λ DNA HindIII:DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)的經(jīng)典選擇λ DNA HindIII 是一種經(jīng)典的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),,廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小,。它由λ噬菌體DNA經(jīng)HindIII限制性內(nèi)切酶完全酶切后純化而成,,包含8條不同長(zhǎng)度的雙鏈線狀DNA片段。產(chǎn)品特點(diǎn)片段組成:λ DNA HindIII Marker 包含8條DNA片段,,大小分別為125 bp,、564 bp、2027 bp,、2322 bp,、4361 bp、6557 bp,、9416 bp和23130 bp,。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接上樣,,無需額外處理,。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,,條帶亮度均勻,。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長(zhǎng)期保存,室溫下保存3個(gè)月,。使用方法預(yù)處理:為獲得清晰的電泳圖像,,建議在65℃加熱5分鐘,隨后立即冰浴3分鐘,。上樣量:根據(jù)加樣孔的大小,,每次取1-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。電泳條件:推薦使用0.6%-1.2%的瓊脂糖凝膠,,電壓4-10 V/cm,,電泳時(shí)間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,,在紫外燈下觀察,。注意事項(xiàng)COS末端結(jié)合:λ DNA Marker的末端可能由COS末端結(jié)合在一起,預(yù)處理可解開這種結(jié)合,。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,,以獲得比較好分離效果。Phusion DNA Polymerase具有極高的保真性,,其錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍以上,,比Pfu DNA聚合酶低6倍。福建人源膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)在表達(dá)復(fù)雜蛋白質(zhì)時(shí),,可以采取多種優(yōu)化策略來提高表達(dá)效率和蛋白質(zhì)質(zhì)量,。以下是一些具體的優(yōu)化策略:1.密碼子優(yōu)化:通過使用畢赤酵母偏好的密碼子,可以顯著提高蛋白產(chǎn)量,,同時(shí)合理控制A+T的含量及分布,,避免由于某些稀有密碼子的出現(xiàn)導(dǎo)致翻譯提前終止。2.啟動(dòng)子選擇:選擇適用的啟動(dòng)子有利于外源蛋白的高效合成,,如AOX1基因的強(qiáng)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子PAOX1,,可以通過更換不同的碳源實(shí)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)與外源蛋白合成的分離。3.信號(hào)肽篩選:N端信號(hào)肽的序列會(huì)影響蛋白易位進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的效率,,通過修飾N-末端或去除額外的接頭肽可以提高外源蛋白分泌的效率,。4.敲除蛋白酶基因:畢赤酵母胞內(nèi)或胞外存在蛋白酶,可能導(dǎo)致外源蛋白降解,。通過敲除相關(guān)蛋白酶的基因,,可以減少外源蛋白的降解風(fēng)險(xiǎn)。5.共表達(dá)促折疊因子:共表達(dá)如分子伴侶PDI或轉(zhuǎn)錄因子Aft1等促折疊因子,,可以提高重組蛋白的表達(dá)量和分泌效率,。6.多拷貝數(shù)外源基因:插入多拷貝數(shù)的外源基因可以提高表達(dá)效率。7.發(fā)酵條件優(yōu)化:通過優(yōu)化發(fā)酵條件,,如溫度,、pH、碳源,、溶氧等,,可以提高外源蛋白的表達(dá)量和質(zhì)量。河北畢赤酵母表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)研發(fā)Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在克隆實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用 高保真擴(kuò)增和預(yù)混染料簡(jiǎn)化了克隆實(shí)驗(yàn)流程,,減少后續(xù)的步驟,。
10×MOPSRNA緩沖液是一種專為RNA電泳設(shè)計(jì)的緩沖液,具有以下科研用途和特點(diǎn):1.RNA電泳:-10×MOPSRNA緩沖液主要用于RNA電泳,,包括甲醛變性電泳和非變性電泳,。它提供了一個(gè)穩(wěn)定的pH環(huán)境,有助于RNA分子在凝膠中的有效分離,。2.高分辨率:-該緩沖液具有高分辨率的特點(diǎn),,能夠清晰地分離不同大小的RNA分子,適用于總RNA,、mRNA,、小RNA等的分離和分析。3.無酶污染:-10×MOPSRNA緩沖液經(jīng)過RNasefree處理,,不含DNA酶和RNA酶,,確保在電泳過程中不會(huì)對(duì)RNA樣品造成降解。4.使用說明:-使用時(shí),,通常將10×MOPSRNA緩沖液用DEPC處理水稀釋至1×工作濃度,。例如,取100mL的10×MOPS電泳緩沖液,,加入20mL37%甲醛溶液,,再加入880mLDEPC水,充分混勻,,配制成1×MOPS電泳緩沖液,。5.保存條件:-10×MOPSRNA緩沖液應(yīng)避光保存,室溫下有效期為1年,。見光后緩沖液可能會(huì)變黃,,但淡黃色不影響使用,顏色過深則不宜使用,。6.安全操作:-操作時(shí)應(yīng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,,避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。MOPS對(duì)人體有害或有刺激性,。
DL100 Plus DNA Marker:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DL100 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),,廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小,。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,,能夠?yàn)镈NA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DL100 Plus DNA Marker 由11條線狀雙鏈DNA片段組成,,片段大小分別為100 bp,、200 bp、300 bp,、400 bp,、500 bp、600 bp,、700 bp,、800 bp、900 bp,、1000 bp和1500 bp,。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,,使用時(shí)無需額外添加,直接上樣,。清晰的條帶:電泳圖像清晰,,背景干凈,條帶亮度均勻,。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存6個(gè)月,,長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,。如果加樣孔較寬,,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.2%-2.0%的瓊脂糖凝膠,,0.5×TBE或1×TAE緩沖液,,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結(jié)束后,,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,,紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,,避免反復(fù)凍融,。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用質(zhì)量好的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果,。染料選擇:如果使用Goldview等染料,,由于靈敏度較低,建議適當(dāng)增加Marker的上樣量,。Taq PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 展現(xiàn)出的性能,。其高靈敏度使其能夠檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)DNA。
MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free):高效,、穩(wěn)定的RNA電泳解決方案在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,,RNA電泳是分析RNA完整性、大小和純度的關(guān)鍵技術(shù),。然而,,RNA的穩(wěn)定性較差,容易被RNase降解,,因此RNA電泳中使用無RNase污染的緩沖液至關(guān)重要,。MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free)憑借其高效的緩沖能力和無RNase污染的特點(diǎn),成為RNA電泳的理想選擇,。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free)是一種高濃度,、無RNase污染的緩沖液,主要成分包括MOPS(3-嗎啉丙磺酸)、乙酸鈉和EDTA,。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,,確保RNA的完整性。無RNase污染:經(jīng)過特殊處理,,確保無RNase污染,,能夠有效保護(hù)RNA樣品免受降解,。高效緩沖能力:MOPS緩沖液的pH值接近中性(pH 7.0-7.5),,能夠在電泳過程中維持穩(wěn)定的pH環(huán)境,避免RNA降解,。高分辨率:MOPS緩沖液具有較低的粘度和較高的緩沖能力,,能夠有效提高電泳分辨率,確保RNA條帶清晰,。濃縮設(shè)計(jì):10×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本,。使用方法使用MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free)時(shí),,需按照以下步驟操作:配制1×工作液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量的10×MOPS緩沖液,,加入去離子水稀釋至1×工作液,。AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 采用了優(yōu)化的高保真DNA聚合酶和反應(yīng)體系能夠?qū)崿F(xiàn)超快速的PCR擴(kuò)增。天津畢赤酵母分泌表達(dá)技術(shù)服務(wù)開發(fā)
在DNA合成過程中,,100 mM dATP溶液能夠快速參與反應(yīng),,顯著提高合成效率。提高數(shù)據(jù)產(chǎn)出效率,。福建人源膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free):RNA電泳的可靠選擇Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)是一種為RNA電泳設(shè)計(jì)的緩沖液,,廣應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。其主要成分包括450 mM Tris-硼酸,、10 mM EDTA和DEPC處理水,。這種配方經(jīng)過特殊處理,確保無RNase污染,,能夠有效保護(hù)RNA樣品免受降解,。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)無RNase污染:該緩沖液經(jīng)過DEPC處理,確保無RNase污染,,適用于RNA電泳,。高效分離:TBE緩沖液的緩沖能力較弱,適合分離小于2000 bp的DNA或RN片段,。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView)。穩(wěn)定性高:5×TBE濃縮液比10×TBE更穩(wěn)定,不易產(chǎn)生沉淀,,適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。使用方法稀釋緩沖液:使用時(shí)需用DEPC處理水或其他RNase-free的純水將5×TBE稀釋為0.5×TBE或1×TBE工作液。制備凝膠:用稀釋后的TBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠,。電泳操作:將RNA樣品加入凝膠孔中,,使用稀釋后的TBE緩沖液進(jìn)行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,,使用RNase-free的核酸染料對(duì)凝膠進(jìn)行染色,,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。保存與注意事項(xiàng)保存條件:Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)應(yīng)保存在室溫或4℃條件下,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫或強(qiáng)光下,。福建人源膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)臨床前研究