dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學(xué)試劑,通常以100mM的濃度提供。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),、DNA測序、填入反應(yīng),、切口平移,、cDNA合成和TdT加尾反應(yīng)等。dATP的化學(xué)結(jié)構(gòu)是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,,它是DNA聚合酶在DNA復(fù)制過程中用來合成DNA鏈的原料之一,。在Sanger測序中,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,,后者是dATP的一種衍生物,,缺少3'-OH基團,用于鏈終止反應(yīng),。dATP溶液應(yīng)儲存在-20°C的條件下以保持其穩(wěn)定性和活性,,有效期通常為兩年。在生產(chǎn)過程中,,dATP通常按照ISO9001標(biāo)準(zhǔn)進行,并在D級清潔室中進行以確保高質(zhì)量和純度,。HPLC確認的純度通常大于99%,。dATP溶液不含qPCR、PCR,、逆轉(zhuǎn)錄抑制劑,,也不含DNase、RNase以及人類和大腸桿菌DNA,,以避免實驗過程中的污染,。由于Cas9 NLS系統(tǒng)不涉及DNA的整合,因此降低了外源DNA整合至細胞基因組的風(fēng)險 。Recombinant Human CADM3 Protein,His Tag
5'DNA腺苷?;噭┖惺且环N用于將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷?;揎椀膶嶒灩ぞ撸渲饕獞?yīng)用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆,、高通量測序建庫或PCR檢測等時,,在3'端添加的接頭的制備。以下是5'DNA腺苷?;噭┖械囊恍╆P(guān)鍵特點和使用方法:1.**高效轉(zhuǎn)化**:該試劑盒能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉(zhuǎn)化成腺苷?;疍NA(AppDNA),從而提高產(chǎn)量并避免膠回收提純步驟,。2.**操作簡便**:單步反應(yīng)即可完成腺苷?;瑹o需復(fù)雜的操作或額外的純化步驟,。3.**高溫反應(yīng)**:在65℃的高溫下進行反應(yīng),,這有助于避免DNA或RNA的二級結(jié)構(gòu)對腺苷酰化反應(yīng)的干擾,。4.**適用性廣**:適用于pmol級別至μmol級別的底物量,,可以方便地根據(jù)實驗需要放大反應(yīng)體系。5.**組成成分**:試劑盒通常包含腺苷?;?Adenylase),、ATP和所需的緩沖液,以及用于啟動反應(yīng)的5'-磷酸化的單鏈DNA,。6.**保存條件**:一般建議在-20℃保存,,有效期至少一年,長期儲存建議在-70℃,。7.**注意事項**:底物單鏈DNA或RNA的5'端磷酸化是必須的,,而3'端可以進行氨基化等封閉,也可以不封閉,。反應(yīng)完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活A(yù)denylase,,防止去腺苷酰化現(xiàn)象,。Recombinant Mouse Galectin 3 Protein,His Tag牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I是一種來源于牛痘病毒的酶,,有多種作用于DNA分子的能力。
Lambda核酸外切酶的活性表現(xiàn)在其高度特異性和過程性地消化5'端磷酸化的雙鏈DNA,。以下是一些關(guān)鍵點,,描述了Lambda核酸外切酶的活性特征:1.**高度過程性(HighlyProcessive)**:Lambda核酸外切酶是一種高度過程性的5'→3'外切酶,這意味著它能夠連續(xù)消化多個核苷酸,,而不需要在每一步之后重新結(jié)合底物,。2.**底物特異性(SubstrateSpecificity)**:該酶選擇性地消化5'端磷酸化的雙鏈DNA鏈,,對單鏈DNA和非磷酸化DNA表現(xiàn)出低活性。3.**活性定義(ActivityDefinition)**:一個活性單位定義為在37°C下,,30分鐘內(nèi)在50μl反應(yīng)體積中,,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer和1μg聲波破碎的雙鏈[3H]-DNA底物,產(chǎn)生10nmol酸溶性脫氧核苷酸所需的酶量,。4.**反應(yīng)條件(ReactionConditions)**:通常在37°C下進行孵育,,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer,該緩沖液包含67mMGlycine-KOH,2.5mMMgCl2,50μg/mlBSA,,pH值為9.4,。5.**熱失活(HeatInactivation)**:通過在75°C下加熱10分鐘可以使Lambda核酸外切酶失活。6.**特定活性(SpecificActivity)**:Lambda核酸外切酶的特定活性為50,000單位/毫克蛋白,。
核酸(DNA和RNA)的可視化是分子生物學(xué)實驗中的一項基本技術(shù),,用于檢測和分析核酸的存在、大小,、數(shù)量和純度,。以下是幾種常用的核酸可視化方法:1.**紫外線(UV)檢測**:-利用核酸分子對UV光的吸收特性,特別是在260nm波長下的吸收峰,。-常用的UV檢測方法包括凝膠電泳后的凝膠成像系統(tǒng),,可以觀察到凝膠中DNA或RNA的條帶。2.**熒光染料染色**:-使用熒光染料,,如溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)或SYBRGreen,,這些染料可以與核酸結(jié)合并在特定波長的光照射下發(fā)出熒光。-EB常用于凝膠電泳后的DNA可視化,,而SYBRGreen可用于實時定量PCR(qPCR)中DNA的檢測,。3.**凝膠電泳**:-通過將核酸樣品加載到凝膠中,利用電場驅(qū)動核酸分子按大小分離,,然后通過上述的UV或熒光染料進行可視化,。4.**紫外交聯(lián)**:-某些熒光染料,如BODIPY或Cy5,,可以通過紫外交聯(lián)直接結(jié)合到核酸上,,提供更高的靈敏度和特異性。5.**銀染**:-一種比EB染色更靈敏的染色方法,,通過銀離子與核酸的結(jié)合,,然后還原成金屬銀,形成可見的黑色或棕色條帶,。6.**化學(xué)發(fā)光檢測**:-使用特定的化學(xué)發(fā)光底物,如熒光素或魯米諾,,與核酸結(jié)合后,,在氧化過程中產(chǎn)生光信號,。TBE (Thymine base editor):這是一種新型的堿基編輯工具,不依賴脫氨酶,,能夠通過人源化尿嘧啶DNA-糖基化酶,。
脫氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosinetriphosphate,dATP)是一種去氧核苷酸三磷酸,,它是DNA合成和復(fù)制過程中必需的原料之一,。dATP的結(jié)構(gòu)與腺苷三磷酸(ATP)相似,但dATP的五碳糖2號碳上缺少一個-OH基,,取而代之的是一個氫原子,。dATP是四種dNTPs(脫氧核糖核苷酸三磷酸)之一,四種dNTPs包括dATP,、dCTP,、dGTP和dTTP,它們分別對應(yīng)DNA中的腺嘌呤,、胞嘧啶,、鳥嘌呤和胸腺嘧啶。dATP的化學(xué)式為C10H16N5O12P3,,分子量為491.182,,CAS登錄號為1927-31-7。在實驗室中,,dATP通常以100mM的濃度提供,,用于各種分子生物學(xué)技術(shù),如PCR,、DNA測序和分子克隆技術(shù),。dATP溶液需要在低溫條件下保存,通常是-20℃,,以保持其穩(wěn)定性和活性,。在DNA測序中,dATP與ddATP一起使用,,ddATP是dATP的衍生物,,它缺少3'-OH基團,用于Sanger測序中的鏈終止反應(yīng),。在PCR中,,dATP作為DNA聚合酶的底物,用于合成新的DNA鏈,。dNTPs的濃度在PCR反應(yīng)中非常重要,,適當(dāng)?shù)臐舛扔兄跍p少錯配和提高擴增效率。通常,,四種dNTPs以等濃度混合使用,,以減少PCR過程中的錯配誤差,。在某些情況下,根據(jù)目標(biāo)序列的長度和組成,,可能需要調(diào)整dNTPs的濃度,,以優(yōu)化PCR反應(yīng)。牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I具有特異性識別能力,,能夠識別雙鏈DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列,。Recombinant Human CD31/PECAM-1 Protein,hFc Tag
Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術(shù)。Recombinant Human CADM3 Protein,His Tag
BloodDirectPCRMasterMix(2×)適合血液樣本的PCR擴增主要通過以下幾個方面:1.**抗血液抑制劑能力**:該預(yù)混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,,如膽酸鹽,、血紅素、蛋白質(zhì)等,。2.**優(yōu)化的緩沖體系**:預(yù)混合溶液中的緩沖體系經(jīng)過特別優(yōu)化,,以適應(yīng)血液樣本中的特定條件,包括pH,、離子強度和Mg2+濃度,,從而提高PCR擴增的效率和特異性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,,能夠在復(fù)制DNA時減少錯誤,,保證擴增結(jié)果的準(zhǔn)確性。4.**快速擴增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix產(chǎn)品具有快速擴增的特點,,可以縮短PCR實驗的時間,。5.**寬泛的GC含量適應(yīng)性**:該產(chǎn)品可以用于擴增不同GC含量的基因,包括高GC和低GC區(qū)域,,提高了PCR的適用性,。6.**直接使用血液樣本**:無需對血液樣本進行DNA提取或純化,可以直接將抗凝血樣品或干血斑樣品加入PCR反應(yīng)中,。7.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉,,適用于不同來源的血液樣本,。8.**簡化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步驟,BloodDirectPCRMasterMix簡化了實驗操作流程,,減少了實驗時間和潛在的污染風(fēng)險,。Recombinant Human CADM3 Protein,His Tag