Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒，MV)為例,，評估了四種不同核酸酶（BenzonaseTM,、DeneraseTM,、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶）對于染色質(zhì)DNA去除的效果,。Vero細(xì)胞通過微載體貼壁培養(yǎng)來生產(chǎn)麻疹病毒MV,，72hr后收獲上清液,，使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份,，置于-80℃保存便于后續(xù)使用。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對應(yīng)鹽濃度,，并加入50 U/ml核酸酶,，37℃孵育2hr進(jìn)行消化，消化后留樣,；將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子,，收集流穿液，之后洗雜,、洗脫,，并分別留樣。通過SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn),，相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶,，在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段，甚至將核小體DNA剪切更徹底,。生理鹽濃度下,，M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優(yōu)于常用核酸酶，對HCD的去除有些本質(zhì)區(qū)別,。北京生理鹽條件中鹽核酸酶70950

病毒載體作為細(xì)胞藥物生產(chǎn)的關(guān)鍵原材料,，直接關(guān)系到細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量。載體質(zhì)量的控制和工藝穩(wěn)定性和批間一致性都是關(guān)系到產(chǎn)品能否產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵,。在生產(chǎn)純化過程中,，需要去除上游過程中的培養(yǎng)基成分、誘導(dǎo)劑,、宿主蛋白和核酸等雜質(zhì),，但是由于逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒比較大，高異質(zhì)表面糖蛋白,，而且活性易于受剪切影響,，對下游純化提出了巨大的挑戰(zhàn)。目前病毒載體純化方法包括超速離心,、離子交換層析,、分子排阻層析、親和層析,、滲濾等,。各種方法各有利弊，就產(chǎn)業(yè)化而言,，離子交換純化效果比較好,，條件易于摸索，易于規(guī)模放大,。青海培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶70950-160ArcticZymes的產(chǎn)品開發(fā),、生產(chǎn),、銷售和營銷過程均通過ISO13485質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的認(rèn)證。

核酸酶活性受到很多因素影響,，如鹽濃度,、pH、底物,、溫度等,。因此，不同客戶,、不同項目中核酸酶的使用條件都不一,。目前，生物制藥行業(yè)對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,，如生理鹽或低鹽濃度,、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目,，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,，而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整,，同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細(xì)胞DNA（HCD）的去除效果更好,、病毒載體得率更高。經(jīng)過工藝優(yōu)化后,，可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2,，且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高。

ArcticZymes Technologies有兩條產(chǎn)品線,，分別針對分子診斷和生物藥物生產(chǎn)兩個領(lǐng)域,。在分子診斷領(lǐng)域，產(chǎn)品有蝦堿酶（SAP）,、UNG酶,、等溫擴(kuò)增酶（IsoPol）、連接酶,、蛋白酶,、內(nèi)切核酸酶及外切核酸酶等，涉及核酸抽提,、擴(kuò)增及測序等應(yīng)用。在生物藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,，全球創(chuàng)新的鹽活性核酸酶（Salt Active Nucleases, SANs)系列產(chǎn)品以其獨特優(yōu)勢,，在細(xì)胞基因藥物及RNA藥物生產(chǎn)中表現(xiàn)出更好的性能。其中,，鹽活性核酸酶SANs系列產(chǎn)品包含兩款產(chǎn)品,，分別是SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,；兩款酶的差別在于發(fā)揮酶活的鹽濃度范圍分別是生理鹽濃度范圍和400-600mM高鹽濃度范圍。M-SAN HQ ELISA Kit能夠定量檢測M-SAN HQ中鹽核酸酶殘留,。

此外,，文章作者對每個步驟的樣品進(jìn)行納米顆粒分析（NTA），結(jié)果發(fā)現(xiàn)：澄清環(huán)節(jié)后,，M-SAN HQ中鹽核酸酶和Benzonase處理組才出現(xiàn)比較明確的LV病毒顆粒峰,；TFF處理后，回流液樣品的LV病毒顆粒峰更加尖銳,，表明病毒顆粒分散度更好,、穩(wěn)定性更高?；亓饕旱腘TA結(jié)果進(jìn)一步表明,，M-SAN HQ中鹽核酸酶處理組只有一個病毒顆粒峰，而Benzonase處理組的回流液中有三個峰,。作者推測Benzonase處理組的病毒顆粒還有嚴(yán)重的病毒團(tuán)聚現(xiàn)象,，而呈現(xiàn)多峰現(xiàn)象。ArcticZymes精于規(guī)?；a(chǎn)獨特特性的酶產(chǎn)品,，于2005年在證券交易所上市。安徽M-SAN HQ中鹽核酸酶70950-160

瓊脂糖膠結(jié)果顯示,，M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD消化成小于8nt的片段,。北京生理鹽條件中鹽核酸酶70950

M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣。例如,，該酶適宜的鹽濃度（NaCl）范圍是0mM-225mM,，能耐受400mM NaCl濃度。適宜反應(yīng)溫度為20℃-37℃,，能耐受4℃-40℃,。Mg2+濃度大于0.5mM即可，在4-15mM范圍即可表現(xiàn)更高活性,。跟其他核酸酶不同,，M-SAN HQ中鹽核酸酶不是堿性核酸酶，其適宜pH為7.2-8.7,，能耐受6.3-8.7,。綜合這些特點，在生理鹽條件下,，M-SAN HQ的酶活是傳統(tǒng)全能核酸酶的5倍左右,。因此，可以說M-SAN HQ是更適合生理鹽條件下的核酸酶,。北京生理鹽條件中鹽核酸酶70950