勢,。

某種物質能產生熒光，首要條件是分子必須具有吸收的結構,，即生色團（分子中具有吸收特征頻率的光能的基團）,。其次，該物質必須具有一定的量子產率和適宣的環(huán)境,。我們把分子中發(fā)射熒光的基團稱為熒光團,。熒光團一定是生色團，但生色團不一定是熒光團,。因為,，如果生色團的量子產率等于零，就不能發(fā)射出熒光,，處于激發(fā)態(tài)的分子,，可以由許多方式（如熱，碰撞）把能量釋放出來,，發(fā)射熒光只是其中的一種方式,。此外，一種物質吸收光的能力及量子產率又與物質所處的環(huán)境密切相關,。

從產品類型及技術方面來看,，正置顯微鏡占據絕大多數市場。2020年,，全球多光子激光掃描正置顯微鏡市場達到87.30百萬美元,，預計到2027年該部分市場將達到154.02百萬美元，年復合增長率（2021-2027）為8.48%,。中國多光子激光掃描正置顯微鏡市場達到13.32百萬美元,，預計到2027年該部分市場將達到25.21百萬美元，年復合增長率（2021-2027）為9.58%,。從產品市場應用情況來看,，研究機構為主要應用領域，2020年約占全球市場46.28%,。2020年,，全球多光子激光掃描顯微鏡研究機構應用消費量為174臺,，預計2027年達到349臺，2021-2027年復合增長率（CAGR）為9.72%,。多光子顯微鏡將生物打印結構準確定位和定向到特定的解剖部位,，使其能夠在小鼠組織內制造復雜結構。

快速光柵掃描有多種實現方式,，使用振鏡進行快速2D掃描,，將振鏡和可調電動透鏡結合在一起進行快速3D掃描，但可調電動透鏡由于機械慣性的限制在軸向無法快速進行焦點切換,，影響成像速度,，現可使用空間光調制器（SLM）代替。遠程聚焦也是一種實現3D成像的手段,，如圖2所示,。在LSU模塊中，掃描振鏡進行橫向掃描,，ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,，通過調控M的位置實現軸向掃描。該技術不僅可以校正主物鏡L2引入的光學像差,，還可以進行快速的軸向掃描,。想要獲得更多神經元成像,，可以通過調整顯微鏡的物鏡設計來擴大FOV,，但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大，無法快速移動以進行快速軸向掃描,，因此大型FOV系統依賴于遠程聚焦,、SLM和可調電動透鏡。多光子顯微鏡已經被生物學家普遍的運用于實驗中,。美國飛秒激光多光子顯微鏡單分子成像定位

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世界多光子激光掃描顯微鏡產業(yè)主要布局在德國和日本，德國是以徠卡顯微系統和蔡司為,，而日本以尼康和奧林巴斯公司為,，2020年，上述企業(yè)占據著世界多光子激光掃描顯微鏡市場 64.44%的市場份額,，其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向,。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長，中國市場這方面的需求增長更快,，未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿?。國內顯微鏡制造市場目前斷層嚴重。目前我國顯微鏡行業(yè)發(fā)展缺乏技術沉淀,，20 年以上經營積累的企業(yè)十分稀缺,，深度精密制造,、光學重要部件設計及工藝嚴重制約產業(yè)升級。目前中國顯微鏡中如多光子顯微鏡,、共聚焦掃描和電子顯微鏡等主要集中在徠卡顯微系統,、蔡司、尼康,、奧林巴斯等國外企業(yè),。國內具備生產顯微鏡能力的企業(yè)屈指可數，若國內顯微鏡企業(yè)能打破技術壁壘,，切入顯微鏡市場,，企業(yè)的生產經營將騰躍至一個更高的格局。bruker多光子顯微鏡代理商